论文摘要
目的:探索以变性神经元为观察对象,适用于脑缺血再灌注后干预实验的动物模型。方法:60只小鼠随机分为6组:假手术组(A组),缺血30 min、60 min、90 min、120 min组(分别为B、C、D、E组)和甘露醇干预组(F组)。甘露醇干预组在缺血120min后静推甘露醇。实验小鼠再灌注24 h后取脑,固定切片,HE染色,对照观察海马CA1区细胞损伤程度,筛选脑缺血再灌注损伤形成变性神经元的合适缺血时间,为选取合适的实验平台提供依据;观察缺血后脱水治疗对变性神经元形态的影响,评价模型用于缺血再灌注后干预实验的可用性。结果:两动脉阻断法建立小鼠前脑缺血再灌注损伤模型,再灌注时间定为24h,随缺血时间延长(0～120min),海马CA1区细胞变性、坏死程度加重,存活细胞逐渐减少,缺血后甘露醇静推,可明显改善缺血再灌注所致的损伤程度。海马CA1区存活细胞数在C、D、E组均明显低于A组(P＜0.01),而F组和E比较差别有统计学意义(P＜0.01),F组和A组比较无明显差别(P＞0.05);变性细胞率在A组、B组、C组、D组逐渐升高,在E组由于细胞坏死严重导致变性细胞比例减少,B组、C组、D组、E组和A组比较差别有统计学意义(P＜0.05),F组和E比较差别有统计学意义(P＜0.05),F组和A组比较无明显差别(P＞0.05)。其中C组海马CA1区不同程度受损细胞比例较均衡。结论:1、小鼠前脑缺血60 min再灌注24 h模型,成本低廉,简便易成,成功率高,重复性好,能够提供脑缺血再灌注后变性神经元的集中观察区域。2、模型可以用来评价各种脑缺血再灌注后干预措施的优劣。3、文章采用HE染色还有一定局限性,只能对细胞形态作出初步评价,后续可以采用更先进的手段,如共聚焦显微镜、免疫组化检测等等,对细胞功能状态进行评价,进一步完善对模型的研究。4、对模型再灌注时间超过24 h的形态学改变有待去努力研究。
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