论文摘要
目的:研究胰腺癌细胞Panc-1中胆囊收缩素-A受体的表达,探讨胆囊收缩素及其A受体拮抗剂在胰腺癌细胞体外生长侵袭中的作用及其可能机制。方法:①体外培养胰腺癌细胞Panc-1,RT-PCR法检测胰腺癌细胞Panc-1表面胆囊收缩素-A受体的表达情况。②不同浓度的胆囊收缩素-A受体激动剂CCK-8S及受体拮抗剂Lorglumide分别与人胰腺癌细胞Panc-1共同培养相应时间,MTT法观察细胞生长情况,流式细胞仪FCM检测细胞周期改变,TUNEL法观察凋亡发生并计算凋亡率,细胞免疫组化检测半胱天冬蛋白酶-3（Caspase-3）的表达变化。③侵袭实验观察细胞侵袭能力变化,Western Blot法及细胞免疫组化法观察Pane-1细胞基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的表达变化情况。结果:①Panc-1细胞表面检测到胆囊收缩素-A受体表达。②CCK-8S作用下Panc-1细胞增殖明显,在一定范围内呈时间、剂量依赖性,表现为S期细胞增多,凋亡发生少,Caspase-3蛋白表达量很低,而Lorglumide则抑制Panc-1细胞生长,该组细胞被阻滞于G1期,凋亡发生增多,凋亡率上升,Caspase-3蛋白表达量明显增加。③CCK-8S作用下Pane-1细胞的透膜侵袭能力增强,在一定范围内呈剂量依赖性,同时促进MMP-2的表达而Lorglumide则作用相反。结论:胰腺癌细胞Panc-1表面存在胆囊收缩素-A受体,依托“胆囊收缩素—胆囊收缩素-A受体”这一受体途径,CCK-8S通过下调Caspase-3,上调MMP-2促进细胞体外生长侵袭,而Lorglumide则抑制这一信号转导效应,上调Caspase-3,下调MMP-2。
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