论文摘要
背景：Bartter综合征（Bartter syndrome, BS）是一组临床表现为肾性失盐、低钾血症、代谢性碱中毒、血浆肾素-血管紧张素-醛固酮活性增高、而血压正常或偏低的遗传性肾小管疾病,主要为常染色体隐性遗传。随着分子生物学技术的发展,近年来对其发病机制的认识不断深入,六个编码肾小管转运蛋白或离子通道的基因突变可引起Bartter综合征,即Ⅰ-Ⅴ型Bartter综合征和Gitelman综合征。编码Na-K-2C1联合转运体NKCC2的SLC12A1基因突变导致Ⅰ型Bartter综合征；编码钾通道蛋白ROMK的KCNJ1基因突变导致Ⅱ型Bartter综合征；编码氯通道蛋白ClC-Kb的CLCNKB基因突变导致Ⅲ型Bartter综合征；编码氯通道蛋白ClC-K的β亚单位bartin基因（BSND）突变导致Ⅳ型Bartter综合征；编码钙敏感受体CaSR的CASR基因激活突变导致V型Bartter综合征,为常染色体显性遗传。Gitelman综合征是由编码噻嗪类敏感的钠氯共同转运体NCCT的SLC12A3基因突变导致,其为Bartter综合征的变异型。CLCNKB基因突变导致Ⅲ型Bartter综合征。Ⅲ型Bartter综合征即经典型Bartter综合征,临床表现多样,大多为婴幼儿或儿童发病,表现为烦渴、多尿、夜尿增多、嗜盐、脱水,可伴便秘或呕吐,生长发育迟缓,尿钙可正常或轻度增高,很少发现肾钙化,早期肾功能多正常。部分患儿有孕期羊水过多和早产史。Ⅲ型Bartter综合征的基因型和表现型差异比较大。少数可表现为新生儿型Bartter综合征,新近有报道表现为混合性Bartter-Gitelman综合征。由于Ⅲ型Bartter综合征临床表型多样,CLCNKB基因的突变分析和基因功能研究有助于疾病的诊断、治疗、优生优育及阐明Barter综合征的遗传学基础。目的：为了了解经典型Bartter综合征患者的基因突变情况,探讨其发病机制,提高对该类疾病的认识,本研究对1例经典型Bartter综合征家系CLCNKB基因突变进行分析。方法：提取该家系各成员患者外周血淋巴细胞基因组DNA,应用聚合酶连反应（PCR）扩增CLCNKB基因全部外显子及侧翼序列,并直接测序检测突变。选取50例无亲缘关系的正常人作为对照。结果：1.患者的临床资料：患儿女,出生后4个月发病,以腹泻2个月,发热、呕吐3天于当地医院住院治疗,因低钾低氯代谢性碱中毒,高肾素、高醛固酮血症,诊断为巴特综合征。患儿7年来间断服用消炎痛,口服氯化钾。7岁时来我院复查,临床表现为烦渴、多饮、多尿、嗜盐,便秘,肌无力,反复手足抽搦,无血尿,无泡沫尿等。查体：身高110cm,体重21公斤,血压90/65mmHg,生长发育迟缓,右踝内翻。实验室检查：低血钾,代谢性碱中毒,高肾素、血管紧张素,高醛固酮血症,血常规及尿常规均正常。泌尿系及肾上腺B超未见异常,未行肾活检,临床诊断为经典型Bartter综合征。除患者外,父母及其家系成员均无Bartter综合征的临床表现,血电解质及尿液检查均正常。2.基因检测结果：在该患者中检测到1个杂合（错义）突变。其第4号外显子,第482位碱基T→G突变,造成第161位氨基酸由亮氨酸变为精氨酸（482T>G,L161R）；家系中母亲为杂合突变（L161R杂合突变）,父亲未发现突变；查阅国内外文献及人类基因突变数据库,L161R未见报道,属新发现的突变。另外测序结果发现CLCNKB基因外显子编码区域内单核苷酸多态性（coding SNP, cSNP）位点共8个,均为已报道位点。结论：我们通过直接测序,对1例经典型Bartter综合征家系进行了基因突变分析,发现了一种新的CLCNKB基因突变：L161R。不仅有助于进一步研究CLCNKB基因突变的功能特性,探讨其发病机制,更重要的是提高了对该病的认识。