表皮生长因子受体反义重组腺病毒对乳腺癌细胞作用的实验研究

论文摘要

目的:表皮生长因子受体（EGFR）是原癌基因HER1（c-erbB1）的表达产物,在许多肿瘤细胞中超量表达、基因扩增和/或突变,并借助其介导的信号传导使细胞生长失控和恶性转化。在乳腺癌实验模型上,我们发现EGFR的表达随着肿瘤发生能力的增强而提高,而且EGFR反义RNA表达载体可逆转转化表型。为了寻求治疗乳腺癌的新手段,我们开发了EGFR反义重组腺病毒,并通过观察其对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的体外增殖作用情况,以及对其放疗敏感性的影响,初步探讨其作为治疗乳腺癌新手段的机制。 实验方法:人乳腺癌细胞系MDA-MB-231常规培养,细胞计数绘制细胞生长曲线;人EGFR的cDNA片段被反向亚克隆入E1/E3缺失的5型腺病毒载体中而得到AdE5,EGFR反义RNA的表达由CMV启动子控制;进而用细胞培养和流式细胞仪（FCM）技术研究其对人乳腺癌细胞株MDA-MB-231凋亡及细胞周期分布的影响,比较联合γ-射线对MDA-MB-231克隆形成率及细胞周期分布的作用。 实验结果表明:（1）MDA-MB-231细胞被AdE5感染后,EGFR蛋白质的表达被强烈地抑制,但并不导致细胞凋亡;（2）AdE5感染后以γ-射线照射细胞,克隆形成率被抑制。且这种作用与病毒量和照射剂量相关联;（3）进而流式细胞仪分析显示,300 pfu/细胞的AdE5转染可使MDA-MB-231细胞摆脱对放射线抗拒的G0/G1期,进入对放射线敏感的G2/M期,从而使AdE5联合放射表现为协同效应。 结论:以腺病毒载体介导的EGFR反义RNA转导可有效地用于针对EGFR的反义治疗策略,抑制肿瘤的生长,提高放射线对乳腺癌细胞杀灭作用。其中,其影响肿瘤生长的因素不在于诱导肿瘤细胞的凋亡,而其导致细胞G2/M

论文目录

• 中英文名词对照与缩写
• 中文摘要
• 英文摘要
• 前言
• 正文
• 1.材料与方法
• 2.实验结果
• 3.讨论
• 4.结论
• 5.参考文献
• 文献综述
• 参考文献（文献综述部分）
• 附录
• 攻读学位期间发表文章情况
• 致谢