梁寅艳
湖南省株洲市中心医院输血科412000
【摘要】目的对患有高胆红素血症新生儿进行血清检测，并详细分析三种诊断方法即直抗实验、游离实验、释放试验在新生儿溶血病检测的效果，为新生儿溶血病诊断提供依据。方法运用微柱凝胶技术对481例患有溶血病的新生儿进行A、B、O、AB血型游离、不规则抗体检测，并对最后结果进行统计。结果通过对481例患者进行血清检测实验，发现应用释放试验的方法得出阳性率最大为20%，直抗实验最小为2.9%，其中确诊了123例为高胆红素血症新生儿溶血病，A型血的患者占总患病人数比例的49.6，O型和AB型血比例为0、B型血占比为50.4，从以上结果可以看出血型差异对该患有该病并没有严格的统计学意义。结论由于释放实验诊断的阳性概率最大即灵敏度较高，可以作为诊断该病的方法。
【关键词】高胆红素血症；游离实验；释放实验；抗体
0引言
新生儿溶血病（HDN）是一种免疫性疾病，主要是目前与孩童血型出现不和而诱发溶血病。经过多年的研究，目前人类血型大概有40多种，其中ABO型血最容易导致溶血病出现。新生儿溶血病的严重程度不一，主要是由抗原性强弱、新生儿免疫强弱和婴儿代谢补偿能力等一系列因素相关。Rh溶血病通常比较严重，但一般不会在第一胎中发生，下面简要介绍新生儿溶血病的几个临床症状：（1）胎儿全身水肿，且胎儿体内大量红细胞被破坏造成的，胎儿呼吸困难、心率快、心音较弱，严重的将导致胎儿死亡。水肿的具体原因可能与肝功能减退、严重贫血和毛细血管的透性增加因素相关，另外胎盘重量较大。（2）黄疸。溶血病患者的黄疸一般会在一天后出现，血清中没有结合的胆红素十分多。但也有部分患儿病情恢复阶段结合的胆红素数量猛增，导致胆汁粘稠症状。（3）严重的贫血症状，患有溶血病的儿童将出现贫血症状，血型抗体的不断存在使患儿在短期内出现明显贫血，这种问题多出现在未换血患病儿童中。此外还出现肝、脾肿大问题。（4）导致胆红素脑病的发生。溶血病可诱发胆红素脑病，满月儿童的胆红素体内含量超过20mg/dl，早产儿体内胆红素超过14mg/dl时就有可能是胆红素脑病的前兆。该病最初表现为神经萎缩、肌张力下降，发病半天后将出现抽搐、肺部出血症状。本实验采用的实验对象是2010年至2014年481例新生儿血液标准进行统计和检测。
1材料和方法
1.1标本来源
采用2010至2014年出生一周后出现高胆红素血症患病婴儿血液，血液抽取后2小时之内进行送检操作。
1.2使用的试剂和仪器
溶血病微柱凝胶检测卡、６％牛蛋白血清标准、购买来自长春某生物技术公司血清学多用离心机和免疫微柱孵育器，从上海生物医药公司购得ABO红细胞，所有选用的试剂均在没有超过有效使用期，并依照相关说明书进行严格操作。
1.3微柱凝胶技术检测
采用《全国临床检验操作规程》中的游离试验、释放试验等标准操作步骤，最后进行结果的判别。
1.4统计学方法
利用χ2检验实现检测结果的统计和分析。
2结果
2.1患儿血样三项实验检测结果分析
481例患病婴儿血样检测中，直抗检验为阳性比率为2.9%，释放实验检测为阳性比率为20%，游离实验检测为阳性的比率为23.7%，具体的结果如下表所示：
其中表格中的+号表示阳性，-号表示阴性。
3讨论
引发婴儿患HDN病的原因很多，其中最主要的原因是由于胎儿和母体的血型抗原不同，当胎儿的红细胞进入母体后，母体的免疫细胞将其视为抗原进而形成对应的抗体即IGg抗体。该抗体随着血液循环进入胎儿体内进一步与红细胞进行结合，从而破坏胎儿内部的红细胞导致溶血病出现。经过大量的分析证明母体产生的这种抗体是引起HDN主要的抗体，临床实验表明ABO型血最容易出现这种疾病，通常母体的血型为o型，当然引起HDN的不仅有这一种抗体还包括抗E、抗K等。事实证明无论母体中含有以上任何一个抗体，只要胎儿的红细胞上有对应的抗原就会导致HDN疾病的发生。直抗实验、释放试验、游离试验是抗体实验最重要的三种实验，第一个实验主要检测婴儿红细胞表面是否已被母体产生的抗体破坏，后两个实验主要检测婴儿血清内是否含有母体产生的抗体。目前比较成熟的方法有两种，第一种是试管方法，该方法操作复杂、洗涤时间十分长，且受干扰因素很大，不利于临床诊断。另外，抗原及抗体之间的亲和力比较弱，在进行洗涤过程中抗体极容易被洗掉，致使检测结果出现较大偏差。第二种是微柱凝胶技术，这项技术主要通过凝胶浓度来实时控制其间隙，将母体抗体与胎儿体内红细胞结合物经过离心力作用将其分散至凝胶之中，而正常的红细胞通过间隙流入底部。这种方法作重要的特征是不需要进行红细胞的洗涤，并将抗人球蛋白与待检测血液中的蛋白质中和，有效的避免了抗人球蛋白对检测的干扰，使获得的结果更加具有可信性。有关资料表明，与试管法相比，微柱凝胶法的灵敏性更高，二者经过大量实验分析比对得出了如下结论：微柱凝胶法比试管法效果高出1-3滴度。本次研究的结果与其它文献存在一定差异性，有的文献介绍单个释放实验检测的阳性患者占53%，这种问题的出现可能和检测地区人们的血型基因相关，另一种可能可能与检测方法、使用试剂的质量有很大关系。在引言中就已经介绍了HDN疾病可使婴儿患不同程度的贫血、肝功能减退、水肿等症状，最严重的是可损害患儿的神经细胞，为此科学合理的检测方法对早期HDN的诊断有十分重要的作用。据有关机构的实验证明出生天数的多少与HDN检测出的概率息息相关，一般情况下出生天数在三天之内的检出概率为70%左右，大于三天小于七天被检测出的概率为18.9%，当出生七天以后由于病变的红细胞逐渐被破坏，随着人体代谢被排除体外，有些游离的抗体存活也无法较长时间存活，可能会影响检测的结果。本文所选取的检测标本均来自于一周内的高胆红素血症新生儿，其检测出的概率为18.9%，之所以与别的文献检测结果有差异就是因为高出了三天，婴儿体内内游离的抗体部分消散，才导致结果出现不同。为此，可以看出该疾病的三相试验应及早并快速的进行，只有这样才能增加HDN检测出的概率，以便使疾病得到合理治疗，时间越久对婴儿的身体越不利。
4结束语
本试验确诊的这123例病人，通过对试验对象进行后续的追踪访问，发现真实结果与本实验结果相差不大，因此可以得出HDN疾病采用三项试验具有较重要的作用。其中诊断过程中释放试验最重要，因为经过大量试验证明释放试验是最灵敏的，这为HDN疾病的诊断提供了较可靠性性的证据。相对于外国的医疗条件，我国的医疗设施还不完善，科学合理的诊断不仅可以挽救婴儿的生命，而且也减轻了后期患有该疾病的家庭的经济负担，随着科学技术的发展，未来还将产生更加有效的方法，但目前最灵敏、最有效的方法依然是三项实验。
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