补肾活血通窍汤对庆大霉素致聋小鼠中枢听觉通路核团内NT-3表达的影响

补肾活血通窍汤对庆大霉素致聋小鼠中枢听觉通路核团内NT-3表达的影响

论文摘要

旨在观察补肾活血通窍汤对庆大霉素(Gentamicin,GM)致聋小鼠听力损失的保护作用,及分析内耳受损后神经营养因子-3(neurotrophin-3, NT-3)在中枢听觉通路上神经核团(耳蜗核、下丘及听皮层)内的表达情况,从分子水平探讨中药多靶点作用的相关机制。补肾活血通窍中药复方(处方组成:熟地,骨碎补,淫羊藿,黄芪,当归,丹参,川芎,石菖蒲,水蛭,磁石)煎制为高、中、低三个浓度的汤剂,含生药量分别为2.375g/ml、0.475g/ml、0.095g/ml(按小鼠体重25g,每天灌胃量0.8ml计算,中浓度汤剂相当于70kg成人临床1日常规量的等效量,高浓度汤剂及低浓度汤剂分别相当于中浓度汤剂给药量的5倍及0.2倍剂量)。将40只昆明小鼠随机分为5组,每组8只,A、B、C、D组:补肾活血通窍中药复方高、中、低浓度干预组及生理盐水干预组,每天腹腔注射GM,100mg/kg,连续15天,自腹腔注射GM第一天起分别灌服不同浓度中药复方汤剂和等量生理盐水,连续20天;E组:空白对照组,正常喂养,不做任何处理。灌胃结束后测定各组小鼠听觉脑干诱发电位(ABR)阈值,并采用免疫组织化学方法,及通过计算机图像分析系统检测听觉中枢内NT-3的表达。小鼠耳蜗核及下丘内神经元NT-3的表达:补肾活血通窍汤高、中浓度组NT-3阳性神经元表达明显增多,两组间及与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05);而生理盐水+GM组及补肾活血通窍汤低浓度组NT-3表达明显较正常对照组降低,两组间差异无统计学意义(P>0.05),与补肾活血通窍汤高、中浓度组及于正常对照组相比差异有统计学意义(P<0.01)。小鼠听皮层内神经元递质NT-3表达的影响:生理盐水+GM、补肾活血通窍汤(高、中、低浓度)组与正常对照组内NT-3阳性神经元均呈泛表达,差异无统计学意义(P>0.05)。补肾活血通窍中药复方可以有效拮抗庆大霉素耳毒性作用,对听觉中枢通路核团神经元有一定的保护作用。使用耳毒性药物同时给予补肾活血通窍中药复方早期干预,可以使听觉中枢内NT-3的表达上调,明显改善听力,对于保持其听觉通路的完整性有一定的作用。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 缩略词
  • 绪论
  • 第一部分 理论研究
  • 1 中医对感音神经性聋的认识
  • 2 西医对听觉中枢的认识
  • 3 NT-3相关研究
  • 第二部分 实验研究
  • 1 材料与方法
  • 1.1 实验材料与动物分组
  • 1.2 实验方法
  • 2 实验结果
  • 2.1 体重变化
  • 2.2 ABR阈值
  • 2.3 免疫组化染色
  • 3 讨论
  • 3.1 耳蜗核神经元的影响
  • 3.2 下丘核神经元的影响
  • 3.3 听皮层神经元的影响
  • 3.4 HCRAA作用机理
  • 结论
  • 参考文献
  • 附录
  • 攻读硕士学位期间取得的学术成果
  • 致谢
  • 相关论文文献

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