黄酒中抗氧化活性物质的研究

论文摘要

本论文主要对黄酒的主要抗氧化活性成分,包括对酚类和肽类物质进行分离和抗氧化活性的测定,并将其与从银杏中分离得到的多种抗氧化活性的物质进行抗氧化协同作用的研究。测定了黄酒中的多酚含量以及抗氧化性。大孔树脂分离黄酒中的总酚和多肽物质,测定抗氧化性,分析表明黄酒的抗氧化性主要来源于其中含有的多酚物质,也有一部分来源于多肽。对黄酒中主要的三种主要酚类（儿茶酚,没食子酸,丁香酸）的抗氧化活性测定,表明这三种酚类都有很强的抗氧化性,是黄酒抗氧化性的主要来源。通过大孔树脂,离子交换层析,凝胶过滤层析,反相层析,得到两个具有一定抗氧化活性的多肽样品,分子量为600Da。氨基酸组成分析表明,黄酒多肽的抗氧化性来源于肽链中的精氨酸,亮氨酸,赖氨酸等氨基酸。以银杏种仁为原料,通过提取液浸取,硫酸铵沉淀,DEAE-52离子交换层析,MonoQ离子交换层析,UltroGelACA-54分子筛层析,获得一种有抗氧化活性的蛋白E1。该蛋白经UltroGelACA-54分子筛层析测定分子量为60KD,PAGE鉴定为单一条带。SDS-PAGE鉴定也为单一条带,亚基分子量约为10KD,初步推测该蛋白为单一亚基组成,亚基数为6个。此外,通过热水浸取,Sevag法去蛋白,乙醇沉淀,DEAE-52离子交换层析,UltroGelACA-34分子筛层析,得到银杏种仁多糖。该多糖具有一定的清除DPPH自由基的能力。通过乙醇温育浸取,90%乙醇沉淀,大孔树脂吸附,初步得到银杏种仁酚类乙醇提取物。该乙醇提取物具有很强的清除DPPH自由基的能力。将黄酒的主要抗氧化成分与从银杏种仁中分离得到的抗氧化物质进行抗氧化协同作用研究,结果表明。银杏种仁蛋白E1与儿茶酚,没食子酸,丁香酸有一定的协同作用,pH3,温度为60℃时,反应体系的抗氧化性最好。反应时间对协同作用影响实验表明E1使反应较为温和,抗氧化能力释放时间延长。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 绪论
• 1.1 研究背景
• 1.1.1 黄酒及其活性物质的研究现状
• 1.1.2 常规营养物质的研究现状
• 1.1.3 生理活性物质的研究现状
• 1.1.4 黄酒中添加功能性物质的研究现状
• 1.2 国内外研究现状
• 1.2.1 机体氧化原理
• 1.2.2 生物抗氧化剂的种类以及作用方式
• 1.2.3 天然抗氧化剂的研究现状
• 1.2.4 抗氧化剂的协同作用
• 1.2.5 抗氧化剂协同作用的分析方法
• 1.3 立题意义
• 1.4 本课题主要任务和目标
• 1.4.1 研究目标
• 1.4.2 研究内容
• 第二章 黄酒中抗氧化活性成分的研究
• 2.1 前言
• 2.2 材料与方法
• 2.2.1 主要实验材料
• 2.2.2 主要实验仪器
• 2.2.3 抗氧化活性研究
• 2.2.4 黄酒中多酚和蛋白含量的测定
• 2.2.5 分子量分布分析
• 2.2.6 黄酒中多酚物质的粗提和抗氧化性分析
• 2.2.7 黄酒中肽类物质的研究
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 黄酒的抗氧化活性
• 2.3.2 多酚物质的粗提以及抗氧化活性研究
• 2.3.3 黄酒多酚中三种主要组成对其抗氧化活性的贡献
• 2.3.4 肽类物质的分离与研究
• 2.4 本章小结
• 第三章 银杏种仁中抗氧化活性物质的初步提取
• 3.1 前言
• 3.2 材料与方法
• 3.2.1 主要实验材料
• 3.2.2 主要实验仪器
• 3.2.3 抗氧化蛋白的制备与纯化
• 3.2.4 蛋白质纯度鉴定以及分子量的测定
• 3.2.5 多糖的提取
• 3.2.6 酚类物质的提取
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 抗氧化活性蛋白的分离纯化
• 3.3.2 蛋白质纯度鉴定以及分子量的测定
• 3.3.3 清除DPPH 自由基能力的研究
• 3.3.4 多糖的提取
• 3.3.5 酚类物质的提取
• 3.4 本章小结
• 第四章 几种物质的抗氧化性协同作用初步研究
• 4.1 前言
• 4.2 材料与方法
• 4.2.1 主要实验材料
• 4.2.2 主要实验仪器
• 4.2.3 抗氧化物质间协同性的研究
• 4.2.4 抗氧化物质间的协同作用
• 4.2.5 pH 对协同作用的影响
• 4.2.6 温度对协同作用的影响
• 4.2.7 反应时间对协同作用的影响
• 4.2.8 黄酒中添加银杏种仁提取物对其抗氧化性的影响
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 单一抗氧化物质对DPPH 自由基的清除效果
• 4.3.2 银杏种仁蛋白与三种酚类物质的协同作用
• 4.3.3 银杏种仁多糖与三种酚类物质的协同作用
• 4.3.4 银杏种仁酚类物质与三种酚类物质的协同作用
• 4.3.5 pH 对协同作用的影响
• 4.3.6 温度对协同作用的影响
• 4.3.7 反应时间对协同作用的影响
• 4.3.8 黄酒中添加银杏种仁提取物对其抗氧化性的影响
• 4.4 本章小结
• 第五章 结论与展望
• 5.1 主要结论
• 5.2 展望
• 致谢
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文