论文摘要
目的：通过原代培养人翼状胬肉成纤维细胞（HPFs）,观察绿茶提取物EGCG对HPFs增殖及MMP-9、VEGF表达的影响,分析EGCG与MMP-9和VEGF之间存在的关系,为EGCG用于翼状胬肉治疗提供理论依据,探讨翼状胬肉新的治疗方法。方法：1、采用组织块培养法进行翼状胬肉成纤维细胞培养,分别用不同浓度的EGCG（10-80ug/ml）处理48h,并设置阴性对照组,在倒置显微镜下观察细胞形态变化并行HE染色。2、MTT比色法测定EGCG对人翼状胬肉成纤维细胞增殖的抑制作用。3、Western blotting法检测EGCG对MMP-9、VEGF表达的影响。结果：1、EGCG作用于HPFs细胞,细胞形态出现明显变化,细胞脱壁,核固缩,胞体收缩、变圆,甚至崩解,随药物浓度的增加,变化越明显,这种形态学改变呈剂量依赖性。当EGCG浓度为80ug/m1时,细胞形态出现明显的固缩,很少见到正常活性细胞。2、EGCG可抑制HPFs的增殖,这种抑制作用呈时间剂量依赖性。当EGCG浓度为80ug/ml并作用72h时,其对细胞增殖抑制率可高达89.6%左右。3、经20ug/ml和40ug/ml的EGCG作用48h后,MMP-9和VEGF蛋白表达均有显著下调。结论：1、不同浓度的EGCG作用于HPFs细胞不同时间后,HPFs细胞的增殖能力随着作用浓度的增加和时间的延长而下降,呈显著的浓度和时间依赖性。2、EGCG作用于HPFs细胞48h后,细胞的MMP-9、VEGF蛋白表达随着作用浓度的增加而降低,呈显著的浓度依赖性。