血小板功能检测及其临床应用

血小板功能检测及其临床应用

刘姣(哈尔滨热电有限责任公司职工医院黑龙江哈尔滨150000)

【中图分类号】R446.1【文献标识码】A

【文章编号】1672-5085(2010)28-0197-01

1血小板功能检测

代表血小板功能的指标很多,经过多年临床验证,对许多指标已有了新的评估,发展了一些新的项目,逐渐淘汰了一些应用价值有限的指标。

出血时间(BT)由于不能证明与血小板数,与体内血小板功能,与疗效判断,与出血的预示,以及进行方法标准化后仍未能改进BT的上述不足,在1990年已对此项指标的临床应用价值提出疑问。目前国内提出的出血时间测定的替代方法价值正在评估中。粘附性测定无论是体内法还是体外法,均是代表血小板粘附和聚集功能的总体结果,并不能单独反映血小板粘附能力,目前在临床上仅限于少数出血性疾病中的应用。血小板聚集试验在作为遗传性血小板功能性疾病中仍是十分有用的指标,由于此项指标的方法学要求较高以及正常人群与功能异常者,尤其在评估高血小板反应性的患者中从个体化角度作判断分析时,其意义较为有效。血小板颗粒内容物的释放产物PF4和B—TG曾作为血小板储藏池疾病和血小板活化标志物,但由于在操作过程中常可引起血小板体外活化,因此,以后一种目的应用此二项指标已逐渐为其他指标所替代。过去几年采用过的前列腺素代谢产物TXB2在作为反映血小板活化方面也存在类似的问题,因此,这项指标在反映活化程度中的灵敏度也有所降低。血小板膜糖蛋白Ib,IIb/IIIa,V,Ia等是参与血小板粘附和聚集功能的主要粘附蛋白,在一些遗传性血小板疾病中明显下降,而在血栓性疾病中也可见到某些糖蛋白表达增高,作为血小板活化标志物。作为细胞信使的某些成分如cAMP,Ca2+等在血小板基础研究中予以应用,其中血小板胞浆Ca2+浓度的测定随着它与某些临床疾病之间关联的发现,现已在血脂增高和降血脂治疗,以及动脉粥样硬化患者中检测应用。常用方法是采用Fura—2的荧光法,也可采用带有钙离子浓度测定的血小板聚集仪。

2新的和常用的检测仪器

2.1流式细胞仪

(1)优点:在血小板研究中可在较为生理环境下进行,无血小板亚群丢失,检测到活化状态血小板的多个受体,能对血小板减少的标本进行检测。(2)检测项目:糖蛋白Ib,IIb/IIIa,V,IIIa;PLA1,PLA2;X酶、凝血酶原酶;胞浆Ca2+;P—选择素;腺嘌呤核苷酸;网织血小板。(3)临床应用:血小板高反应性疾病;血小板低反应性疾病;骨髓移植疗效估价;血小板减少症;GPIIb/IIIa拮抗剂治疗监测。

2.2血小板功能分析仪可以检测与血小板粘附、聚集、栓子形成的初期止血障碍相关的疾病,血栓性疾病、GPIIb/IIIa拮抗剂等抗血小板药物监测、DDAVP治疗及肝肾功能疾病等。

2.3血小板聚集仪血小板聚集性测定常用的有比浊法和阻抗法二种,比浊法最为常用,在搅拌的PRP中加入诱导剂引起血小板聚集,以透光度增加的百分率来表示聚集程度。一般实验室配有ADP、胶原、花生四烯酸和瑞斯托酶素四种诱导剂就够用。在不同疾病及在抗血小板药物监测中存在诱导剂种类和浓度选择的问题,正确的选择会有利于对疾病的判断和药物的监控。阻抗法可测定全血中的血小板聚集,存在着无血小板活化和亚群丢失优点,并能反映细胞间相互作用,为比浊法所不及之处,是一项观察体内血小板与其他细胞间相互作用的有用方

法。为更灵敏地反映体内血小板的活化,近年来已发明了一些新的方法,采用激光衍射法的血小板聚集仪可检测聚集反应中所形成的不同大小聚集体,或采用血小板计数仪测定聚集后的标本中剩余的血小板数。在检测血栓性疾病的血小板活化及在GPIIb/IIIa拮抗剂监测中据报道较比浊法更灵敏。

3血小板功能检测的临床应用

3.1出血性疾病

(1)遗传性血小板疾病:表现为血小板病和血小板减少,二者常合并存在。(2)获得性血小板功能异常。可由下列不同原因引起:①药物、食物和维生素;②慢性肾衰;③体外循环;④骨髓增生异常疾病;⑤抗血小板抗体。

3.2血栓性疾病血栓前状态的预告因子;指导抗血小板药物治疗及疗效判断;血栓性疾病的鉴别诊断。由于血栓形成是一类多因素疾病,血栓形成的机制又十分复杂,通过一项或几项检测预示一些急性血栓形成,至今仍不可能。

3.3血小板膜糖蛋白基因多态性与动脉血栓形成二者之间的关系正在研究中。GPIIIa的PLA1(Leu33)→PLA2(pr033)、Gpba上的三个基因多态性,胶原受体GPIa807C/TLys505Glu等基因多态性与缺血性心脏病、脑血管病和介入疗法的关系研究,使人们对这些疾病与遗传基因之间的关系有了新的认识。

3.4药物监测中的应用抗血小板药物监测通常采用比浊法血小板聚集性测定即可,如采用PFA—100时,其灵敏性更高。诱导剂的选用应根据药物的抑制作用特征,譬如ASA,可先用AA+ADP或胶原,服用抵克力得和玻立维时可选用ADP,而在GPIIb/IIIa拮抗剂治疗时,可采用全血血小板聚集仪或流式细胞仪进行检测。

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