授粉对砀山酥梨果实品质影响的SRAP分析

论文摘要

砀山酥梨原产安徽省砀山县，是我国栽培面积最大的一个梨品种。由于其果实大、果肉粗、松脆、汁多、味甜，是我国出口创汇的主要品种之一。但近些年来，由于品种退化及栽培管理不善等原因，砀山酥梨的石细胞含量增多，果肉变粗，口感多渣，严重影响砀山酥梨的口感和品质。有研究表明，授粉可以改善砀山酥梨果实品质。因此，筛选出合适的授粉品种对改善砀山酥梨石细胞含量具有重要意义。本试验利用不同授粉品种与砀山酥梨授粉，研究授粉对梨果实品质的影响；运用SRAP分子标记技术，对亲本进行亲缘关系分析，明确授粉品种亲缘关系对砀山酥梨石细胞含量及其它品质的影响；应用cDNA-SRAP技术对不同授粉品种授粉后砀山酥梨的果实进行差异表达分析，研究授粉是否改变砀山酥梨母本的基因表达。为筛选出优良的授粉品种；改善砀山酥梨果实石细胞含量，提高果实品质提供理论和实践依据。主要研究结论如下：1．在鸭梨、紫酥、马蹄黄、圆黄、华山、幸水、新世纪、翠玉、翠冠、七月酥10个授粉品种中，选用鸭梨、紫酥、马蹄黄、翠玉为砀山酥梨授粉，砀山酥梨果实石细胞含量均低于自然授粉的砀山酥梨，果实果肉细腻，口感较好；其中鸭梨、马蹄黄、翠玉授粉的果实糖酸比均高于自然授粉的砀山酥梨，果肉甜，风味较好。因此，在生产中可选用鸭梨、马蹄黄、翠玉做砀山酥梨的授粉树。2.授粉品种与砀山酥梨亲缘关系的远近与梨果实石细胞含量大小的变化存在相关性。其中，选用与砀山酥梨亲缘关系较远的紫酥、鸭梨、马蹄黄作授粉树，砀山酥梨果实石细胞含量较低；而选用与砀山酥梨亲缘关系较近的幸水、华山、圆黄作授粉树，砀山酥梨果实石细胞含量较高。因此，可以选用与砀山酥梨亲缘关系较远的梨品种作授粉树，以减少砀山酥梨石细胞含量，改善口感。3.授粉影响砀山酥梨基因表达，进而影响果实品质。cDNA-SRAP技术适用于砀山酥梨差异表达研究。试验从88对引物中，筛选出18对重复性好、扩增条带清晰且多态性丰富的引物组合，进行cDNA-SRAP扩增及数据分析。18对引物组合共产生275条清晰条带，平均每个引物组合产生15.3条。其中多态性条带82条，占总条带的29.8%，平均每个引物产生4.6条多态性条带，表现出较好的重复性与多态性。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 文献综述
• 1.1 授粉对果实品质的影响
• 1.1.1 授粉对果实外在品质的影响
• 1.1.2 授粉对果实内在品质的影响
• 1.2 梨石细胞的研究
• 1.2.1 梨石细胞与果实品质的关系
• 1.2.2 石细胞的特性
• 1.2.3 亲缘关系对梨石细胞的影响
• 1.2.4 授粉对梨果实石细胞的影响
• 1.2.5 其它因素对梨果实石细胞的影响
• 1.3 SRAP 分子标记
• 1.4 cDNA-SRAP 在植物上的应用
• 2 引言
• 3 材料与方法
• 3.1 实验材料
• 3.2 实验设计
• 3.3 主要试剂和仪器
• 3.3.1 主要试剂
• 3.3.2 主要仪器
• 3.4 测定项目及方法
• 3.4.1 石细胞含量的测定
• 3.4.2 可溶性糖含量的测定
• 3.4.3 可滴定酸含量的测定
• 3.4.4 DNA 的提取
• 3.4.5 RNA 的提取
• 3.4.6 cDNA 第一链的合成
• 3.4.7 引物的筛选
• 3.4.8 SRAP-PCR 扩增和产物检测
• 4 结果与分析
• 4.1 授粉对砀山酥梨果实品质的影响
• 4.1.1 授粉对砀山酥梨石细胞含量的影响
• 4.1.2 授粉对砀山酥梨可溶性糖含量的影响
• 4.1.3 授粉对砀山酥梨有机酸含量的影响
• 4.1.4 授粉对砀山酥梨糖酸比的影响
• 4.2 亲本亲缘关系对砀山酥梨石细胞含量的影响
• 4.2.1 梨基因组总 DNA 的电泳检测
• 4.2.2 SRAP 反应体系的优化
• 4.2.3 SRAP 引物的扩增
• 4.2.4 砀山酥梨及授粉品种亲缘关系的聚类分析
• 4.3 基于 SRAP 分析的亲缘关系对砀山酥梨石细胞的影响
• 4.4 授粉对砀山酥梨基因表达的影响
• 4.4.1 不同品种授粉后砀山酥梨总 RNA 的电泳检测
• 4.4.2 c-DNA 第一链电泳检测
• 4.4.3 不同授粉后砀山酥梨果实 cDNA-SRAP 扩增结果
• 5 讨论
• 5.1 授粉对砀山酥梨果实品质的影响
• 5.2 授粉对砀山酥梨基因表达的影响
• 5.3 亲缘关系对砀山酥梨石细胞含量的影响
• 6 结论
• 参考文献
• 致谢
• 作者简介
• 在读期间发表的论文