DNA酶I、载脂蛋白E基因多态性与血脂水平和冠心病的关系研究

论文摘要

冠心病（CAD）是严重威胁人类健康的主要疾病之一,流行病学调查及死因分析结果均显示在今后的20多年中,CAD的发病及死亡在全世界范围内仍呈上升趋势。现阶段,冠心病病因研究主要集中在两个方面:一、继续从宏观水平寻找危险因素如环境因素的作用等。二、从分子生物学水平探讨CAD发病的遗传易感机理。随着分子生物学理论及技术的发展,CAD基因机制研究也越来越受到重视,CAD是一种复杂的多基因遗传病这一观点也日益为人们所接受。研究表明冠心病相关基因涉及到止血系统（包括凝血、纤凝等）、糖类及脂代谢的调节系统、炎症反应系统、血压调节系统、机体的损失修复系统等。2006年,Kumamoto T首次提出DNA酶I G2317等位基因是日本人心肌梗塞的独立危险因素。DNA酶I存在蛋白及基因水平的多态性,其基因多态性主要包括8外显子A2317G单核苷酸多态及4内含子可变串联重复序列。目前,关于中国汉族人群DNA酶I基因多态性的分布特点及多态性与冠心病的关系尚无报道。本研究通过检测正常中国部分汉族人群DNA酶I基因型,总结其多态性分布特征;分析DNA酶I基因多态性冠心病易感性的关系;同时,对DNA酶I与载脂蛋白E基因多态性进行关联分析。第一部分中国部分汉族人群DNA酶I基因多态性的特点及与血脂、血糖相关性研究目的:对中国部分汉族人群DNA酶I进行基因分型,计算各种基因型的分布频率并进行单体型分析,总结基因多态性分布特点,分析各基因型、双倍型与血糖、血脂的关系。方法:入选来自上海交通大学附属第一人民医院体检中心的体检者402名,均经相关检查排除高血压、糖尿病、冠心病、高脂血症。应用PCR及PCR-限制性片段长度多态（PCR-RFLP）技术,分析DNA酶I基因8外显子单核苷酸多态位点A2317G及4内含子56bp可变串联重复序列（HumDN1）的多态性;SHEsis统计软件进行单体型分析;协方差分析基因型间血糖、血脂水平差异。结果:在402例研究对象中共检测到3种A2317G基因型及9种HumDN1基因型,其主要等位基因分别为A2317 （分布频率为53%）、HumDN1*3 （分布频率为48%）。同时,A2317G及HumDN1多态性呈连锁不平衡,其连锁不平衡系数D’=0.717。DNA酶I单体型A-3分布比例最高,所占频率为46.5%。DNA酶I各基因型及双倍型间空腹血糖、甘油三酯、总胆固醇、高、低密度脂蛋白胆固醇水平无明显统计学差异,所有P值均>0.05。结论:与其他种族相比,中国汉族人群DNA酶I基因多态性具有独特的分布特征,其多态性与空腹血糖、血脂水平无关。第二部分中国部分汉族人群DNA酶I基因多态性与冠心病的相关性研究第一章中国部分汉族人群DNA酶I基因型及单体型与急性心肌梗塞的相关性研究目的:探讨DNA酶I与中国部分汉族人群急性心肌梗塞（acute myocardial infarction, AMI）易感性的关系。方法:以278例AMI患者作为病例组,排除冠心病的体检者297例为对照组,PCR及PCR-限制性片段长度多态（PCR-RFLP）技术,分析DNA酶I A2317G及4内含子56bp可变串联重复序列（HumDN1）基因型; SHEsis统计软件进行单体型分析;将年龄、性别、高血压、糖尿病及吸烟作为协变量,应用协方差分析A2317G、HumDN1各基因型间血脂水平的差异;χ2检验分析AMI患者冠脉血管病变支数与基因型的关系。结果:在AMI患者中检测到一种新的未报道过的HumDN1基因型即HumDN1 4/6,但AMI组及对照组A2317G、HumDN1各基因型和等位基因分布差异无明显统计学意义（P>0.05）,两组DNA酶I单体型分布亦无差异。DNA酶I各基因型冠脉血管病变支数无明显差异。