丹参素对大鼠肝星状细胞ERK1/2信号转导通路的影响

论文摘要

目的观察丹参素对血小板衍生生长因子-BB （platelet derived growth factor-BB PDGF-BB）刺激大鼠肝星状细胞（hepatic stellate cell HSC ）增殖、Ⅰ型胶原合成、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2（Phosphorylated extracellular signal- regulated kinase 1/2 ,P-ERK1/2）表达的影响,探讨丹参素抗肝纤维化的分子机制。方法1.采用改良的胶原酶-链霉蛋白酶消化法分离大鼠HSC,α-SMA免疫细胞化学染色鉴定分离的HSC;2.MTT比色法检测丹参素对PDGF-BB刺激的大鼠HSC增殖活性影响;3.免疫细胞化学染色法测定丹参素对PDGF-BB刺激的大鼠HSCⅠ型胶原合成的影响;4.Western blot测定丹参素对PDGF-BB刺激的大鼠肝星状细胞P-ERK1/2表达影响。结果1.原代分离的HSC得率为3.5×107/鼠左右,存活率大于98%,传一代的HSC纯度大于99%;2.与空白对照组比较PDGF-BB刺激组HSC增殖明显增强（P<0.01）,丹参素可抑制PDGF-BB刺激大鼠HSC增殖（P<0.05）,随丹参素作用浓度的增加抑制作用增强（P<0.01）;3. PDGF-BB刺激组HSCⅠ型胶原合成增强（P<0.01）,丹参素可抑制PDGF-BB诱导的大鼠HSCⅠ型胶原合成（P<0.05）,随丹参素作用浓度的增加抑制作用增强（P<0.01）;4. PDGF-BB刺激组大鼠肝星状细胞P-ERK1/2明显表达,不同浓度的丹参素组均能明显抑制PDGF-BB刺激大鼠肝星状细胞P-ERK1/2表达,随丹参素作用浓度的增加抑制作用增强。结论1.原代分离的大鼠HSC经过鉴定具有活化HSC的生物学特性,是体外研究肝纤维化的重要模型。2.丹参素可抑制PDGF-BB刺激的大鼠HSC增殖,Ⅰ型胶原合成,其机制可能与抑制ERK1/2信号转导通路有关。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 第一部分 原代大鼠肝星状细胞的提取，培养，鉴定
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 第二部分 丹参素对大鼠肝星状细胞增殖、Ι型胶原合成的影响
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 第三部分 丹参素对大鼠肝星状细胞ERK1/2 信号转导通路的影响
• 1 材料
• 2 方法
• 3 结果
• 4 讨论
• 全文总结
• 参考文献
• 附图
• 文献综述
• 致谢
• 攻读硕士期间的研究成果及发表学术论文目录