叶黄素在大鼠体内代谢及对视网膜光损伤影响的初探

叶黄素在大鼠体内代谢及对视网膜光损伤影响的初探

论文摘要

叶黄素(Lutein)是类胡萝卜素的一种,其分子式为C40H56O2,分子量为568.88。叶黄素对人体具有重要的健康功能。研究表明,补充叶黄素可使视网膜疾病(如黄斑衰退症)的危险性降低。叶黄素在动物体内不能自身合成,必须通过食物链进入并沉积在体内。在本项研究中,通过对万寿菊花的萃取液进行皂化得到叶黄素单体。应用C18HPLC-PDA,对叶黄素样品中的单体进行定量检测,色谱条件为:色谱柱DiamonsilTMC18(4.6mm×250mm,5μm);流动相A为乙腈-水(9:1,WV);流动相B为乙酸乙酯;线性梯度洗脱:B在15分钟内由0%上升到100%;流速:1.0mL/min;检测波长:450nm;波长收集范围:260nm-700nm;进样量:20μL。应用C30-HPLC-PDA,建立了分离和鉴定叶黄素几何异构体的方法。色谱条件:色谱柱:YMC Carotenoid S-5(4.6×250mm):流动相A:乙腈-甲醇(3:1,V/V);流动相B:MTBE,线性梯度洗脱为B在20分钟内由0增加至55%(V/V),流速:1.0mL/min:检测波长:450nm;PDA光谱收集范围260-600nm:进样量:20μL。叶黄素在大鼠体内的代谢初探。分别给大鼠一次性灌喂叶黄素酯和单体,通过对其血清和粪便的检测分析,得出结论:叶黄素酯在大鼠体内的消化吸收过程中发生了水解反应,进入血液的只有单体:叶黄素酯比单体在大鼠体内的生物接近度高;酯相对于单体的生物利用度为18.55%。这一结论为我国今后独立研发叶黄素功能食品的剂型提供了有价值的参考。叶黄素对大鼠视网膜光损伤的影响。通过对不同光照强度和时间的试验,建立了大鼠视网膜光损伤的模型,选用绿色的LED光源1000±100勒克斯照射3小时为视网膜光化学损伤的基本条件,HE染色观察持续15天摄入叶黄素对视网膜光化学损伤的影响作用。HPLC检测结果显示:摄入叶黄素并没有在视网膜检测到叶黄素分子,并降低了视网膜中类似(Z)9-十八烯酰胺(ODA)的物质的含量,且对随饲喂时间延长,视网膜的损伤有加重趋势。因此推测:叶黄素不能到达大鼠视网膜组织,并加重了视网膜的光损伤程度。这一结果对探索叶黄素参与大鼠视网膜光损伤过程中的作用机理有显著意义。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 第1章 引言
  • 1.1 叶黄素简介
  • 1.1.1 类胡萝卜素简介
  • 1.1.2 叶黄素的结构和命名
  • 1.1.3 叶黄素的异构体
  • 1.1.4 叶黄素的物理与化学性质
  • 1.1.5 天然叶黄素的存在形式及资源分布
  • 1.2 叶黄素的生物学功能
  • 1.2.1 叶黄素对视网膜的保护作用
  • 1.2.2 叶黄素对白内障的预防作用
  • 1.2.3 叶黄素调节免疫力作用
  • 1.3 叶黄素在动物体内的代谢
  • 1.3.1 叶黄素在动物体内的消化吸收
  • 1.3.2 叶黄素在靶器官的沉积
  • 1.4 本文主要研究内容
  • 第2章 叶黄素的分析与检测
  • 2.1 关键技术及研究目的
  • 2.1.1 试验过程中的注意事项
  • 2.1.2 光谱技术
  • 2.1.3 色谱技术
  • 2.1.4 研究目的
  • 2.2 材料与方法
  • 2.2.1 实验材料和试剂
  • 2.2.2 主要仪器设备
  • 2.2.3 实验方法
  • 2.3 结果
  • 18-HPLC-PDA法定性定量分析叶黄素'>2.3.1 C18-HPLC-PDA法定性定量分析叶黄素
  • 30-HPLC-PDA法分离与鉴定叶黄素几何异构体'>2.3.2 C30-HPLC-PDA法分离与鉴定叶黄素几何异构体
  • 2.4 讨论
  • 18-HPLC-PDA法定性定量分析'>2.4.1 叶黄素的C18-HPLC-PDA法定性定量分析
  • 30-HPLC-PDA法分离叶黄素几何异构体'>2.4.2 C30-HPLC-PDA法分离叶黄素几何异构体
  • 第3章 叶黄素在大鼠体内消化、吸收过程初探
  • 3.1 研究目的和意义
  • 3.1.1 叶黄素酯在大鼠体内吸收过程中的构型变化
  • 3.1.2 叶黄素酯和单体的生物接近度比较
  • 3.1.3 叶黄素酯在体内的相对生物利用度评价
  • 3.2 材料与方法
  • 3.2.1 实验动物
  • 3.2.2 材料与试剂
  • 3.2.3 主要仪器
  • 3.2.4 实验方法
  • 3.3 结果
  • 3.3.1 叶黄素单体和酯制备物的类胡萝卜素组成分析
  • 3.3.2 叶黄素酯在大鼠体内消化过程中的水解
  • 3.3.3 叶黄素单体与酯的生物接近度比较
  • 3.3.4 叶黄素酯在体内的相对生物利用度评价
  • 3.4 讨论
  • 3.4.1 叶黄素酯在消化过程中的水解
  • 3.4.2 叶黄素酯与叶黄素单体的生物接近度比较
  • 3.4.3 叶黄素酯相对生物利用度的评价
  • 第4章 叶黄素对大鼠视网膜光损伤影响的初探
  • 4.1 研究目的和意义
  • 4.2 材料与方法
  • 4.2.1 实验动物
  • 4.2.2 主要试剂
  • 4.2.3 主要仪器
  • 4.2.4 实验方法
  • 4.3 结果
  • 4.3.1 视网膜中叶黄素相关代谢物的分析
  • 4.3.2 大鼠视网膜光损伤模型的建立
  • 4.3.3 叶黄素对大鼠光损伤视网膜形态结构的影响
  • 4.4 结论
  • 4.5 讨论
  • 4.5.1 大鼠视网膜光损伤模型的建立
  • 4.5.2 叶黄素在大鼠视网膜光损伤中的作用
  • 第5章 全文小结
  • 5.1 研究工作总结
  • 5.1.1 叶黄素的分析检测方法
  • 5.1.2 叶黄素在大鼠体内消化吸收过程初探
  • 5.1.3 叶黄素对大鼠视网膜光损伤的影响作用
  • 5.2 创新点
  • 5.3 未来展望
  • 致谢
  • 参考文献
  • 攻读硕士学位期间发表的论文
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