论文题目: 使用SPR生物传感器快速检测大肠杆菌的研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 农业机械化工程
作者: 葛晶
导师: 殷涌光
关键词: 生物传感器,胶体金,复合抗体,检测限,检测大肠杆菌,浓度
文献来源: 吉林大学
发表年度: 2005
论文摘要: 本课题是2002 年吉林省科技厅国际合作研究资助项目。SPR生物传感器具有实时检测、方便快捷、灵敏度高、不需对样品进行预处理等特点,作为一种快速的检测工具在各个领域得到了广泛应用。本文采用美国Texas Instruments 公司生产的集成化手持式SpreetaTMSPR传感器。通过一系列试验,研究了增强SPR 生物传感器金膜表面物质响应信号、提高SPR 生物传感器的检测限的一系列方法,包括引入亲和素—生物素系统、复合抗体夹心系统、胶体金复合抗体夹心系统等方法对SPR 生物传感器的检测限的影响。并采用以上三种方法对大肠杆菌E.Coli O157:H7 进行了检测。试验结果表明,采用胶体金复合抗体夹心系统,将SPR 传感器对大肠杆菌E.Coli O157:H7 的检测限从10~6cfu/ml 提高到了10~1cfu/ml,检测时间为33~40min。同时通过实验确定了胶体金中大肠杆菌E.Coli O157:H7 抗体量的最适值是8μg/ml;提出曲线斜率作为检测细菌浓度的方法,可将回归方程自变量的系数提高937.5 倍。
论文目录:
第一章 绪论
1.1 选题的目的和意义
1.1.1 问题的提出
1.1.2 本文的目的
1.1.3 本文的意义
1.2 生物传感器的研究现状与发展
1.2.1 生物传感器的类型
1.2.2 SPR 生物传感器的基本原理
1.2.3 生物活性单元的固定
1.2.4 手持式SpreetaTMSPR 传感器
1.2.5 SPR 传感器的应用
1.2.6 SPR 传感器研究的新进展
1.3 本文的研究内容
第二章 生物素—亲合素系统的研究
2.1 引言
2.2 生物素与亲合素的生物学特性
2.2.1 生物素(biotin,B)
2.2.2 亲合素(avidin,A)
2.2.3 生物素-亲合素系统(BAS)
2.3 试验条件影响与分析
2.3.1 手持式SpreetaTMSPR 传感器
2.3.2 试验材料
2.3.3 试验方法
2.4 试验结果与讨论
2.5 本章小结
第三章 复合抗体夹心方法提高SPR检测限的研究
3.1 引言
3.2 试验条件影响与分析
3.2.1 实验材料
3.2.2 试验方法
3.2.3 检测步骤
3.3 试验结果与讨论
3.3.1 生物素—亲合素系统的引入
3.3.2 复合抗体的引入
3.4 本章小结
第四章 引入免疫胶体金提高SPR检测限的研究
4.1 引言
4.2 胶体金标记抗体的基本原理
4.2.1 基本原理
4.2.2 胶体金的制备方法
4.2.3 制备高质量胶体金的注意事项
4.3 试验条件影响与分析
4.3.1 实验材料
4.3.2 免疫胶体金的制备
4.3.3 试验方法
4.3.4 检测步骤
4.4 试验结果与讨论
4.4.1 大肠杆菌E.Coli0157:H7 的检测结果与分析
4.4.2 斜率分析方法
4.5 本章小结
第五章 反应动力学分析
5.1 引言
5.2 动力学分析理论
5.2.1 质量和动力学常数测定的理论依据
5.2.2 介质质量的测定
5.2.3 动力学分析
5.3 SPR 传感器的灵敏度及其影响因素
5.4 试验条件影响与分析
5.4.1 实验材料
5.4.2 试验方法
5.4.3 检测步骤
5.5 试验结果与讨论
5.6 本章小结
第六章 SPR检测沙门氏菌的研究
6.1 引言
6.2 试验条件影响与分析
6.2.1 实验材料
6.2.2 免疫胶体金的制备
6.2.3 试验方法
6.2.4 沙门氏菌检测步骤
6.3 试验结果与讨论
6.4 斜率分析方法
6.5 本章小结
第七章 全文总结
参考文献
摘要
ABSTRACT
致谢
发布时间: 2006-01-17
参考文献
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