牛羊胚胎工程技术产业化研究与应用

论文题目: 牛羊胚胎工程技术产业化研究与应用

论文类型: 博士论文

论文专业: 临床兽医学

作者: 张立

导师: 张涌

关键词: 胚胎工程技术,产业化,性别控制

文献来源: 西北农林科技大学

发表年度: 2005

论文摘要: 本试验主要对牛羊胚胎工程技术产业化的关键环节进行了研究。针对影响牛羊同期发情、超数排卵、胚胎冷冻、胚胎移植及性别鉴定与控制等主要因素进行试验研究,以期加快我国牛羊良种化进程和胚胎工程技术产业化发展。试验研究结果表明: 1. 应用CIDR 加氯前列烯醇法比两次氯前列烯醇法对受体牛同期发情效果好,但差异不显著(p>0.05)。在牛的同期发情处理中,准备的受体牛至少应有3 个月以上的适应期;哺乳期牛同期发情率低,产犊超过3 个月以上才能得到较理想的同期发情效果;受体牛右侧黄体68.64 %,显著高于左侧黄体31.36 % (p<0.01)。2. 胚胎移植的供受体牛羊需加强饲养管理,提高供受体牛羊自身的营养水平,饲养管理和营养水平是胚胎移植成功的关键。西门塔尔、利木赞、海福特、安格斯肉牛的超排效果好于夏洛来牛;育成牛平均可用胚数和胚胎可用率比成年牛高,但差异不显著(p>0.05);在发情周期第11、12 d 起针超排效果较好,第9、10 d 效果最好,可用胚比例高;超排后输精1~4 次胚胎可用率之间差异不显著(p>0.05);用国产FSH 超排荷斯坦育成牛最佳总剂量,14~15 月龄为8.0 mg,16~17 月龄为8.8 mg,18~19 月龄为10.4 mg。3. 本研究采用两次重复超排间隔时间39 d 超排方案,既大大缩短重复超排间隔时间,又达到理想重复超排效果。第一次和第二次重复超排间隔27d,平均可用胚数为6.22±2.45枚和4.25±3.25枚,两者之间差异显著(p<0.05),发情利用率为91.42 %和75.00 %,两者之间差异极显著(p<0.01);第一次和第二次重复超排间隔39 d,平均可用胚数为5.44±2.78 枚和5.17±2.65 枚,介于两者之间差异不显著(p>0.05),发情利用率为95.03%和91.57%,两者之间差异不显著(p>0.05);第一次和第二次重复超排间隔为47 d 或67 d,平均可用胚数和发情利用率两者之间均无显著差异(p>0.05)。在内蒙古典型放牧条件下,海福特肉牛最佳超数排卵时间为5~6 月份;安格斯肉牛最佳超数排卵时间为8~9 月份。用加拿大进口与中科院国产FSH 对青年荷斯坦母牛进行超排,进口药超排平均可用胚数为4.60±3.52 枚,国产药平均为5.34±2.68 枚,两者之间差异不显著(p>0.05)。4. 在牛胚胎移植中,鲜胚移植显著高于冻胚移植妊娠率(p<0.05),分别为61.74 %和45.32 %;一步法冷冻的胚胎与常规法冷冻的胚胎,解冻移植后妊娠率差异不显著(p>0.05);6 d 的囊胚移植于6 d 的受体,妊娠率高达90.91%,显著高于6 d 的桑椹胚和7 d 的囊胚妊娠率(p<0.05),与7 d 的桑椹胚妊娠率相比差异极显著(p<0.01);我国不同地区最佳胚胎移植季节不同,北方地区以夏、秋季节为好,夏季最佳;华中地区以春、秋季节为好,秋季最佳;南方地区以春、冬季节为好,冬季最佳。5. 对不同地区绵羊超排处理,东北地区以10~12 月初效果较好,西北地区最佳超

论文目录:

