论文摘要
胃癌是全世界及我国最常见的一种恶性肿瘤,仅我国估计每年有近20万新发胃癌,占全部恶性肿瘤发病的17.2%,仍居各种恶性肿瘤发病率首位。当前我国胃癌的早期诊断率仍较低,Ⅰ期诊断在5%左右,而早期胃癌五年生存率可达94%以上,多数患者发现时已是中晚期,5年生存率仅30%左右,因此提高我国胃癌的早期发现及诊断水平,是提高疗效的关键。手术仍是目前胃癌患者首选的治疗方法,正确的术前分期对估计病情、判断预后、选择治疗方案及手术方式有着重要临床意义。就目前而言,在胃癌的早期诊断、术前分期、预后判断、复发或转移的检测中均存在着不同的问题,胃癌早期诊断和筛选的方法很多,但存在着特异性与敏感性之间的矛盾。而且术前TNM分期也具有较大局限性。因此,寻找与胃癌相关的肿瘤标志物,从而能早期诊断胃癌及准确术前分期具有很大的现实意义。随着分子生物学技术的飞速发展,人类基因组序列图谱完成,生命科学研究己进入蛋白质时代。蛋白质组学为肿瘤的早期诊断及分期提供了新的方法。我们采用最新蛋白质指纹图谱技术对胃癌的蛋白质质谱图进行深入研究,从而发现胃癌的蛋白质组学变化情况,进而为早期诊断胃癌及胃癌分期探索新的方法。方法:1、采用CM10弱阳离子芯片,结合表面增强激光解吸电离飞行时间质谱（SELDI-TOF-MS）技术检测50例首次就诊且病理诊断为胃癌患者和16例健康人血清样本并记录其蛋白质多肽谱指纹,利用Biomarker Wizard软件比较两组间的血清蛋白质指纹图谱,Biomarker Patterns软件进行分析,建立胃癌的特异指纹模型。2、收集63例首次就诊且病理诊断为胃癌患者血清,采用CM10弱阳离子芯片,经表面增强激光解吸电离飞行时间质谱技术（SELDI-TOF-MS）测定得到蛋白质谱,并对胃癌患者不同临床病理分期分组,通过Biomarker Wizard软件比较组间血清蛋白质差异,利用Biomarker Patterns软件建立不同组别拟诊模型。结果:1、胃癌患者血清蛋白质多肽谱与健康人相比,有34个蛋白质差异有统计学意义,其中m/z为6016,6744,2822,4474,7892和3242的六个蛋白质组成的诊断模型能达到鉴别胃癌患者和健康人的最佳诊断效果,在测试模式下,灵敏度和特异度分别为96%和93.75%,准确度为95.45%。2、比较Ⅰ期与Ⅱ期胃癌患者血清蛋白质指纹图谱,其中有19个蛋白质差异有统计学意义（P＜0.05）,m/z为4596、1870、9181、9332、9408和9546的六个蛋白质组成的诊断模型Ⅰ可将Ⅰ期胃癌患者与Ⅱ期胃癌患者准确的分组,敏感性为88.89%（8/9）,特异性为91.67%（11/12）,准确性为90.48%（19/21）;比较Ⅰ期与Ⅲ期胃癌患者血清蛋白质指纹图谱,其中有25个蛋白质差异有统计学意义（P＜0.05）,m/z为2586、3353、4298、3108和2543的五个蛋白质组成的诊断模型Ⅱ可将Ⅰ期胃癌患者与Ⅲ期胃癌患者准确的分组,敏感性为100%（9/9）,特异性为100%（25/25）,准确性为100%（34/34）;比较Ⅰ期与Ⅳ期胃癌患者血清蛋白质指纹图谱,其中有22个蛋白质差异有统计学意义（P＜0.05）,m/z为4659、9332和2543的三个蛋白质组成的诊断模型Ⅲ可将Ⅰ期胃癌患者与Ⅳ期胃癌患者准确的分组,敏感性为88.89%（8/9）,特异性为82.35%（14/17）,准确性为84.62%（22/26）;比较Ⅱ期与Ⅲ期胃癌患者血清蛋白质指纹图谱,其中有9个蛋白质差异有统计学意义（P＜0.05）,m/z为4443、7910和7765的三个蛋白质组成的诊断模型Ⅳ可将Ⅱ期胃癌患者与Ⅲ期胃癌患者准确的分组,敏感性为75%（9/12）,特异性为92%（23/25）,准确性为86.49%（32/37）;比较Ⅱ期与Ⅳ期胃癌患者血清蛋白质指纹图谱,其中有8个蛋白质差异有统计学意义（P＜0.05）,m/z为2543、3973、3242、2951和1411的五个蛋白质组成的诊断模型Ⅴ可将Ⅱ期胃癌患者与Ⅳ期胃癌患者准确的分组,敏感性为83.33%（10/12）,特异性为100%（17/17）,准确性为93.10%（27/29）;比较Ⅲ期与Ⅳ期胃癌患者血清蛋白质指纹图谱,其中有10个蛋白质差异有统计学意义（P＜0.05）,m/z为4057和2934的二个蛋白质组成的诊断模型Ⅵ可将Ⅲ期胃癌患者与Ⅳ期胃癌患者准确的分组,敏感性为96%（24/25）,特异性为52.94%（9/17）,准确性为78.57%（33/42）;比较Ⅰ/Ⅱ期与Ⅲ/Ⅳ期胃癌患者血清蛋白质指纹图谱,其中有15个蛋白质差异有统计学意义（P＜0.05）,m/z为2543、1453和2868的三个蛋白质组成的诊断模型Ⅶ可将Ⅰ/Ⅱ期胃癌患者与Ⅲ/Ⅳ期胃癌患者准确的分组,敏感性为95.24%（20/21）,特异性为73.81%（31/42）,准确性为80.95%（51/63）;比较Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ期与Ⅳ期胃癌患者血清蛋白质指纹图谱,其中有10个蛋白质差异有统计学意义（P＜0.05）,m/z为4659、4091、13937和2934的四个蛋白质组成的诊断模型Ⅷ可将Ⅰ/Ⅱ/Ⅲ期胃癌患者与Ⅳ期胃癌患者准确的分组,敏感性为89.13%（41/46）,特异性为100%（17/17）,准确性为92.63%（56/63）;比较Ⅰ期与Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ期胃癌患者血清蛋白质指纹图谱,其中有21个蛋白质差异有统计学意义（P＜0.05）,m/z为4596、9332、9181、9408、9546和4091的六个蛋白质组成的诊断模型Ⅸ可将Ⅰ期胃癌患者与Ⅱ/Ⅲ/Ⅳ期胃癌患者准确的分组;敏感性为77.78%（7/9）,特异性为90.74%（49/54）,准确性为88.89%（56/63）。结论:1、SELDI-TOF-MS技术用于胃癌患者血清蛋白质多肽谱分析可筛选出有意义的差异表达蛋白组多肽谱指纹,可用此方法建立胃癌的辅助诊断模型。2、利用SELDI-TOF-MS技术对不同临床病理分期胃癌患者血清蛋白质指纹图谱分析,可筛选出有意义的差异表达蛋白组指纹,应用敏感性和特异性高的血清蛋白质组模型可对对胃癌术前做出更准确的临床分期,从而为胃癌的准确术前临床分期提供了可能。