论文摘要
研究背景及目的：自1963年starzal成功实施第一例人体肝移植以来，随着肝移植手术技术的完善，环孢霉素、FK-506以及UW液的临床应用，肝移植术后的长期生存率不断提高，肝移植已成为治疗各种终末期肝硬化性疾病、肝脏恶性肿瘤、先天性代谢性疾病以及各种原因引起的急慢性肝功能衰竭的一种有效手段。但是，目前仍有很多因素制约着肝移植的临床效果，其中供体质量作为肝脏移植成功的关键因素，已受到愈来愈多的关注。检验供体质量最客观的指标是“零点肝活检”。本实验的目的是采取零点肝活检的方式观察供肝低温保存后细胞凋亡现象。方法：采用原位双通路灌注快速供肝切取技术，获取供肝30例。0-4度UW液低温保存，根据保存时间不同分为3组。在低温保存末期于供肝左内叶前缘切取0.5*0.5*0.5cm大小组织，将取下的肝组织4％甲醛固定，石蜡包埋，做连续切片，将制成的切片按末端脱氧核苷酸移换酶介导的脱氧尿苷三磷酸缺口末端标记术（terminal deoxynucleotidyl transferase mediated UTP-FITC nick end labeling，TUNEL）观察细胞凋亡现象，并对凋亡细胞进行计数，计算凋亡指数，了解凋亡程度与低温保存时间的关系。结果（一）：30例移植肝均切取完整，无供体及血管副损伤，供体获得良好灌注，移植术后肝功能恢复顺利，谷丙转氨酶（ALT）于移植术后30天左右降至正常。结果（二）：三组标本阳性细胞数分别为：1.20±0.82，4.06±1.09，6.98±2.25。凋亡指数分别为：0.86±0.77，3.26±1.10，5.86±1.97。结论：肝移植供肝低温保存后存在细胞凋亡现象，且细胞凋亡的程度和低温保存时间呈正相关。