前列腺素E合成酶基因在大鼠围着床期子宫中的表达与调节

论文摘要

前列腺素E2（PGE2）在哺乳动物的生殖过程中发挥着重要的作用。PGE2 是由前列腺素E 合成酶（PGES）将环氧合酶（COX）催化下生成的PGH2 转化形成的。有三种类型的PGES,即膜相关的GSH 依赖型的PGES（mPGES-1）、膜相关的GSH 非依赖型的PGES（mPGES-2）和胞质型的GSH 依赖型（cPGES）。mPGES-1 是一种诱导型的近核酶,与COX-2 相偶联,启动延迟的PGE2 合成。mPGES-2 在多种组织中呈组成型表达,能够与COX-1 和COX-2 偶联。cPGES 是一种组成型酶,与COX-1 相偶联,参与瞬时的PGE2 合成,与维持细胞内稳态有关。虽然,PGES 在小鼠和牛子宫中的表达与调节已进行了研究,但PGES 在大鼠胚胎着床和蜕膜化过程中的表达与调节尚未见报道。本实验利用原位杂交和免疫组化方法,检测了早期妊娠、假孕、延迟着床、人工诱导蜕膜化以及抑制剂处理等条件对大鼠子宫中mPGES-1表达的调节。此外,也检测了cPGES 和mPGES-2 蛋白在大鼠早期妊娠子宫中的表达。在妊娠1-5 天,没有检测到mPGES-1 mRNA 和蛋白的表达。在妊娠第6 天,mPGES-1 mRNA 和蛋白在着床胚胎周围的腔上皮下基质细胞中强表达,在非着床位点中没有检测到其表达。在妊娠第7-9 天的初级蜕膜区中都有表达。在假孕大鼠子宫中,没有检测到mPGES-1 mRNA和蛋白的表达。在延迟着床子宫中,没有检测到mPGES-1 mRNA 和蛋白的表达。在延迟着床激活36 小时的子宫中,mPGES-1 mRNA 和蛋白的表达与妊娠第6 天的情况相似。在人工诱导蜕膜化的子宫中,mPGES-1 在系膜对侧的蜕膜细胞中强表达,而在对照组的子宫中,没有检测到mPGES-1 mRNA 和蛋白的表达。孕酮的拮抗剂RU486 和雌激素的抑制剂ICI 182,780 均能够明显抑制mPGES-1 蛋白在着床位点的表达。在妊娠第1-5 天,没有检测到cPGES 蛋白的表达。妊娠第6 天时,cPGES 在腔上皮和胚泡周围的近腔基质中较强表达。mPGES-2 蛋白在妊娠第1-6 天的子宫腔上皮和腺上皮有表达,在第6 天的腔上皮下基质中表达较弱。cPGES 和mPGES-2 蛋白在妊娠第7-9 天的蜕膜细胞中均有表达。总之,mPGES-1、mPGES-2 和cPGES 在大鼠子宫着床点和蜕膜中特异性表达,说明PGES可能在大鼠的胚胎着床和蜕膜化过程中发挥着重要作用。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 1. 引言
• 1.1 前列腺素E 合成酶（PGES）的生物学特性
• 1.1.1 膜相关GSH 依赖的PGES（m PGES-1）
• 1.1.2 细胞质型GSH 依赖型PGES（cPGES）
• 1.1.3 膜相关的GSH 非依赖型的PGES（mPGES-2）
• 1.2 PGE2 在哺乳动物生殖中的作用
• 1.2.1 PGE2 与排卵
• 1.2.2 PGE2 与黄体功能
• 1.2.3 PGE2 与胚胎着床及子宫蜕膜化
• 1.2.4 PGE2 与分娩
• 1.3 本研究的目的和意义
• 2. 材料与方法
• 2.1 实验动物
• 2.2 动物模型
• 2.2.1 早期妊娠
• 2.2.2 假孕
• 2.2.3 延迟着床和激活
• 2.2.4 人工诱导蜕膜化
• 2.2.5 激素处理
• 2.2.6 抑制剂处理
• 2.3 免疫组织化学
• 2.3.1 石蜡切片的制备
• 2.3.2 免疫组织化学流程
• 2.4 原位杂交
• 2.4.1 小鼠mPGES-1 探针的制备
• 2.4.2 冰冻切片的制备
• 2.4.3 原位杂交试剂配方
• 2.4.4 原位杂交流程
• 3. 实验结果
• 3.1 mPGES-1 在大鼠早期妊娠子宫中的表达
• 3.2 mPGES-1 在假孕大鼠子宫中的表达
• 3.3 mPGES-1 在大鼠延迟着床及激活子宫中的表达
• 3.4 mPGES-1 在人工蜕膜化大鼠子宫中的表达
• 3.5 类固醇激素对大鼠子宫中mPGES-1 表达的影响
• 3.6 抑制剂对 mPGES-1 在大鼠着床位点表达的影响
• 3.7 cPGES 蛋白在大鼠早期妊娠子宫中的表达
• 3.8 mPGES-2 蛋白在大鼠早期妊娠子宫中的表达
• 4. 讨论
• 4.1 mPGES-1 与大鼠胚胎着床
• 4.2 mPGES-1 与蜕膜化
• 4.3 cPGES 与大鼠胚胎着床及蜕膜化
• 4.4 mPGES-2 与大鼠胚胎着床及蜕膜化
• 5. 结论
• 参考文献
• 攻读硕士学位期间发表的学术论文
• 致谢