论文题目: SOD和APX与切花月季‘Samantha’失水胁迫耐性间的关联
论文类型: 博士论文
论文专业: 农业生物环境与能源工程
作者: 金基石
导师: 高俊平,孙自然
关键词: 月季切花,失水胁迫,超氧化物歧化酶,抗坏血酸过氧化物酶,同工酶,基因表达
文献来源: 中国农业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 已有研究表明,植物体内抗氧化系统与植物对环境胁迫的耐性关系密切。本研究的目的是探讨抗氧化系统关键酶——超氧化物歧化酶(SOD)和抗坏血酸过氧化物酶(APX)与月季切花失水胁迫耐性之间的关联。试材选用切花月季‘Samantha’,分别用这两个关键酶的抑制剂和促进剂进行12h预处理,接着进行不同时间的失水胁迫处理,然后进行瓶插观察。结果表明: 1.与直接瓶插对照比较,失水胁迫显著提高了切花的弯颈率、降低了复水率、抑制了切花的开放进程,缩短了瓶插寿命。与对照相比,失水胁迫处理明显提高了切花花瓣中SOD活性、MDA含量和相对电导率,显著降低了APX活性和抗坏血酸(AsA)含量。 2.SOD的专一性抑制剂,二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDTC,20 mM)预处理在显著抑制花瓣SOD活性的同时,明显减弱了切花失水胁迫耐性,表现在切花弯颈率明显提高,复水率和水势值明显降低,瓶插寿命显著缩短。在花朵自然开放初期,花瓣中存在MnSOD、FeSOD和Cu-ZnSOD 3种类型同工酶。其中,MnSOD有1种,FeSOD有3种,Cu-ZnSOD有2种;迁移率大小依次为Cu-ZnSOD>FeSOD>MnSOD;谱带强弱依次为FeSOD>Cu-ZnSOD>MnSOD。经失水胁迫处理花瓣中诱导产生了3条新的FeSOD(FeSOD4、FeSOD5和FeSOD6)条带,与此同时MnSOD条带消失。经DDTC预处理的花瓣失水胁迫后观察不到上述条带。 3.与胁迫对照相比,1000 mg/L AsA,APX的底物预处理有效地提高了切花的复水率,延长了瓶插寿命,保证了花朵的开放进程,同时显著提高了花瓣中的APX活性和AsA含量,降低了花瓣中的相对电导率;而500 mg/L对氨基酚(β-aminophenol),APX的自杀性抑制剂预处理得到了相反的效果。 4.通过5 mM AsA和6 mM β-aminophenol预处理成功地调节了失水胁迫花瓣中的APX活性。与胁迫对照相比,提高APX的活性可延长切花的瓶插寿命,改善切花的开放状态和花枝的水分状况,提高花瓣中SOD活性,降低花瓣中的MDA含量;而通过抑制APX的活性达到了理想的反证效果。 6.利用简并引物从切花月季‘Samantha’花瓣中克隆到一个569 bp的cDNA片段,通过氨基酸序列分析推断所得到的Rh-APX1为细胞质型的APX片段。Northern分析表明Rh-APX1表达的变化动态与APX酶活性变化一致,推测APX酶活性可能是在转录水平调控的。
论文目录:
中文摘要
英文摘要
缩略词表
第一章 文献综述
1 失水胁迫与切花衰老
1.1 失水胁迫对切花的影响
1.2 相关的生理和技术研究概况
2 活性氧与逆境胁迫
2.1 活性氧产生的场所
2.2 活性氧的危害
2.3 活性氧清除系统
3 植物抗氧化系统中的SOD、AsA和APX与切花衰老
3.1 SOD与切花衰老
3.2 AsA与切花衰老
3.3 APX与切花衰老
4 课题的研究目的、意义及技术路线
4.1 研究目的和意义
4.2 研究技术路线
第二章 切花月季‘Samantha’失水胁迫耐性与SOD之间的关联
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 研究方法
2 结果与分析
2.1 DDTC预处理浓度筛选
2.2 DDTC预处理对失水胁迫后花朵开放的影响
2.3 DDTC预处理对花瓣SOD同工酶的影响
3 讨论
第三章 AsA增加月季切花失水胁迫耐性与提高APX活性间的关联
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 研究方法
2 结果与分析
2.1 AsA和β-aminophenol预处理浓度的筛选
2.2 AsA和β-aminophenol预处理对花瓣相对电导率的影响
2.3 AsA和β-aminophenol预处理对花瓣AsA含量的影响
2.4 AsA和β-aminophenol预处理对花瓣APX活性的影响
3 讨论
第四章 转录水平调节APX与月季切花失水胁迫耐性的关联
1 材料与方法
1.1 材料
1.2 研究方法
2 结果与分析
2.1 花朵开放和瓶插寿命
2.2 鲜重和水势
2.3 MDA含量、SOD和APX活性
2.4 基因克隆和表达
3 讨论
3.1 APX与切花月季失水胁迫耐性的关系
3.2 调节Rh-APX1基因参与切花月季失水胁迫耐性
第五章 综合讨论
1 活性氧与切花衰老
2 SOD与切花月季失水胁迫耐性
3 AsA与切花月季失水胁迫耐性
4 APX与切花月季失水胁迫耐性
第六章 结论
参考文献
发表研究论文
致谢
个人简历
发布时间: 2005-07-22
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