山胡椒抗肿瘤转移化学成分研究

论文摘要

山胡椒[Lindera glauca var.（Siebold et Zucc.）Blume],是我国的传统中药,应用历史悠久,属樟科（Lauraceae）山胡椒属（Lindera）植物。我国长江中下游、秦岭、淮河以南17个省区均有山胡椒分布,资源极为丰富。山胡椒味辛、大热、无毒,主治心腹痛,中冷,破滞等症。现代药理学研究表明山胡椒具有细胞毒、抗菌和抗病毒等活性。本文以发现新生物活性成分为目的,对山胡椒进行抗肿瘤转移作用研究发现,95%乙醇提取物具有明确的抗人乳腺癌细胞（MDA-MB-231）的趋化迁移作用,在浓度30μg.ml-1下,抑制率达到57.69%。本课题对山胡椒开展了抗肿瘤转移化学成分研究,采用溶剂萃取、常压硅胶柱色谱和凝胶柱色谱分离,制备高效液相色谱纯化,从山胡椒的正丁醇和乙酸乙酯层提取物中共分得10个化合物,属于生物碱和单萜类化合物,进一步利用MS、1H.NMR、13C-NMR、HMBC、HSQC等有机波谱学方法对其化学结构进行了鉴定,分别为樟苍碱（1）,N-甲基樟苍碱（2）,瑞枯灵（3）,紫堇碱（4）,N-反式阿魏酸酪酰胺（5）,N-顺式阿魏酸酪酰胺（6）,芒籽香碱（7）,降异紫堇定碱（8）,[9,9,9-2H3]-（1S*,3S*,4S*, 8S*）-ρ-Menthane-3,8-diol（9）,[9,9,9-2H3]-（1S*,3R*,4S*,8S*）-ρ-Menthane-3,8-diol（10）。其中化合物9和10为首次从该属植物中分离得到,化合物3为首次从该植物中分离得到。本文进一步以Transwell趋化实验方法对山胡椒的各提取部位和化合物进行了抗肿瘤转移活性的筛选。实验结果表明化合物1,2,4,5,7和9均有明确的抗肿瘤转移作用,其中化合物l,4和5的抗肿瘤转移活性较强,化合物l在浓度4μg.ml-1下对人乳腺癌细胞MD-MBA-231趋化抑制率达到70.7%。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 本文鉴定的化合物结构
• 符号说明
• 前言
• 研究现状、成果
• 研究目的、方法
• 一、山胡椒化学成分的提取分离
• 1.1 实验仪器
• 1.2 实验材料
• 1.3 提取和不同极性部位的萃取
• 1.4 正丁醇和乙酸乙酯萃取物的分离
• 二、化合物的结构解析与鉴定
• 2.1 化合物1的结构解析
• 2.2 化合物5的结构解析
• 2.3 化合物9的结构解析
• 2.4 各化合物的理化数据
• 三、山胡椒化学成分的抗肿瘤转移作用筛选
• 3.1 基本原理
• 3.1.1 MTT比色测定法的原理
• 3.1.2 Transwell chemotaxis法
• 3.2 实验材料
• 3.2.1 试剂
• 3.2.2 实验仪器
• 3.2.3 细胞株
• 3.3 实验方法
• 3.3.1 实验准备
• 3.3.2 MDA-MB-231细胞的培养
• 3.3.3 抗肿瘤细胞转移活性成分的筛选
• 3.4 实验结果和讨论
• 3.4.1 MTT测试各单体化合物的非细胞毒剂量
• 3.4.2 趋化实验结果
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 综述
• 参考文献
• 致谢