甘草组织培养及毛状根诱导的初步研究

论文摘要

甘草为豆科植物，其主要活性成分为甘草酸及黄酮类化合物等。仅依靠从野生药用植物中提取有用的次级代谢产物势必大量消耗野生药用植物资源，甚至导致物种灭绝，生态环境失衡。但采用人工栽培，周期长，部分药用成分含量逐渐降低。而采用组织培养技术可以控制植物生长环境，加速繁殖速度，并可以从细胞培养物直接提取有效成分。本试验以乌拉尔甘草为材料，对甘草愈伤组织培养、细胞悬浮培养、毛状根培养等开展了研究，目的旨在建立甘草完整的组织培养体系，以此提高其次级代谢产物含量，为商业性的有效成分的工业化生产打下坚实的基础，其研究结果如下：1．采用正交试验方法分别选取不同的影响因子进行试验，筛选出诱导甘草愈伤组织的最佳激素组合为MS+2，4-D0.5mg／L+6-BA1.5mg／L+NAA1.5mg／L+KT1.5mg／L+IBA1.5mg／L，最佳增殖组合为MS+2，4-D0.5mg／L+6-BA0.2mg／L+NAA0.2mg／L+KT1.5mg／L+IBA1.0mg／L。甘草愈伤组织干重生长曲线呈“S”形，可以证明甘草愈伤组织的生长具有生长大周期的特性，生长周期为30天。2．向甘草愈伤组织培养基中添加茉莉酸甲酯和黑曲霉两种诱导子均可提高苯丙氨酸解氨酶活性，且在培养周期的第18d达到一个峰值。3．采用正交试验方法分别选取不同的影响因子进行试验，筛选出甘草悬浮培养的优化培养条件为：接种量7g鲜重／100mL，蔗糖70g／L，pH值5.5（灭菌前），激素为2，4-D2.0mg／L、NAA2.0mg／L。甘草细胞悬浮培养生长曲线呈“S”形，具有生长大周期的特性，生长周期为21天。4．利用发根农杆菌感染甘草外植体，诱导出了毛状根，但其诱导率低，且生长慢。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 前言
• 1.2 植物次级代谢物研究现状
• 1.3 甘草的化学成分的研究现状
• 1.4 甘草中黄酮的药理学作用
• 1.5 黄酮的生物合成途径及代谢调控
• 1.6 甘草资源的开发和植物细胞培养研究
• 1.7 目的及意义
• 第二章 甘草愈伤组织的诱导与增殖
• 2.1 甘草愈伤组织的诱导与增殖
• 2.2 细胞生长的动力学实验
• 2.3 小结
• 第三章 诱导子对甘草愈伤组织PAL活性的影响
• 3.1 诱导子对甘草愈伤组织 PAL活性的影响
• 3.2 结果与讨论
• 3.3 小结
• 第四章 甘草悬浮培养体系的建立
• 4.1 甘草悬浮培养条件的优化
• 4.2 甘草悬浮细胞生长的动力学实验
• 4.3 小结
• 第五章 甘草毛状根的诱导及培养
• 5.1 甘草毛状根的诱导及培养
• 5.2 结果和讨论
• 5.3 小结
• 第六章 结论及展望
• 6.1 结论
• 6.2 进一步研究设想
• 6.3 讨论
• 参考文献
• 附录
• 致谢
• 作者简历