FISH技术检测宫颈癌组织中hTERC、HER-2基因表达及其临床意义

论文摘要

目的应用FISH技术检测宫颈组织中hTERC、HER-2基因的表达,分析其与临床病理参数之间的关系,探讨hTERC、HER-2在宫颈癌发生、发展中的可能作用。方法收集2008年3月至2009年3月于青岛大学医学院附属医院妇科就诊的162例患者的宫颈脱落细胞标本,其中正常及炎症者45例,CINⅠ者29例,CINⅡ-Ⅲ者38例,宫颈癌50例。收集同期手术切除或活检的宫颈组织标本63例,其中病理结果证实正常及炎症者13例,CINⅠ者12例,CINⅡ-Ⅲ者20例,宫颈癌者18例。采用五种制片方法,应用荧光原位杂交方法（FISH）检测所收集的细胞及组织中hTERC及HER-2基因的表达情况并比较五种制片方法之间的差异。结果对于所检测的225例标本,其中直接涂片法12例、生理盐水法60例、低渗制片法20例、TCT制片法70例、石蜡包埋组织切片制片法63例,总杂交成功率为76.4%；TCT制片法、石蜡包埋组织切片制片法的杂交成功率与其他制片法的杂交成功率的差异有统计学意义（P<0.05）,其中TCT制片法的杂交成功率最高,为87.1%.hTERC、HER-2基因在40例正常宫颈中不表达,而在其他病变组均有表达。hTERC基因在CINⅠ组、CINⅡ-Ⅲ组、宫颈癌组中的阳性表达率逐渐增高,差异具有统计学意义（P<0.05）；HER-2基因在CINⅠ组、CINⅡ-Ⅲ组、宫颈癌组中的阳性表达率分别为6.5%、28.6%、59.3%,依次逐渐增高,差异具有统计学意义（P<0.05）.hTERC、HER-2基因的高表达与细胞分级均明显相关（P<0.05）。hTERC、HER-2基因在宫颈癌中的表达与肿瘤淋巴结的转移及分化程度均有明显相关（P<0.05）,但与患者年龄、肿瘤大小、临床分期、组织学类型及病理类型无明显相关（P>0.05）。结论对比五种FISH制片方法,在检测hTERC基因的宫颈癌筛查中,TCT制片法明显优于其他方法,而在指导宫颈病变及宫颈癌的治疗中,石蜡包埋组织切片法的实际意义更大。hTERC、HER-2基因高表达在子宫颈癌中发生发展中可能起重要作用,在子宫颈病变脱落细胞或组织中检测hTERC、HER-2基因可以作为子宫颈癌早期筛查、病情监测、评估预后的辅助指标。

论文目录

• 中文摘要
• Abstract
• 引言
• 第一章 实验材料
• 1.1 标本来源
• 1.2 主要试剂
• 1.3 主要仪器、设备
• 1.4 主要实验材料
• 第二章 实验方法
• 2.1 试剂配制
• 2.2 取材和制片
• 2.2.1 直接涂片法
• 2.2.2 生理盐水法
• 2.2.3 低渗滴片法
• 2.2.4 TCT制片法
• 2.2.5 石蜡包埋组织切片制片法
• 2.3 杂交前玻片预处理
• 2.3.1 直接涂片法、生理盐水法、低渗滴片法、TCT制片法制备的样本玻片杂交前预处理
• 2.3.2 石蜡包埋组织切片制片法制备的样本玻片杂交前预处理
• 2.4 FISH杂交过程
• 2.5 FISH结果诊断标准及分析方法
• 2.5.1 结果分析
• 2.5.2 结果判断
• 2.5.3 对各种涂片方法的评估
• 2.6 统计学分析
• 第三章 实验结果
• 3.1 五种制片方法的比较
• 3.2 hTERC、HER-2在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变及宫颈癌中的表达
• 3.3 hTERC、HER-2基因在不同组织学分组中的表达
• 3.4 hTERC、HER-2基因在不同细胞学各分组中的表达
• 3.5 宫颈癌组hTERC、HER-2基因表达与临床病理特征的关系
• 第四章 讨论
• 结论
• 参考文献
• 综述
• 综述的参考文献
• 攻读学位期间的研究成果
• 致谢