葛根地上茎提取物抗骨质疏松作用研究

论文摘要

目的:采用现代研究方法和技术,分析葛根地上茎提取物中的有效成分及其含量,建立相关的质量标准,比较优化了提取物的制备工艺,明确葛根地上茎提取物在预防和治疗骨质疏松(osteoporosis)方面所发挥的药效学作用和部分机制。方法:采用薄层色谱和高效液相色谱法对葛根地上茎原药材中总黄酮和葛根素含量进行测定,通过正交实验提出并确定葛根地上茎提取物的优化工艺条件,建立相关质量标准。在化学成分明确并稳定的前提下,筛选实验大鼠分别进行葛根地上茎提取物对地塞米松大鼠骨质疏松的保护作用和对去卵巢大鼠骨质疏松保护作用的实验。wistar大鼠,按照体重随机分为空白组、模型组、仙灵骨葆胶囊阳性对照组和葛根地上茎提取物高、中、低剂量组,灌胃给药。给药6个月后,测定大鼠股骨力学性能、骨钙磷含量、血清雌激素水平等指标。结果:连续给药六个月后,分别观察各组大鼠所考察指标,葛根地上茎提取物明显改善造模大鼠一般状况,增加模型大鼠体重,提高子宫和卵巢系数。三个给药组均明显提高骨组织抗外力作用,明显提高股骨抗外力性能。采集各组大鼠一侧股骨干重和灰重,计算湿重、干重、灰重和体积的比值,提示不同给药组不同程度改善造模引起的骨质疏松表现,三个剂量组均具有显著性统计学差异(P<0.01)。葛根地上茎提取物对大鼠血清钙磷含量影响不明显,模型组钙磷含量也与对照组比较无显著性差异,提示造模对血清钙磷含量无明显影响。但葛根地上茎提取物明显降低模型大鼠血清碱性磷酸酶。实验还证实葛根地上茎提取物不同程度提高模型大鼠的雌二醇浓度。明显增加骨骼中钙磷含量。同时发现对氯离子作用亦存在明显的干预。病理诊断提示葛根地上茎提取物不同程度改善骨质疏松模型骨组织病理性改变,增加骨小梁数目。结论:多角度不同层次的考察葛根地上茎提取物对地塞米松骨质疏松模型的治疗作用,结果提示葛根地上茎提取物具有明显的改善骨质疏松作用。

