薏苡仁蛋白的提取及其功能的研究

论文摘要

薏苡仁（Coix lachryma-jobi L.）属于禾本科植物,蛋白质含量丰富,营养价值较高,是卫生部规定的药食兼用食物之一。薏苡仁对生长环境要求不高,我国大江南北均有种植,资源极为丰富。当前,我国的薏苡仁深加工尚处于较低水平,产品品种较少。对于薏苡仁蛋白,国内也尚未见到有系统的研究,因此开发薏苡仁蛋白产品具有一定的现实意义。本研究以脱脂薏苡仁粉为原料,在研究薏苡仁蛋白相关理化性质的基础上,研究不同方法提取的薏苡仁蛋白的抗肝损伤特性,为拓展薏苡仁蛋白的实际应用提供理论依据。1.薏苡仁蛋白提取以及分析表明：薏苡仁球蛋白的等电点为pH4.0；清蛋白、球蛋白和醇溶蛋白占薏苡仁蛋白的比例分别为18.3%、8.80%和64.3%。清蛋白的分子量主要在10kDa～90kDa之间,球蛋白在15kDa-62kDa之间；醇溶蛋白在19kDa-40kDa之间。氨基酸种类较为齐全,比例比较平衡；其中谷氨酸含量最高,必需氨基酸中则以亮氨酸含量较高,赖氨酸为第一限制氨基酸。2.以脱脂薏苡仁粉为原料,在半胱氨酸盐酸盐预处理的基础上,通过正交试验分别研究了高温α-淀粉酶、真菌淀粉酶两种酶提取薏苡仁蛋白的最佳工艺条件。试验表明：预处理后的薏苡仁粉通过高温α-淀粉酶提取的最佳条件为：在80℃下,加入200U高温α-淀粉酶/克淀粉,液化4h所得产物中薏苡仁蛋白含量较高,淀粉残留较少。但是真菌α-淀粉酶提取蛋白时,淀粉残留严重,效果不佳。3.以昆明种小鼠为研究对象,将所提取的薏苡仁蛋白掺入饲料中,按高、低剂量组喂养30天。实验过程中,灌胃CCl4建立小鼠急性化学性肝损伤模型。实验结束后,测定血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活力和肝脏丙二醛（MDA）含量,并通过肝组织病理切片观察病理变化。结果表明：小鼠食用薏苡仁蛋白0.28g/（只·d）时,对CCl4所致急性肝损伤具有保护作用。以50%乙醇建立小鼠慢性酒精性肝损伤模型；基础组给予生理盐水作为阴性对照。测定小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）活力和肝脏丙二醛（MDA）、还原性谷胱甘肽（GSH）和甘油三酯（TG）含量。结果表明：小鼠食用薏苡仁蛋白0.28-0.56g/（只·d）时,对酒精所致慢性酒精性肝损伤具有保护作用。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 薏苡仁概论
• 1.1.1 薏苡仁资源分布及其生态学特征
• 1.1.2 薏苡仁的化学组成
• 1.2 薏苡仁及其加工制品的应用研究状况
• 1.2.1 薏苡仁在中医学领域的应用
• 1.2.2 薏苡仁在食品领域的应用与研究
• 1.2.3 薏苡仁蛋白的研究进展
• 1.3 本论文研究意义与主要内容
• 1.3.1 研究意义
• 1.3.2 研究的主要内容
• 第二章 薏苡仁蛋白理化性质的研究
• 2.1 概述
• 2.2 试验材料
• 2.2.1 主要试剂
• 2.2.2 主要仪器
• 2.3 试验方法
• 2.3.1 样品中淀粉、灰分、脂肪及蛋白质含量的测定方法
• 2.3.2 薏苡仁蛋白中球蛋白等电点测定
• 2.3.3 薏苡仁蛋白中不同组分的分离、提取和组成表征
• 2.3.4 薏苡仁蛋白不同组分的氨基酸组成分析
• 2.4 结果与讨论
• 2.4.1 脱脂薏苡仁粉营养成分分析
• 2.4.2 薏苡仁球蛋白等电点测定结果
• 2.4.3 薏苡仁蛋白不同组成的分离提取分析结果
• 2.4.4 薏苡仁蛋白不同组分的氨基酸分析结果
• 2.5 本章小结
• 第三章 薏苡仁蛋白提取工艺的研究
• 3.1 概述
• 3.2 试验材料与仪器设备
• 3.2.1 主要试剂
• 3.2.2 主要仪器
• 3.3 试验方法
• 3.3.1 脱脂薏苡仁主要成分的分析
• 3.3.2 薏苡仁蛋白提取工艺流程
• 3.3.3 薏苡仁粉预处理的方法及设计
• 3.3.4 不同淀粉酶提取薏苡仁蛋白的比较试验
• 3.4 结果与讨论
• 3.4.1 薏苡仁蛋白主要成分测定结果
• 3.4.2 薏苡仁粉预处理对薏苡仁蛋白溶出效果的影响
• 3.4.3 高温α-淀粉酶水解提取薏苡仁蛋白的正交试验结果
• 3.4.4 真菌α-淀粉酶提取薏苡仁蛋白的正交试验结果
• 3.5 本章小结
• 第四章 薏苡仁蛋白抗肝损伤作用的研究
• 4.1 概述
• 4.2 试验材料与仪器设备
• 4.2.1 主要试剂及材料
• 4.2.2 主要仪器
• 4.2.3 试验用薏苡仁蛋白的提取
• 4.3 试验方法
• 4.3.1 动物的喂养与保肝试验方法
• 4.3.2 肝匀浆的制备方法
• 4.3.3 肝组织的蛋白含量测定方法
• 4.3.4 血清中谷丙转氨酶（ALT）,谷草转氨酶（AST）测定方法
• 4.3.5 肝脏中丙二醛（MDA）含量测定
• 4.3.6 肝脏中还原性谷胱甘肽（GSH）的测定
• 4.3.7 肝脏中甘油三酯（TG）的测定
• 4.3.8 统计学方法
• 4.4 结果与讨论
• 4.4.1 薏苡仁蛋白抗化学性肝损伤的试验结果
• 4.4.2 薏苡仁蛋白抗酒精性肝损伤的试验结果
• 4.5 本章小结
• 参考文献
• 攻读学位期间取得的成果
• 致谢
• 个人简况及联系方式