论文摘要
心脏是脊椎动物器官发生过程中最早形成的器官之一。心脏发育是一个复杂的过程,它受一系列基因的精确调控。鉴定在心脏发育过程中起调控作用的基因和分子途径,将促进人们从分子水平认识心脏发育和先天性心脏病发生的机制。在心血管系统疾病的研究中已发现,某些基因在时空上的表达紊乱可导致先天性心脏病,而对部分心血管系统病症高发人群的研究也证明部分后天形成的心脏病与遗传因素有关。 通过人类胚胎心脏文库克隆到了一个重要的人类基因hLBH。hLBH的cDNA长3053bp,编码一个105个氨基酸残基的蛋白。其蛋白质在进化上从斑马鱼,小鼠到人类高度保守。Northern blot结果检测到了一个3.1kb的转录本,hLBH在胚胎和成人时期在心脏有强烈的表达。在COS-7细胞中,与绿色荧光蛋白共转染实验表明该蛋白定位于胞核与胞质之中。随后将hLBH与Gal4-DNA结合区域形成融合蛋白后,与VP16一起共转染,通过荧光素酶检测实验表明,hLBH是一个转录激活因子。hLBH蛋白在COS-7细胞中过表达后,激活了SRE和AP-1的活性,这些结果表明hLBH可能是一个转录激活因子通过MAPK信号途径介导细胞功能。分别去掉N末端依赖于脯氨酸的丝氨酸/苏氨酸激酶位点和C末端ERK-D模体后的实验表明,5‘端依赖于脯氨酸的丝氨酸/苏氨酸激酶位点和3‘端ERK-D模体在基因的转录激活中起了重要的作用。
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