中文摘要

ABSTRACT

综述部分

第一章 胚胎工程技术的发展概况

1.1 国外动物胚胎工程技术简史

1.2 我国动物胚胎工程技术发展简史

第二章 动物胚胎工程技术的研究进展

2.1 同期发情

2.1.1 卵泡的发育和分布

2.1.2 卵巢卵泡的生长波

2.1.3 黄体的形成与发育

2.1.4 黄体的功能

2.1.5 黄体退化及溶解机理

2.1.6 牛羊同期发情技术

2.1.7 同期发情研究

2.2 超数排卵

2.3 胚胎保存

2.3.1 胚胎常规冷冻

2.3.2 直接移植冷冻

2.3.3 玻璃化冷冻

2.4 胚胎移植

2.5 胚胎着床的分子机制

2.5.1 白细胞介素-1 在胚胎着床中的作用

2.5.2 白血病抑制因子在胚胎着床中的作用

2.5.3 肿瘤坏死因子在胚胎着床中的作用

2.6 胚胎性别鉴定

2.6.1 聚合酶链式反应(PCR)法

2.6.2 LAMP 法

2.7 性别控制

2.7.1 X、Y-精子分离技术

2.7.2 免疫与性别控制

2.8 体外受精技术在动物胚胎工程技术产业化中应用

2.9 转基因及克隆技术

2.10 当前我国牛羊胚胎工程技术产业化过程中存在的主要问题

2.10.1 胚胎来源问题

2.10.2 胚胎移植技术人员不足

2.10.3 受体饲养管理水平低下

试验部分

前言

第三章 受体牛同期发情的研究与应用

3.1 材料和方法

3.1.1 受体牛品种

3.1.2 试验地点

3.1.3 试验时间

3.1.4 试验药品

3.1.5 同期发情方法

3.1.6 发情判断标准

3.1.7 饲养管理方式

3.1.8 数据统计分析

3.2 结果

3.2.1 两种同期发情处理方法的比较

3.2.2 牛繁育状况对同期发情的影响

3.2.3 受体牛准备时间对同期发情的影响

3.2.4 管理水平对牛同期发情的影响

3.2.5 带犊牛同期发情的比较

3.3 讨论

3.3.1 不同处理方法对同期发情效果的影响

3.3.2 受体牛准备时间长短对同期发情效果的影响

3.3.3 受体牛繁殖状况对同期发情的影响

3.3.4 饲养管理水平对同期发情的影响

3.4 小结

第四章 牛胚胎移植技术产业化的研究与应用

4.1 材料与方法

4.1.1 供体牛品种

4.1.2 受体牛品种

4.1.3 应用地点

4.1.4 试验药品

4.1.5 试验仪器及消耗品

4.1.6 供体牛超排方法

4.1.7 牛胚胎采集方法

4.1.8 胚胎级别判定

4.1.9 胚胎冷冻

4.1.10 胚胎解冻

4.1.11 胚胎移植

4.1.12 供受体牛饲养管理

4.1.13 妊检方式

4.1.14 数据统计分析

4.2 结果

4.2.1 不同品种牛的超数排卵比较

4.2.2 供体牛经产与否对超数排卵的影响

4.2.3 不同营养水平对牛超排的影响

4.2.4 重复超排间隔时间对超排效果的影响

4.2.5 中原地区不同月份超数排卵的比较

4.2.6 放牧条件下季节对安格斯和海福特肉牛超排的影响

4.2.7 进口FSH 与国产FSH 对荷斯坦母牛超排的比较

4.2.8 输精次数对受精率的影响

4.2.9 起针时间对超排效果的影响

4.2.10 不同月龄育成HB 母牛超排FSH 最佳剂量的研究

4.2.11 不同冷冻保护剂对移植妊娠率的研究

4.2.12 鲜胚、冻胚对移植妊娠率的影响

4.2.13 不同饲养管理水平对牛胚胎移植妊娠率的影响

4.2.14 胚胎的发育对牛移植妊娠率的影响

