论文摘要
【研究目的】肿瘤细胞原发耐药和继发耐药（获得性耐药）达90％以上，是导致化疗失败的主要原因，其中获得性多药耐药（multidrugresistance,MDR）是研究热点。MDR的逆转有着重要的意义和临床应用价值。钙通道阻滞剂维拉帕米（VRP）能提高化疗药物在耐药细胞中的浓度，逆转多药耐药，已得到实验证实，但临床应用毒副作用较大。丹参酮ⅡA（TanshinoneⅡA,TanⅡA）是中药唇形科植物丹参的根须的提取物丹参酮的单体之一，已被成功分离提纯，并被应用于心血管疾病和肿瘤的实验研究。TanⅡA已被发现具有诱导肿瘤细胞分化、促进凋亡以及抑制增殖的作用，但具体机制尚不明确。在心血管疾病的研究中，发现TanⅡA具有类似VRP的细胞膜钙通道阻滞作用和电生理活性。本实验的目的在于观察TanⅡA是否具有与VRP类似的逆转多药耐药的作用，并初步研究TanⅡA逆转多药耐药的机制。【研究方法】以人乳腺癌细胞株MCF-7为对照，以人乳腺癌多药耐药细胞株MCF-7/ADM为研究对象，观察在有无丹参酮ⅡA干预的情况下多药耐药细胞MCF-7/ADM对阿霉素敏感性的不同表现。用四氮唑蓝（MTT）法测定阿霉素对细胞的生长抑制率，包括阿霉素对MCF-7细胞株的抑制率、阿霉素对MCF-7/ADM细胞株的抑制率和在TanⅡA干预下阿霉素对MCF-7/ADM细胞株的抑制率，由此求取耐药逆转的倍数；用流式细胞术测定在无干预措施、TanⅡA0．2μg/ml和0．4μg/ml干预下及VRP5．0μmol/L和10．0μmol/L干预下MCF-7/ADM细胞内阿霉素的积聚浓度，从功能学的角度观察耐药逆转的情况，并把TanⅡA与VRP的逆转效果相对照。统计学处理采用SPSS 11．5软件进行分析。【研究结果】通过比较上述实验条件下细胞生长抑制率，细胞内阿霉素的浓度，结果显示：MCF-7/ADM细胞株对于阿霉素的敏感性明显低于MCF-7细胞株。加丹参酮ⅡA干预后，多药耐药细胞株MCF-7/ADM对阿霉素的敏感性增加，细胞内阿霉素积聚浓度亦增加。通过观察和统计学分析，我们发现丹参酮ⅡA浓度为0．2μg/ml，作用时间为72小时的条件下能较大程度逆转MCF-7/ADM细胞对ADM的耐药作用，其多药耐药逆转效果与经典逆转剂维拉帕米相比，具有可比性。【研究结论】丹参酮ⅡA对多药耐药细胞株MCF-7/ADM的耐药具有逆转作用，其机制可能为抑制多药耐药蛋白P-gp的功能。丹参酮ⅡA的进一步研究可能为肿瘤化疗的多药耐药逆转提供一种有较高实用价值的新药。