小麦抗盐相关转录因子的筛选与分析

论文摘要

盐胁迫严重影响植物的生长发育,筛选与鉴定耐盐相关基因是培育抗盐品种的基础。植物抗逆是有多基因控制的。植物转录因子在植物的生长发育及其对外界环境的反应中起着重要的作用。本文对本实验室全长cDNA文库的526个转录因子进行了盐胁迫筛选,获得了两个与小麦抗盐相关的转录因子TabZIP 60和TaC2H2 11,并对其序列与功能进行了分析,获得如下结果:TabZIP 60的长度是1741bp,编码338个氨基酸。在聚类分析中发现TabZIP 60与拟南芥的A家族和水稻的A家族亲缘关系最近。TabZIP 60受高盐,ABA诱导后表达量明显升高;受PEG与冷的胁迫诱导,但表达模式与盐胁迫不同。GFP亚细胞定位表明该转录因子是一个核定位蛋白。TaC2H2 11长度是2496bp,编码613个氨基酸。受高盐诱导后表达量明显升高。此外它还受ABA,PEG和冷胁迫的诱导,但表达模式与盐胁迫不同。GFP亚细胞定位表明该转录因子位于细胞核上。利用Gateway技术将这两个转录因子转化拟南芥,抗盐的功能分析工作仍在进行中。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1 引言
• 1.1 盐胁迫对植物的伤害
• 1.2 bZIP 转录因子家族的研究进展
• 1.2.1 bZIP 转录因子的结构和组成
• 1.2.2 bZIP 转录因子的进化
• 1.2.3 bZIP 转录因子在盐胁迫中的作用
• 1.3 C2H2 转录因子家族的研究进展
• 1.3.1 C2H2 转录因子家族的构和组成
• 1.3.2 C2H2 转录因子的功能
• 1.4 研究的目的和意义及技术路线
• 1.4.1 研究的目的和意义
• 1.4.2 技术路线
• 2 小麦盐胁迫相关基因TabZIP 60 的克隆与分析
• 2.1 材料与方法
• 2.1.1 材料
• 2.1.2 方法
• 2.1.3 GFP 亚细胞定位的研究
• 2.1.4 应用Gateway 技术转化拟南芥
• 2.1.5 Gateway 技术转化拟南芥
• 2.1.6 冻融法转化农杆菌
• 2.1.7 拟南芥的培养
• 2.2 结果与分析
• 2.2.1 小麦茶淀红RNA 提取与检测
• 2.2.2 盐胁迫诱导的小麦转录因子的筛选
• 2.2.3 半定量 RT-PCR 的验证结果
• 2.2.4 TabZIP 60 转录因子在盐胁迫下的表达分析
• 2.2.5 TabZIP 60 转录因子在ABA 胁迫下的表达分析
• 2.2.6 TabZIP 60 转录因子在PEG 胁迫下的表达分析
• 2.2.7 TabZIP 60 转录因子在冷胁迫下的表达分析
• 2.2.8 TabZIP 60 亚细胞定位分析
• 2.2.9 TabZIP 60 序列分析
• 2.3 讨论
• 3 小麦盐胁迫相关基因 TaC2H2 11 的克隆与分析
• 3.1 材料与方法
• 3.1.1 材料
• 3.1.2 方法
• 3.1.3 GFP 亚细胞定位的研究
• 3.2 结果与分析
• 3.2.1 小麦茶淀红 RNA 的提取与检测
• 3.2.2 盐胁迫诱导的小麦转录因子的筛选
• 3.2.3 半定量 RT-PCR 的结果
• 3.2.4 实时定量 PCR 分析 TaC2H2 11 在各种处理下的诱导反应
• 3.2.5 GFP 亚细胞定位分析
• 3.3 讨论
• 4 结论
• 致谢
• 参考文献
• 作者简介