4.2.15 环境应激与胚胎移植妊娠率的关系

4.2.16 不同区域的最佳移植季节

4.3 讨论

4.3.1 不同品种牛超排效果比较

4.3.2 供体牛经产与否对超排效果的影响

4.3.3 营养水平对牛超排的影响

4.3.4 重复超排间隔时间对超排效果的影响

4.3.5 放牧条件下季节对不同品种肉牛超排效果的影响

4.3.6 输精次数对胚胎利用率的影响

4.3.7 起针时间对超排效果的影响

4.3.8 不同月龄育成HB 母牛超排FSH 最佳剂量

4.3.9 胚胎冷冻保护剂对移植妊娠率的影响

4.3.10 鲜胚、冻胚对移植妊娠率的影响

4.3.11 不同饲养管理水平对牛胚胎移植妊娠率的影响

4.3.12 胚胎的发育对牛移植妊娠率的影响

4.3.13 应激、季节对牛胚胎移植的影响

4.3.14 本试验研究牛胚胎移植经济效益核算

4.4 小结

第五章 羊胚胎移植技术产业化研究与应用

5.1 材料与方法

5.1.1 供体羊品种

5.1.2 受体羊品种

5.1.3 应用地点

5.1.4 实施时间

5.1.5 试验药品

5.1.6 试验仪器及消耗品

5.1.7 供受体羊发情周期观察

5.1.8 供受体羊的同期发情处理

5.1.9 超排方法

5.1.10 胚胎的采集

5.1.11 胚胎鉴定

5.1.12 胚胎移植

5.1.13 供受体的饲养管理

5.1.14 妊检方式

5.1.15 数据处理

5.2 结果

5.2.1 不同区域绵羊最佳超排季节

5.2.2 山羊超排的最佳季节

5.2.3 绵羊CIDR 放置时间对超排效果的影响

5.2.4 山羊CIDR 放置时间对超排效果的影响

5.2.5 不同饲养管理模式对绵羊超排效果的影响

5.2.6 山羊经产与否及FSH 剂量对超排的影响

5.2.7 绵羊经产与否及FSH 剂量对超排的影响

5.2.8 绵羊重复超排对超排效果的影响

5.2.9 绵羊超排后发情时间与超排效果的关系

5.2.10 不同发育期羊胚胎移植对妊娠率的影响

5.2.11 营养水平对绵羊胚胎移植妊娠率的影响

5.2.12 应激反应对山羊移植妊娠率的影响

5.2.13 鲜胚在体外保存时间长短对绵羊移植妊娠率的影响

5.3 讨论

5.3.1 不同区域季节对羊超排效果的影响

5.3.2 CIDR 放置时间长短对羊超排效果的影响

5.3.3 国产FSH 绵山羊超排的最佳剂量筛选

5.3.4 重复超排对羊超排效果的影响

5.3.5 超排后发情时间对羊超排效果的影响

5.3.6 不同发育期羊胚胎移植对妊娠率的影响

5.3.7 应激反应对羊胚胎移植妊娠率的影响

5.3.8 鲜胚体外保存时间长短对羊移植妊娠率的影响

5.3.9 饲养管理模式对绵羊超排效果和移植妊娠率的影响

5.3.10 本试验羊胚胎移植经济效益核算

5.4 小结

第六章 性别控制的研究与应用

6.1 性控精液在胚胎工程技术中初步应用

6.1.1 材料和方法

6.1.2 结果

6.1.3 讨论

6.1.4 小结

6.2 LAMP 法性别鉴定在胚胎工程技术中的应用

6.2.1 材料与方法

6.2.2 结果

6.2.3 讨论

6.2.4 小结

结论

致谢

参考文献

个人简历

附图

发布时间: 2005-12-22

参考文献

• [1].胚胎工程技术在奶牛繁育中应用的研究[D]. 刘俊平.西北农林科技大学2005

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