去甲基化对宫颈癌Hela细胞中BLU基因及HPV表达的影响

去甲基化对宫颈癌Hela细胞中BLU基因及HPV表达的影响

论文摘要

目的:检测甲基化抑制剂处理前后宫颈癌Hela细胞增殖、BLU、HPVE6mRNA表达的变化,初步研究BLU基因在宫颈癌细胞中的甲基化状况及其去甲基化在宫颈癌发病中的作用。方法:用不同浓度5-Aza-CdR干预Hela细胞株3d后,采用RT-PCR检测BLUmRNA、HPVE6表达的变化;四唑氮蓝(M T T)比色法检测Hela细胞增殖变化情况。结果:(1)凝胶图像分析仪分析RT-PCR产物:实验组5-Aza-CdR(终浓度分别为5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L)作用Hela细胞3d前后,各实验组和对照组BLUmRNA/β-actin分别为0.170±0.023、0.404±0.016、0.599±0.015、0.038±0.004,随着5-Aza-CdR浓度的升高,其表达随之增加,经方差分析对照组和实验组之间差异具有显著性(F=701.430,P<0.05)。实验组和对照组HPV18E6mRNA/β-actin分别为0.381±0.018、0.382±0.016、0.392±0.025、0.378±0.026,各实验组和对照组数据之间差异无显著性(F=0.221,P>0.05),即5-Aza-CdR干预前后,HPV18E6mRNA表达无明显改变。(2)经终浓度分别为5μmol/L、10μmol/L、20μmol/L的5-Aza-CdR处理HeLa细胞3d后,MTT检测各实验组细胞活力(A490值)分别为0.490±0.022、0.403±0.017、0.294±0.017,与对照组细胞活力(0.592±0.021)比较有明显差异(F=2659.17,P<0.05)。在所检测的浓度范围内随着5-Aza-CdR浓度的增加,对HeLa细胞的增殖抑制随之增强,呈量一效关系(相关度比较R=—0.976,P<0.05)。(3)5-Aza-CdR处理前后Hela细胞形态学出现以下改变:倒置显微镜下观察,对照组细胞生长状态良好,细胞伸展、透亮,呈不规则对角形,随时间推移,细胞渐增多,细胞接触紧密;实验组20μmol/L的5-Aza-CdR作用3d后,细胞间间隙增大,细胞数目减少不明显,胞浆、胞膜完整,细胞体积无明显改变。结论:1)5-Aza-CdR处理对Hela细胞株BLU基因的表达有明显的上调作用,提示DNA甲基化可能是BLU基因表达异常的主要机制之一。2)去甲基化使BLU基因表达上调对Hela细胞中HPV无影响。3)BLU基因甲基化可能与宫颈癌的发生、发展有关。

论文目录

  • 中文摘要
  • 英文摘要
  • 缩略词
  • 第一章 前言
  • 第二章 材料与方法
  • 2.1 材料与仪器
  • 2.2 实验方法
  • 2.3 统计学方法
  • 第三章 结果
  • 3.1 5-Aza-CdR处理前后BLU及HPV18E6mRNA的表达
  • 3.2 5-Aza-CdR处理对HeLa细胞增殖活性的影响
  • 3.3 5-Aza-CdR处理后Hela细胞的形态学改变
  • 附图
  • 第四章 讨论
  • 4.1 BLU基因启动子区CpG岛甲基化与表达失活
  • 4.2 BLU基因的甲基化失活与宫颈癌的关系
  • 第五章 结论
  • 参考文献
  • 综述
  • 致谢
  • 相关论文文献

    • [1].基于BLU资源的混合学习案例分析[J]. 中国教育信息化 2017(07)
    • [2].胃癌BLU基因启动子区高甲基化的临床意义[J]. 江苏医药 2015(01)
    • [3].加强散货船装卸监管,应对《BLU规则》履约[J]. 天津航海 2010(01)
    • [4].膀胱癌和肾癌中RASSF1A和BLU的甲基化状态[J]. 浙江临床医学 2008(11)
    • [5].薄膜开关在自动BLU叠片机生产调试中的应用[J]. 现代显示 2012(01)
    • [6].BLU设备贴合精度影响因素的研究[J]. 机械管理开发 2019(04)
    • [7].线性等式约束下线性模型中BLU估计的稳健性[J]. 数学研究 2013(03)
    • [8].视觉定位在BLU叠片设备中的设计应用[J]. 电子质量 2020(07)
    • [9].BLU基因异常甲基化与肿瘤研究进展[J]. 重庆医学 2012(09)
    • [10].BLU基因慢病毒表达载体的构建[J]. 汕头大学医学院学报 2008(04)

    标签:;  ;  ;  

    去甲基化对宫颈癌Hela细胞中BLU基因及HPV表达的影响
    下载Doc文档

    猜你喜欢