论文摘要
第一部分：PRKCH基因多态性与中国冠心病人群遗传易感性相关性研究PRKCH基因，位于14q22-23，共229.1kb，包含14个外显子。PRKCH基因编码的PKCη蛋白是蛋白激酶C （protein kinase C，PKC）的一个亚型。PKC是一类钙依赖性的蛋白激酶，在跨膜信号传递过程中起着重要作用。PKC调节多种细胞的代谢、增殖和分化。此外，病理研究发现：PKCη丰富表达于粥样斑块的泡沫巨噬细胞、单核细胞中，而单核/巨噬细胞有着促进脂蛋白的摄取及活性氧簇的释放，是动脉粥样硬化形成过程中的重要因素，在动脉粥样硬化形成的各个阶段都发挥着重要作用，因此推测PKCη与动脉粥样硬化关系是非常密切的。最近的研究显示PRKCH基因1425G/A、15多态性与包括冠心病（CAD）、卒中在内的动脉粥样硬化疾病及脂质代谢关系密切。本研究使用PCR-LDR方法测定PRKCH基因1425G/A、15突变的基因型，从而探讨这两个位点多态性在国人中与CAD及血脂的相关性。1. PRKCH基因1425G/A、15基因型在病例组和对照组中的分布1425G/A、15在对照组中的基因型分布均符合HWE （Hardy-Weinbergequilibrium，哈迪-温伯格平衡定律） （1425G/A，P = 0.49；15，P = 0.94）。A等位基因（1425G/A，15）的分布频率在冠心病组（19.5%，23.4%）较对照组（13.8%，17.2%）有显著性差异（P = 0.001 for 1425G/A，P = 0.001 for 15）。GA+AA基因型在冠心病（1425G/A，0.347；15，0.391）和对照组（1425G/A，0.253；15，0.172）之间存在统计学差异（P = 0.002 for 1425G/A，P = 0.012 for 15）。与GG基因型相比，1425G/A、15的GA+AA基因型患CAD的风险分别增加了54% （修正后的OR = 1.54，95% CI = 1.14-2.08）、41% （修正后的OR = 1.41，95% CI =1.06-1.89）。2. PRKCH基因1425G/A、15多态性与脂质代谢相关性PRKCH基因1425G/A、15的突变基因型（GA+AA）在冠心病组中具有较高的低密度脂蛋白（Low Density Lipoprotein Cholesterol，LDL-C）水平（1425G/A，P = 0.001；15，P = 0.021），但是这种联系在对照组中不存在。使用bonferroni校正完成多元线性检验，结果观察到1425G/A、15多态性与LDL-C的相关性依然存在，而这两个位点的突变与其它血脂指标[甘油三脂（Triglyceride，TG），胆固醇（Total cholesterol，TC），高密度脂蛋白（High Density LipoproteinCholesterol，HDL-C）]之间没有相关性。3. PRKCH基因的单倍体与CAD相关性15与1425G/A存在连锁不平衡（Linkage Disequilibrium，LD） （D’ = 1.000，r2 = 0.785）。对这两个位点进行单倍体分析后观察到单倍体AA的频率在CAD组中更加高（0.195 vs 0.138, P < 0.001），而单倍体GG在CAD组中的频率为0.766，明显低于对照组人群中的分布（0.828，P < 0.001），表明单倍体AA显著性增加CAD的风险，而单倍体GG却降低了CAD的风险。单倍体GA在CAD及对照组之间的分布不具有统计学差异（0.039 vs 0.033，P = 0.500）。依据单倍体分析，总的P值为0.004，说明PRKCH基因单倍体在CAD及对照组之间的分布具有统计学意义，PRKCH基因单倍体的突变增加了CAD发病率。这种相关性即使在完成了置换检验后依然存在（总P = 0.040）。第二部分：MCP-1/CCR2/RANTES/CCR5基因多态性与冠心病关联性的Meta分析最近的研究表明单核细胞趋化蛋白-1 （Monocyte chemotactic protein-1，MCP-1）基因G2518A、趋化因子受体2 （CC chemokine receptor 2，CCR2）基因G190A、调节激活正常T细胞表达和分泌细胞因子（Regulated on aetivationnormal T expressedand secreted，RANTES）基因G403A及趋化因子受体5 （CCchemokine receptor 5，CCR5）基因wt/Δ32变异与冠心病的相关性存在争议，本研究采用Meta分析探讨MCP-1基因G2518A、CCR2基因G190A、RANTES基因G403A及CCR5基因wt/Δ32多态性与CAD的关联性。1. MCP-1基因G2518A多态性与CAD相关性MCP-1基因G2518A的A等位基因增加了CAD发病风险[显性模型(OR =1.13，95% CI = 1.01-1.26，P = 0.040]。MCP-1基因G2518A多态性在隐性（OR =1.04，95% CI = 0.85-1.29，P = 0.690）及共显性模型（OR = 1.09，95% CI =0.99-1.19，P = 0.070）中与CAD不存在相关性。依据种族进行分层分析显示：MCP-1基因G2518A多态性在非亚洲人群中与CAD的发病率存在关联[显性模型（OR = 1.15，95% CI = 1.01-1.31，P = 0.040）；共显性模型（OR = 1.12，95% CI= 1.00-1.24，P = 0.050）]，而这种联系在亚洲人群中没有出现。2. CCR2基因G190A多态性与CAD相关性CCR2基因G190A多态性在隐性模型中显著性增加了CAD的发病率（OR =2.00，95% CI = 1.24-3.20，P = 0.004），而在显性模型中没有观察到这种相关性（OR = 1.40，95% CI = 0.82-2.41，P = 0.220）。3. RANTES基因G403A变异与CAD相关性RANTES基因G403A突变在隐性（OR = 0.85，95% CI = 0.66-1.10，P =0.220）、显性（OR = 0.90，95% CI = 0.62-1.31，P = 0.570）及共显性模型（OR =0.91，95% CI = 0.69-1.18，P = 0.460）中与CAD不存在联系。4. CCR5基因wt/Δ32变异与CAD相关性研究表明CCR5基因wt/Δ32突变在隐性（OR = 1.20，95% CI = 0.69-2.09，P = 0.510）、显性（OR = 1.59，95% CI = 0.65-3.90，P = 0.310）、共显性模型（OR= 1.04，95% CI = 0.86-1.27，P = 0.680）中没有增加CAD的发病风险。