维吾尔族四种异常体液质高血压人群和四种正常体液质人群肠道菌群结构分布特征的研究

论文摘要

目的：应用变性梯度凝胶电泳指纹图谱技术分析对比对维吾尔族四种异常体液质高血压人群及其对应的四种正常体液质人群的肠道菌群的多样性和差异性。方法：①以异常黑胆质高血压组（n=20）和正常黑胆质健康组（n=20），异常血液质高血压组（n=20），和正常血液质健康组（n=20），异常胆液质高血压组（n=10）和正常胆液质健康组（n=10），异常粘液质高血压组（n=10）和正常粘液质健康组（n=10），共120人的粪便中细菌总DNA为模板，以细菌通用引物进行16SrDNA的V6-V8区域PCR扩增，DGGE分析，切取样本的特异条带，进行克隆、测序、核酸序列比对。②利用Quantity One4.4.0软件对DGGE每个条带分析并进行UPGMA相似性聚类分析。通过Microsoft Excel和SPSS17.0软件对DGGE条带的丰富度、香农-威纳多样性指数、均匀度进行肠道微生物区系的菌群多样性进行分析。③利用MEGA5.05软件对所测细菌进行进化树分析。结果：①UPGMA相似性聚类分析显示其肠道总菌群组间同源性的高低为:异常黑胆质高血压组（45%-87%）＞异常血液质高血压组（50-85%）＞异常粘液质高血压组（42%-86%）＞异常胆液质高血压组（54-82%），正常黑胆质健康组（40%-80%）＞正常血液质健康组（49%-79%）＞正常粘液质健康组（43%-72%）＞正常胆液质健康组（52%-75%）。②通过丰富度、香农-威纳多样性指数、均匀度的分析，结果显示异常血液质高血压组和正常血液质健康组间、异常粘液质高血压组和正常粘液质健康组间肠道菌群的丰富度、多样性指数和均匀度均有显著性差异（P＜0.05）。异常黑胆质高血压组与异常血液质高血压组和异常粘液质高血压组间相比，丰富度、多样性指数和均匀度有显著性差异（P＜0.05）；而与异常胆液质高血压组相比，在丰富度和多样性指数有显著性差异（P＜0.05），但是均匀度没有显著性差异（P＞0.05）。③对条带测序鉴定后，在Genebank数据库应用Blast程序进行比对，并做进化树。结论：①维吾尔族四种异常体液质高血压人群和四种正常体液质人群的肠道菌群的同源性、菌种和分布结构多样性存在一定程度的差异。②维吾尔族四种异常体液质高血压人群和四种正常体液质人群肠道菌群的进化树表明：厚壁菌门、拟杆菌门、疣微菌门、肠道产丁酸细菌和不可培养的细菌的存在差异可能会导致异常高血压体液质的形成和发展。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 材料与方法
• 1. 实验材料
• 2. 实验方法
• 2.1 研究对象
• 2.2 肠道菌群总 DNA 的提取
• 2.3 16SrDNA V6-V8 可变区 PCR 扩增
• 2.4 Reconditioning PCR 扩增
• 2.5 DGGE 指纹图谱分析
• 2.6 统计分析
• 2.7 技术路线图
• 结果
• 讨论
• 小结
• 致谢
• 参考文献
• 附录
• 综述
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 导师评阅表