论文摘要
目的 探讨血管生成抑制素(angiostatin)和反应停(thalidomide)对淋巴管内皮细胞增殖和游走的影响及作用机制。旨在找到安全、有效、实用的淋巴管生成抑制剂。 材料和方法 实验所用的淋巴管内皮细胞取自猪的胸导管。1、抑制实验:本实验分为两大组:angiostatin组和thalidomide组。每大组分别采用划线法和MTT法观察两种因子对淋巴管内皮细胞增殖和游走的影响。(1)划线法:angiostatin和thalidomide组分别包括各自的对照组和3种浓度的实验组。(2)MTT法:angiostatin组包括对照组和4种浓度的实验组;thalidomide组包括对照组和5种浓度的实验组。2、细胞凋亡实验:(1)Hoechst染色法。(2)流式细胞仪检测法:配置不同浓度的angiostatin和thalidomide作用于淋巴管内皮细胞检测细胞的凋亡率。3电镜观察。 结果 1、划线法:与对照组相比,当angiostatin和thalidomide的浓度达到0.5μg/ml时,两者对淋巴管内皮细胞的增殖和游走都有明显的抑制作用(P<0.01)。2、MTT法:当angiostatin和thalidomide的浓度分别达到0.75μg/ml和0.5μg/ml时,两者对内皮细胞的增殖具有显著的抑制作用(P<0.01)。3、凋亡实验:(1)Hoechst染色证实,经angiostatin和thalidomide处理后的淋巴管内皮细胞,可观察到其核周围有凋亡小体。(2)流式细胞仪检测显示出大量亚二倍体细胞核型峰(凋亡峰),二倍体细胞峰减少。 结论 1、angiostatin和thalidomide对淋巴管内皮细胞的增殖和游走具有明显的抑制作用,且有剂量依赖性。2、angiostatin和thalidomide具有促进细胞凋亡的作用。
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