利用GISH和SRAP分子标记技术鉴定20个百合杂交F1的代亲本类型

论文摘要

百合是百合科百合属多年生草本植物,是世界上著名的切花之一。百合属植物一般为二倍体（2n=2x=24）,都是由2对中部着丝点染色体和10对近端部（或端部）着丝点染色体组成。虽然我国是世界百合的分布中心,拥有大量的百合野生种,因人为和自然的原因我国百合资源遭到严重破坏,其多样性逐年降低。而且,由于我国在百合育种方面非常薄弱,国内商业性栽培种球主要依赖于进口。因此,充分利用资源优势,加速新品种选育是我国百合产业工作的重点。杂交育种可以整合二个亲本的优良特性,提高花卉的生长势、抗逆性等,是创造百合新型种质、培育商业品种的重要手段。百合杂交育种主要存在两个问题,一是育种周期长,从种子播种到开花要经历3-4年时间。二是百合杂交育种普遍存在不亲和性的问题,不仅受精困难,而且受精后很难获得种子,这是百合杂交育种主要的限制因子之一。正确选择亲本并予以合理组配是杂交育种成败的关键。本文的鉴定材料20个杂交F,代的性状优良,遗传背景为亚洲百合杂种系、东方百合杂种系和麝香百合杂种系的杂交后代,利用基因组原位杂交技术和SRAP分子标记技术分别对只能来源于亚洲百合杂种系（A基因组）、东方百合杂种系（O基因组）、麝香百合杂种系（L基因组）、但亲本类型未知的20个百合杂种F1代株系进行亲本类型的判断。得到的结果如下：（1）百合最适生根培养基为1／2MS+NAA0.2mg／L,最适蔗糖浓度为30g／L,在这种情况下百合生根良好,根尖壮且数量多,适合进行原位杂交。（2）基因组原位杂交结果显示：A、O、L三个基因组是可以区分开来的；20个杂种F1代全部为二倍体,其中有14个F1代株系只具有A基因组,说明它们的亲本类型均为亚洲百合杂种系；有6个F1代株系只具有L基因组,说明它们的亲本类型均为麝香百合杂种系,这20个杂种株系全部来自种内杂交。待测株系中没有东方百合杂种系的后代。（3）SRAP分子标记结果显示筛选出的16个引物组合共产生727个扩增带,其中多态性带76个。平均每个引物组合产生45个扩增带,包括5个多态性带。每对引物组合产生多态性带的比例为11.1%,表明20份品种遗传背景具有一定的差异性。根据SRAP带型整理汇总得到的分子聚类分析结果为20个杂种F1代中有14个F1代株系亲本来自亚洲百合杂种系,6个F1代株系亲本来自麝香百合杂种系,没有来自东方百合杂种系的后代。（4）研究在百合组织培养的基础上,利用基因组原位杂交技术和SRAP分子标记技术,从染色体水平上和分子标记角度对百合品种进行亲本类型的鉴定。基因组原位杂交技术和SRAP分子标记技术两种检测方法的侧重点不同,同时使用这二种检测方法可以提高鉴定结果的准确性,为以后培育优良百合材料选择杂交亲本提供了依据。

论文目录

• 摘要
• Abstract
• 第一章 文献综述
• 1.1 百合概况
• 1.1.1 百合的植物学特征和生长习性
• 1.1.2 百合的种类与分布
• 1.1.3 百合的分类
• 1.1.4 百合的繁殖
• 1.1.5 百合的栽培
• 1.2 百合的组织培养
• 1.2.1 组织培养的发展
• 1.2.2 百合组织培养形成再生植株的途径
• 1.3 基因组原位杂交及其研究进展
• 1.3.1 基因组原位杂交的发展及原理
• 1.3.2 基因组原位杂交的应用
• 1.4 SRAP分子标记及其研究进展
• 1.4.1 SRAP分子标记的发展
• 1.4.2 SRAP分子标记的原理
• 1.4.3 SRAP技术的特点
• 1.4.4 SRAP分子标记的应用
• 第二章 引言
• 第三章 百合组织培养中的生根培养和移栽的研究
• 3.1 材料
• 3.2 试验方法
• 3.2.1 培养基的配制
• 3.2.2 培养条件
• 3.2.3 不同无机盐离子浓度对百合生根的影响
• 3.2.4 激素浓度的选择
• 3.2.5 蔗糖浓度的选择
• 3.2.6 百合试管苗的移栽
• 3.3 结果和分析
• 3.3.1 不同无机盐离子浓度对百合生根的影响
• 3.3.2 NAA对百合生根的影响
• 3.3.3 蔗糖浓度对生根的影响
• 3.3.4 百合移栽成活率及生长情况
• 3.4 讨论
• 第四章 应用GISH区分亚洲百合杂种系、东方百合杂种系和麝香百合杂种系
• 4.1.材料和方法
• 4.2 结果与分析
• 4.3 讨论
• 第五章 应用GISH鉴定百合杂交F1代的亲本类型
• 5.1 材料和方法
• 5.2 结果与分析
• 5.3.讨论
• 第六章 应用SRAP分子标记技术对百合杂交后代亲本类型的鉴定
• 6.1 材料和方法
• 6.1.1 材料
• 6.1.2 方法
• 6.2 结果与分析
• 6.3 讨论
• 第七章 结论
• 7.1 百合组织培养中生根和移栽的研究
• 7.2 基因组原位杂交技术区分亚洲百合杂种系、东方百合杂种系和麝香百合杂种系
• 7.3 基因组原位杂交技术对百合杂交后代亲本类型的鉴定
• 7.4 应用SRAP分子标记技术对百合杂交后代亲本类型的鉴定
• 参考文献
• 缩略语表
• 致谢
• 攻读硕士期间发表文章