论文摘要
目的:观察缺血后处理对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡和相关基因Bcl-2和Bax蛋白表达的影响,同时观察其与缺血预处理叠加作用,以进一步探讨其心肌保护机制。方法:建立大鼠在体心肌缺血再灌注模型。选择雄性SD大鼠48只,重250±20g,随机分为4组:IR组（缺血再灌注组,n=12）,阻断左冠状动脉左前降支（Left anterior descending coronary artery,LAD）40分钟,再灌注120分钟;IPC组（缺血预处理组,n=12）,三次短暂阻断LAD（闭塞5分钟,再灌注5分钟,循环三次）,余同IR组;IPO组（缺血后处理组,n=12）,阻断LAD40分钟,再通30秒,阻断30秒,重复三次,再灌注120分钟;IPC+IPO组（缺血预处理+缺血后处理组,n=12）,即阻断LAD5分钟,再灌注5分钟,循环三次,再次阻断LAD40分钟,再通30秒,阻断30秒,循环三次后再灌注120分钟。镜下观察心肌形态学变化、电镜下观察心肌超微结构变化;TTC法测定心肌梗死范围;逆转录聚合酶链法检测（RT-PCR）法检测Bcl-2、Bax mRNA的表达情况;免疫组化方法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达情况;采用原位末端标记（TUNEL）法测定心肌细胞凋亡率。结果:1.光镜下形态学变化及电镜下超微结构观察,IPC组、IPO组、IPC+IPO组心肌损伤程度较IR组明显减轻,但IPC组、IPO组和IPC+IPO组具有相似的形态学变化。2.心肌梗死范围:IPC组、IPO组和IPC+IPO组心肌梗死范围均明显低于IR组（P<0.05）,而IPC、IPO、IPC+IPO三组之间差别无统计学意义。3.心肌细胞凋亡率: IPC组、IPO组和IPC+IPO组心肌细胞凋亡率明显低于IR组（P<0.05）;而IPC、IPO、IPC+IPO三组之间差别无统计学意义（P >0. 05）。4. Bcl-2、Bax mRNA表达量:IPC组、IPO组和IPC+IPO组Bcl-2 mRNA表达量明显高于IR组（P<0.05）;IPC组、IPO组和IPC+IPO组Bax mRNA表达量明显低于IR组（P<0.05）;IPC组、IPO组和IPC+IPO组间Bcl-2、Bax mRNA表达无统计学意义（P >0. 05）。5. Bcl-2、Bax蛋白表达量:Bcl-2蛋白表达IPC组、IPO组和IPC+IPO组明显高于IR组（P<0.05）;Bax蛋白表达IPC组、IPO组和IPC+IPO组明显低于IR组（P<0.05）;IPC组、IPO组和IPC+IPO组间Bcl-2、Bax蛋白表达无统计学意义（P >0. 05）。结论:1.缺血后处理具有与缺血预处理类似缩小心梗范围作用,缺血后处理对缺血心肌的保护效应可能与其抑制缺血心肌细胞凋亡有关。2.缺血后处理抗凋亡作用的机制可能与其上调Bcl-2蛋白表达和下调Bax蛋白表达。3.本实验未观察到缺血预处理和缺血后处理有叠加作用。