基于核酸适配体和纳米金的凝血酶检测新方法

论文摘要

第一章：本章简述了蛋白质检测的意义和方法,介绍了核酸适配体的概念、筛选及核酸适配体在蛋白质分析中的研究进展；概述了纳米金的特性及其在生化分析中的应用,同时简要介绍了磁性微珠的性能及其在分离检测中的应用；最后阐述了本论文的立题背景、研究内容及创新之处。第二章：文章采用化学还原法制备了金纳米粒子,并通过透射电子显微镜（TEM）及紫外可见光谱（UV-vis）对制得的金纳米粒子进行表征。制备了核酸适配体修饰的金纳米粒子,比较了纳米金与核酸适配体修饰的纳米金在不同溶液中的稳定性。第三章：基于磁性分离和纳米金的光学特性,利用金纳米颗粒标记的核酸适配体和被固定在磁性纳米颗粒上的核酸适配体与凝血酶同时结合,构建一种磁性颗粒／凝血酶／纳米金胶的三明治结构,用比色法实现了对凝血酶的检测。最优条件下,该法对凝血酶的响应线性检测范围为2.7nmol/L-54.4 nmol/L,检测限可以达到2.7 nmol/L。第四章：利用纳米金标记的核酸适配体与凝血酶结合,使原本均匀分散的纳米金颗粒发生聚集,光学吸收发生变化,通过检测纳米金吸收光谱的变化可实现对凝血酶的检测。此法对凝血酶的响应线性范围为13.6nmol/L～272.5 nmol/L,检出限为13.6 nmol/L。

论文目录

• 中文摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 蛋白质分析的意义及方法
• 1.2 核酸适配体用于蛋白质分析的研究进展
• 1.2.1 核酸适配体的筛选——SELEX技术
• 1.2.2 核酸适配体优于抗体的特性
• 1.2.3 核酸适配体在蛋白质分析中的应用
• 1.2.4 前景与展望
• 1.3 纳米金的制备及其在生化分析中的应用
• 1.3.1 纳米金胶的制备
• 1.3.2 纳米金在生化分析中的应用
• 1.4 磁珠在分离检测中的应用
• 1.4.1 磁性微粒的特性
• 1.4.2 生物活性物质的分离与检测
• 1.5 立题背景及研究思路
• 1.6 主要研究内容
• 1.7 创新点
• 参考文献
• 第二章 金纳米粒子的制备、修饰及表征
• 2.1 引言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 材料和仪器
• 2.2.2 纳米金溶胶的制备（Apt29）
• 2.2.3 适配体修饰的纳米金溶胶的制备（Au-Apt29）
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 纳米金溶胶的表征
• 2.3.2 纳米金及适配体修饰的纳米金的稳定性
• 2.4 结论
• 参考文献
• 第三章 基于核酸适配体修饰的纳米金和磁珠的比色法检测凝血酶
• 3.1 引言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 试剂与仪器
• 3.2.2 磁珠上Apt-15（适配体Ⅰ）的固定化
• 3.2.3 纳米金溶胶的制备
• 3.2.4 Apt29（适配体Ⅱ）修饰的纳米金的制备
• 3.2.5 凝血酶的检测
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 洗脱方法
• 3.3.2 凝血酶的检测
• 3.3.3 凝血酶检测选择性比较
• 3.3.4 复杂样品基底的影响
• 3.4 结论
• 参考文献
• 第四章 基于核酸适配体与纳米金聚集的比色法检测凝血酶
• 4.1 引言
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 试剂与仪器
• 4.2.2 Apt15对金纳米粒子的修饰
• 4.2.3 凝血酶的检测
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 凝血酶检测
• 4.3.2 方法的特异性
• 4.4 结论
• 参考文献
• 硕士期间发表论文
• 致谢
• 个人简历及联系方式