造血干细胞移植后人疱疹病毒6型感染的初步研究

论文摘要

造血干细胞移植（Hematopoietic stem cell transplantation HSCT）是目前治愈血液系统恶性疾病的有效手段，而移植后的病毒感染一直是影响移植成功率和移植受者生活质量的主要因素之一。人疱疹病毒6型（human herpesvirus 6HHV-6）是1986年从艾滋病和淋巴增生异常患者体内分离出的一种新型的疱疹病毒，属人疱疹病毒科，β病毒亚科，是双链DNA病毒，有两种亚型：HHV-6A型和HHV-6B型。HHV-6是一种普遍存在的病原体，在人群中的感染率较高，初次感染大多导致幼儿急疹。在初次感染后，往往会潜伏在外周血单个核细胞、唾液腺等部位，当机体免疫功能受到抑制时重新激活复制，导致一系列生理病理改变，具体机制尚不清楚。近年来HSCT后HHV-6感染的研究成为热点，国外学者研究发现HHV-6感染或激活一般出现在移植后早期，发生率在45％～75％之间，并发现HHV-6的感染与移植后造血重建延迟、急性移植物抗宿主反应密切相关，可导致中枢神经系统的感染。但国内有关HSCT患者HHV-6感染的报道甚少。本实验对在本移植中心接受HSCT患者HHV-6的感染率进行了研究，同时建立一种方便、快速、适合临床检验HHV-6的方法。本研究采用巢式PCR定性检测19例HSCT后患者外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMCs）和40例HSCT后患者外周血浆HHV-6的感染，并结合限制性核酸内切酶酶切分型对HHV-6A型和B型进行了分析。研究同时设正常对照组（50例正常志愿者标本）和疾病对照组（15例血液系统恶性肿瘤患者化疗前标本）。结果显示本组正常人群HHV-6的检出率为66％，均为HHV-6B型感染，主要为PBMCs的潜伏感染；血浆中病毒检出率较低，只有6％。疾病对照组结果显示15例患者PBMCs的HHV-6检出率为60％，血浆中没有检测到HHV-6 DNA。HSCT前19例患者PBMCs HHV-6的检出率为58％，HSCT后患者PBMCs HHV-6检出率为68％。HSCT前40例患者血浆HHV-6检出率为2.5％，HSCT后患者血浆HHV-6的检出率为42.5％，较移植前明显提高，有明显统计学意义（P＜0.01）。HSCT后血浆HHV-6的感染率同正常对照和疾病对照血浆HHV-6的检出率相比有统计学意义（P＜0.05）。在定性检测的基础上，研究建立了实时定量PCR检测HHV-6 DNA的方法，对正常对照、疾病对照及40例HSCT患者血浆中HHV-6的病毒拷贝数进行了检测，结果显示50例正常对照组HHV-6的检出率为6％，平均病毒拷贝数为828±317.5copes／ml。15例疾病对照组没有检出HHV-6 DNA。40例患者HSCT前只有一例检出血浆HHV-6DNA，拷贝数为420copes／ml。40例患者HSCT后有18例（45％）检出HHV-6DNA，病毒平均拷贝数为4884.4±374.4 copes／ml，明显高于正常对照组的病毒拷贝数，检出HHV-6的中位时间为移植后14.5天（0～23天）。40例HSCT患者中有14例（35％）发生Ⅰ～Ⅳ度aGVHD，中位时间为第20（8～40）天。HHV-6检出的中位时间明显早于aGVHD发生的时间（P＜0.05）。14例Ⅰ～Ⅳ度aGVHD患者中有11例（78％）检出了HHV-6，3例（21.4％）没有检出HHV-6，Ⅰ～Ⅳ度aGVHD患者HHV-6检出率明显高于无GVHD患者（P＜0.05）。综上所述：1、本组健康成人中HHV-6的检出为66％，均为HHV-6B型感染。2、HSCT患者PBMCs HHV-6检出率为68％，血浆HHV-6检出率为45％，均为HHV-6B型感染。HSCT后血浆中HHV-6DNA拷贝数较移植前明显增高，较正常对照组相比也明显增高（差异有统计学意义）。3、HSCT后患者血浆HHV-6的激活主要集中在移植后2—4周，且主要为HHV-6B型感染。4、HSCT后患者HHV-6的感染可能参加了移植后aGVHD的病理过程5、本研究建立的实时定量PCR检测HHV-6的方法有高灵敏度、特异、简单、结果数据化等特点，且重复性好。

论文目录

• 一、中文摘要
• 二、英文摘要
• 三、正文
• 前言
• 第一部分 巢式PCR检测造血干细胞移植后人疱疹病毒6型感染
• 第二部分 实时定量PCR检测造血干细胞移植后HHV-6的感染
• 讨论
• 小结
• 参考文献
• 四、综述（一）
• 造血干细胞移植后人疱疹病6的感染
• 五、综述（二）
• GATA转录因子和血液系统疾病
• 六、附表
• 40例HSCT患者相关资料及结果
• 七、致谢