HumDN1基因型间总胆固醇水平有明显统计学差异（P=0.02）,而各基因型间血清甘油三酯、高、低密度脂蛋白胆固醇、载脂蛋白AI、B、E及脂蛋白（a）水平无明显统计学差异,所有P值均>0.05。结论:DNA酶I基因可能不是中国汉族人群急性心肌梗塞易感基因,DNA酶I HumDN1基因型与急性心肌梗塞患者血清总胆固醇水平相关。第二章中国部分汉族人群DNA酶I基因型及单体型与不稳定心绞痛的相关性研究目的:探讨DNA酶I基因多态性与汉族人群不稳定心绞痛（unstable angina pectoris, UAP）易感性的关系。方法:以196例UAP患者为病例组,排除冠心病的297例体检者为对照组,PCR及PCR-限制性片段长度多态（PCR-RFLP）分析DNA酶I基因A2317G及HumDN1多态性;协方差分析A2317G、HumDN1各基因型与血脂的关系,将年龄、性别、高血压、糖尿病及吸烟作为协变量;χ2检验分析UAP患者冠脉血管病变支数与基因型的关系。结果: UAP组与对照组A2317G、HumDN1各基因型及等位基因分布无明显统计学差异（P>0.05）,两组DNA酶I单体型分布亦无差异。不稳定心绞痛患者DNA酶I各基因型冠脉血管病变支数、血脂水平的差异无明显统计学意义,所有P值均>0.05。结论:DNA酶I基因多态性与中国汉族人群不稳定心绞痛及其血脂水平无明显相关性。第三部分DNA酶I及载脂蛋白E基因多态性与中国部分汉族人群冠心病的相关研究目的:探讨载脂蛋白E基因多态性与部分汉族人群冠心病及血脂水平的相关性,分析DNA酶I与载脂蛋白E基因多态性的关联关系。方法:以474例冠心病患者（包括278例AMI及196例UAP患者）作为病例组, 297例体检者为对照组,应用扩增阻滞突变系统（ARMS）检测载脂蛋白E基因型;协方差分析基因型与血脂的关系;χ2检验分析DNA酶I与载脂蛋白E基因多态的关联性。结果:冠心病组载脂蛋白E3/3基因型分布频率明显低于对照组,E3/4基因型频率明显高于对照组（P<0.05）;冠心病组ε3等位基因频率低于对照组,ε4等位基因频率明显高于对照组（P<0.05）。冠心病组基因型E4/X的TC、LDL-C、载脂蛋白B明显高于E3/3和E2/X组,E3/3的TC、LDL-C、载脂蛋白B水平也显著高于E2/X（P<0.05）;而各基因型的TG、HDL-C水平无明显统计学差异（P>0.05）。DNA酶I与载脂蛋白E基因多态性关联分析显示P>0.05。结论:载脂蛋白E基因型与血脂代谢及冠心病密切相关,中国汉族人群DNA酶I与载脂蛋白E两者基因多态性间无明显关联。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 前言
• 参考文献
• 第一部分 中国汉族人群DNA 酶I 基因多态性的特点及与血脂、血糖相关性研究
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第二部分 中国汉族人群DNA 酶I 基因多态性与冠心病的相关性研究
• 第一章 中国汉族人群DNA 酶I 基因型及单体型与急性心肌梗塞的相关性研究
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第二章 中国汉族人群DNA 酶I 基因型及单体型与不稳定心绞痛的相关性研究
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 第三部 DNA 酶I 及载脂蛋白E 基因多态性与中国汉族人群冠心病的相关研究
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 参考文献
• 附录 1 问卷调查表
• 附录 2 知情同意书
• 附录 3 SHEsis 分析界面
• 文献综述
• DNA 酶 I 研究进展
• 发表文章
• 致谢