论文摘要
高血压是一种以动脉收缩压或舒张压升高为特征的临床综合症,它常伴有心脏、血管、脑和肾脏等器管疾病。食品蛋白质中含有具有降血压作用的活性肽（降血压肽）,它可以通过抑制血管紧张素转换酶（ACE）的活性来达到降血压的作用,因此也称为血管紧张素转换酶抑制肽（ACEI）。以茶树菇为原料,采用溶剂提取法提取茶树菇中的降血压活性肽,以蛋白质提取率（D）和提取液对ACE活性抑制率（IP）为指标,考察了以水和50%乙醇为提取溶剂的提取效果。实验结果显示茶树菇水提液的提取率为85.78%,抑制率为48.43%,50%乙醇提取液的提取率为41.48%,抑制率为49.16%,综合考虑选择水作为提取溶剂,并优化了水提法的提取工艺,确定了提取的适宜工艺条件为:提取温度30℃,最适pH为8,提取时间9h,此时蛋白质提取率（D）可达到88.3%,对ACE的抑制率（IP）为49.3%。使用活性炭对提取液脱色,采用单因素实验法,考察了活性炭用量、脱色温度、溶液pH值、脱色时间对脱色率（Dc）和活性损失率（LP）的影响,实验结果表明,在加入0.5%活性碳、脱色温度40℃、溶液pH3.5的条件下脱色40min,脱色效果较好,脱色率（Dc）可达到78.86%,活性损失率（LP）为15.68%,对ACE的抑制率（IP）为41.57%。实验使用10kDa超滤膜对脱色液进行超滤富集活性成分,收集滤液,进行层析分离,考察了Sephadex G-25凝胶、Sephadex G-15凝胶的分离效果。选用Sephadex G-15凝胶为层析材料,以水为洗脱溶剂,洗脱速度为1.0mL·min-1,上样量为3mL时,可收集到3种组分,活性肽回收率（RP）可达91.1%,其中洗脱Ⅲ峰有较高的ACE抑制效果,抑制率（IP）为46.4%,Ⅲ峰活性肽回收率（RP）为25.6%。选用Ⅲ洗脱峰为原料,采用RP-HPLC反相制备色谱分离,可以得到4种组分,经活性检测,ACE抑制活性最强组分位于Ⅲ-d（1）组分,纯度可达95%以上,其IC50为0.0109 mg·mL-1。
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摘要ABSTRACT目录符号说明第一章 绪论1.1 高血压概述1.1.1 高血压1.1.2 常用降压药物及不良反应1.2 降血压肽概述1.2.1 ACE与高血压的关系1.2.2 降血压肽的研究现状1.2.3 ACE抑制肽抑制率的检测1.2.4 ACE抑制肽的分离1.3 茶树菇概述1.3.1 茶树菇1.3.2 茶树菇的营养价值1.3.3 茶树菇的保健作用1.3.4 食用真菌类降血压肽的研究现状1.4 本课题的研究意义及主要内容1.4.1 研究意义及目的1.4.2 本课题研究内容第二章 ACE活性抑制测定方法的建立2.1 实验药品及仪器2.1.1 实验药品2.1.2 主要仪器2.2 实验方法2.2.1 溶液的配置2.2.2 马尿酸标准曲线制作2.2.3 活性反应液的制备与检测2.2.4 加样回收实验2.2.5 CAPTOPRIL半抑制浓度测定2.3 结果与讨论2.3.1 检测波长选择2.3.2 马尿酸量与峰值关系2.3.3 精密度与重复性试验2.3.4 加样回收率实验50的测定'>2.3.5 卡托普利IC50的测定2.4 小结第三章 茶树菇降血压活性肽提取工艺研究3.1 实验药品及仪器3.1.1 原料及药品3.1.2 主要仪器3.2 实验方法3.2.1 茶树菇主要成分分析3.2.2 茶树菇降血压活性肽提取溶剂的选择3.2.3 茶树菇降血压活性肽的提取工艺优化3.3 结果与讨论3.3.1 茶树菇主要成分分析3.3.2 茶树菇降血压活性肽提取溶剂的选择3.3.3 茶树菇降血压活性肽的提取工艺优化3.4 小结第四章 茶树菇降血压活性肽的初步分离纯化4.1 实验药品及仪器4.1.1 材料及药品4.1.2 主要设备4.2 实验方法4.2.1 检测波长的确定4.2.2 蛋白质浓度标准曲线制作4.2.3 茶树菇水提液的脱色4.2.4 茶树菇降血压活性肽的超滤4.2.5 凝胶层析纯化茶树菇降血压活性肽4.3 结果与讨论4.3.1 检测波长的确定4.3.2 蛋白质浓度标准曲线的制作4.3.3 茶树菇水提液的脱色4.3.4 凝胶层析纯化茶树菇降血压肽4.4 小结第五章 制备色谱分离茶树菇降血压肽的工艺研究5.1 实验药品及仪器5.1.1 实验材料和药品5.1.2 主要设备5.2 实验方法5.2.1 实验色谱条件5.2.2 各组分活性检测5.3 结果与讨论5.3.1 分离结果5.3.2 纯度检验结果5.4 小结第六章 结论与展望6.1 主要结论6.2 展望参考文献致谢攻读学位期间发表论文情况
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