论文目录

• 提要
• Abstract
• 引言
• 第一部分 葛根地上茎饮片的的质量研究
• 1 葛根地上茎饮片的标准
• 1.1 仪器与试样
• 1.1.1 仪器
• 1.1.2 试剂与药材
• 1.2 葛根地上茎性状鉴别研究
• 1.3 葛根地上茎薄层色谱鉴别研究
• 1.3.1 实验方法
• 1.4 水分及总灰分含量检查
• 1.4.1 实验方法与结果
• 2 葛根地上茎总黄酮及葛根素含量测定
• 2.1 溶液的制备
• 2.2 紫外法测定总黄酮含量
• 2.3 HPLC 测定葛根素含量
• 2.4 结果与分析
• 第二部分 葛根地上茎提取物的制备和纯化工艺的建立
• 1 葛根地上茎提取物的制备
• 1.1 仪器与药材
• 1.1.1 仪器
• 1.1.2 药材
• 1.1.3 对照品及试剂
• 1.2 方法与结果
• 1.2.1 正交试验设计
• 1.2.2 测定样品的制备
• 1.2.3 供试品溶液的配制
• 1.2.4 总黄酮和葛根素的含量测定
• 2 提取物纯化工艺的建立
• 2.1 方法分析
• 2.2 方法与结果
• 2.2.1 野葛根地上茎提取物总黄酮和葛根素含量测定
• 2.2.2 树脂的预处理
• 2.2.3 静态吸附性能考察
• 2.2.4 洗脱剂浓度的选择
• 2.2.5 动态吸附性能考察
• 2.2.6 洗脱用乙醇的体积确定
• 2.3 总结
• 第三部分 葛根地上茎提取物的质量控制
• 1 葛根地上茎提取物指纹图谱的建立
• 1.1 仪器与试药
• 1.2 材料
• 1.3 实验方法与结果
• 1.3.1 色谱条件
• 1.3.2 溶液的制备
• 1.3.3 方法学考察
• 1.3.4 指纹图谱及技术参数
• 1.3.5 共有峰的指定
• 1.4 讨论
• 2 葛根地上茎药效部位及成分的检测
• 2.1 实验方法与结果
• 2.1.1 溶液的制备
• 2.1.2 异黄酮成分的含量测定
• 2.1.3 葛根素、大豆苷含量测定
• 2.1.4 精密度、稳定性、重复性、加样回收试验
• 2.1.5 葛根地上茎提取物含量测定
• 2.2 讨论
• 第四部分 葛根地上茎提取物急性毒性试验
• 1 实验依据
• 2 实验材料
• 2.1 样品
• 2.2 动物
• 2.3 环境
• 2.4 饲料
• 2.5 仪器
• 3 方法与结果
• 4 结论
• 第五部分 葛根地上茎提取物抗骨质疏松药效作用研究
• 1 对地塞米松大鼠骨质疏松模型的作用
• 1.1 材料
• 1.1.1 药物
• 1.1.2 动物
• 1.1.3 环境、饲料
• 1.1.4 仪器
• 1.1.5 试剂
• 1.2 方法
• 1.2.1 分组与给药
• 1.2.2 造模
• 1.2.3 测定指标
• 1.2.4 数据分析
• 1.3 结果
• 1.3.1 葛根地上茎提取物对地塞米松模型大鼠体重及脏器系数的影响
• 1.3.2 葛根地上茎提取物对地塞米松模型大鼠骨生物力学的影响
• 1.3.3 葛根地上茎提取物对地塞米松模型大鼠骨质量、体积比值的影响
• 1.3.4 葛根地上茎提取物对地塞米松模型大鼠血清 Ca、P 含量和碱性磷酸酶的影响
• 1.3.5 葛根地上茎提取物对地塞米松模型大鼠血清 E2、骨钙素（BGP），降钙素（CT）的影响
• 1.3.6 葛根地上茎提取物对地塞米松模型大鼠骨组织钙、磷、氯含量的影响
• 1.3.7 葛根地上茎提取物对地塞米松模型大鼠骨组织病理学的影响
• 1.4 结果
• 2 葛根地上茎提取物对去卵巢大鼠骨质疏松疏松的保护作用
• 2.1 材料
• 2.1.1 药物
• 2.1.2 动物
• 2.1.3 环境、饲料
• 2.1.4 仪器
• 2.1.5 试剂
• 2.2 方法
• 2.2.1 造模
• 2.2.2 分组与给药
• 2.2.3 测定指标
• 2.2.4 数据分析
• 2.3 结果
• 2.3.1 葛根地上茎提取物对去卵巢大鼠体重及脏器系数的影响
• 2.3.2 葛根地上茎提取物对去卵巢大鼠骨生物力学的影响
• 2.3.3 葛根地上茎提取物对去卵巢大鼠骨质量、体积比值的影响
• 2.3.4 葛根地上茎提取物对去卵巢大鼠血清 Ca、P 含量和碱性磷酸酶的影响
• 2、骨钙素（BGP）的影响'>2.3.5 葛根地上茎提取物对去卵巢大鼠血清 E₂、骨钙素（BGP）的影响
• 2.3.6 葛根地上茎提取物对去卵巢大鼠骨组织钙、磷、氯含量的影响
• 2.3.7 葛根地上茎提取物对去卵巢大鼠骨组织病理学的影响
• 3 讨论
• 结语
• 参考文献
• 附录
• 1 葛根地上茎药材的采集
• 2 地塞米松致骨质疏松模型大鼠病理照片
• 3 去卵巢致骨质疏松模型大鼠病理照片
• 致谢
• 参与发表文章目录
• 附件
• 详细摘要