论文摘要
本研究以不同成熟期的桃子叶为外植体,研究发育期、品种、植物生长调节剂、黑暗处理等因子对子叶离体再生不定芽的影响;并以桃下胚轴为外植体,研究不同基因型、不同基本培养基及植物生长调节剂组合等对下胚轴离体再生不定芽的影响,建立并优化了桃子叶和下胚轴再生体系,为今后进行遗传转化工作奠定了基础。主要研究结果如下:1.发育期和基因型对桃子叶再生有显著影响。早熟品种‘燕红11’、‘中油4号’和‘双喜红’在盛花期后76天的子叶再生率最高,分别为31.25%、75%和64.58%;中熟品种‘沙红’、‘香珊瑚’和‘瑞光28’在盛花期后80-84天子叶再生率最高,分别为50%,47.92%和20.83%;晚熟品种‘甜桃王’、‘深州红蜜’和‘中油8号’在盛花期后80～84天子叶再生率最高,分别为47.92%、43.75%和54.17%。除‘深州红蜜’子叶在PF为0.6时再生率最高以外,其余品种均在PF为0.7-0.8时子叶再生率最高。不同品种的子叶再生率存在明显差异,‘中油4号’和‘双喜红’子叶再生率高,而‘瑞光28’和‘燕红11’再生率低。2.生长调节剂对桃子叶再生有重要影响。适宜桃子叶再生不定芽的生长调节剂组合为2.0 mg/ L TDZ配合使用0.01～0.04 mg/ L NAA或0.1 mg/ L IBA。‘双喜红’在MS + 2.0 mg/ L TDZ + 0.04mg/ L NAA的培养基中再生率最高,可达64.58%;‘沙红’在MS + 2.0 mg/ L TDZ + 0.1 mg/ L IBA培养基中再生率最高,为56.25%;‘深州红蜜’在MS + 2.0 mg/ L TDZ + 0.01mg/ L NAA的培养基中再生率最高,为45.83%。子叶再生的最佳黑暗培养时间为10天。子叶近胚芽处不定芽发生能力强,而远胚芽的划伤处鲜有不定芽产生。3.不同基因型桃下胚轴再生率差异显著。在相同的培养条件下‘97-8-4’的下胚轴再生率高达90.74%,每个外植体再生的不定芽数也最多;其次为‘甜桃王’和‘金童5号’,二者的下胚轴再生率较高,分别为75.49%和72.60%;‘深州红蜜’、‘秦蜜’和‘华光’再生率较低,分别为64.45%、36.94%和31.11%。4.基本培养基及生长调节剂对桃下胚轴影响较大。QL为‘97-8-4’和‘甜桃王’不定芽再生的最适基本培养基,MS为‘金童5号’不定芽再生的最适基本培养基。下胚轴再生时,植物生长调节物质使用2.0 mg/ L BA配合0.04 mg/ L NAA或单独使用2.0 mg/ L BA的再生效果好。‘97-8-4’下胚轴在QL+2.0 mg/ L BA+0.04 mg/ L NAA +100 mg/L肌醇的培养基中再生率最高,为94.44%;‘甜桃王’下胚轴在QL + 2.0 mg/ L BA + 0.04 mg/ L NAA +100 mg/ L肌醇+ 500 mg/ L CH的培养基中再生率最高,为80.42%;‘金童5号’下胚轴在QL + 2.0 mg/ L BA + 0.04 mg/ L NAA + 200 mg/ L肌醇的培养基中再生率最高,为78.00%。5.在QL + 1.0 mg/ L BA +0.04 mg/ L NAA的增殖培养基中,‘甜桃王’、‘金童5号’和‘97-8-4’的不定芽增殖系数均可达4～5,不定芽在1/2 QL +1.0 mg/ L NAA的培养基中进行生根培养,生根率可达70%以上。
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- [1].SSR方法标记桃[Prunus persic(L.)Batsch]果肉近核色素(英文)[J]. Agricultural Science & Technology 2012(05)