论文摘要
目的:观察大鼠一侧睾丸扭转/复位后同侧和对侧睾丸生精细胞凋亡情况及睾丸组织中过氧化氢酶及谷胱甘肽过氧化物酶活力变化,探讨一侧睾丸扭转/复位后生殖能力下降的机制以及黄芪注射液对其再灌注损伤的保护作用。方法:1动物分组:将40只体重在150g-200 g之间的健康雄性Wistar大鼠按随机化原则分为4组。分别为假手术对照组（A组n=10）;睾丸扭转/复位组（B组n=10）;睾丸扭转/复位+单次腹腔内注射黄芪注射液组（C组n=10）及扭转/复位+连续腹腔内注射黄芪注射液组（D组n=10）。2模型建立:睾丸扭转/复位模型按Turner法建立。A组大鼠以2%戊巴比妥钠（50mg/kg）腹腔注射麻醉,左侧阴囊切开后游离左侧睾丸后关闭切口;B、C、D三组则游离左侧睾丸后将其精索顺时针扭转720〇,并用1号丝线将睾丸白膜固定于阴囊肉膜上以防止其自发复位,缝合切口。6h后用同样方法再次麻醉B、C、D三组大鼠后拆除其伤口缝线。将B组大鼠扭转的左侧睾丸复位固定。其中C组大鼠在睾丸复位前30分钟腹腔内注射黄芪注射液（3g/kg体重）一次。而D组大鼠除在睾丸复位前30分钟腹腔内注射黄芪注射液（3g/kg体重）一次外,其后每天注射黄芪注射液1次（1g/kg体重）直至术后第3d。所有大鼠均在同等条件下喂养至术后7d处死,切取双侧睾丸。用冷生理盐水冲洗两次后每只睾丸纵向分为两部分,分别放入﹣30℃冰箱中备用。一部分制成组织匀浆,一部分制成石蜡切片。3生殖细胞凋亡的检测:采用原位脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法（TUNEL法）测定凋亡细胞,凋亡细胞核呈棕褐色。凋亡指数（AI）计算以每张切片选取5个高倍视野（200×）,计数100个细胞,求得阳性细胞率。4过氧化氢酶（catalase,CAT）及谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase,GSH-Px）活力检测:采用可见光法测定双侧睾丸组织CAT活力,采用化学比色法测定双侧睾丸组织GSH-Px活力。5统计学分析:所有数据均用X±s表示。组间比较采用多个样本均数比较的方差分析,用SPSS12.0软件包进行统计学分析。检验水准为α=0.05。结果:1生殖细胞凋亡情况:A组（假手术对照组）扭转侧睾丸AI与B、C、D组相比有显著性差异（p<0.05）,B组（睾丸扭转/复位组）扭转侧睾丸AI明显高于C组（睾丸扭转/复位+单次腹腔内注射黄芪组）及D组（睾丸扭转/复位+连续腹腔内注射黄芪组）,p值为p<0.05。C组扭转侧睾丸AI与D组相比有显著性差异（p<0.05）;B与C、D两组对侧睾丸AI相比有显著性差异（p<0.05）,C、D两组对侧睾丸AI有显著性差异（p<0.05）。2 CAT及GSH-Px活力情况:A组扭转侧睾丸CAT及GSH-Px活力与B、C、D相比有显著性差异（p<0.05）,B组扭转侧睾丸CAT及GSH-Px活力明显低于C组及D组（p<0.05）, C、D两组扭转侧睾丸CAT及GSH-Px活力有显著性差异（p<0.05）。B组对侧睾丸CAT及GSH-Px活力明显低于A、C、D各组,均有显著性差异（p<0.05）。A组对侧睾丸CAT及GSH-Px活力明显高于C、D两组;差别有显著意义（p<0.05）;C、D两组间对侧睾丸CAT及GSH-Px活力无显著性差异（p>0.05）。结论:1一侧睾丸扭转可致同侧和对侧睾丸生精细胞凋亡明显增加,从而使生殖能力下降。2一侧睾丸扭转/复位后睾丸组织中过氧化氢酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性降低。3黄芪注射液可明显减轻睾丸扭转/复位所致的缺血再灌注损伤,减少双侧睾丸生殖细胞凋亡,从而保护了大鼠的生育能力,连续应用黄芪注射液优于单次应用。
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