HO-CO系统在血液系统疾病中的表达及其对造血调控的作用

论文摘要

[目的]检测血液系统疾病（缺铁性/巨幼红细胞性贫血、再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征和急性非淋巴细胞白血病）患者骨髓单个核细胞血红素加氧酶（HO）的表达,分析其在疾病发病中的意义。进一步探讨HO-CO系统与Ras-MAPK、JAK-STAT信号转导途径分子表达的关系,[方法]以IDA/MA、AA、ANLL患者各20例、MDS患者30例、健康人10例为研究对象,抽吸法采集骨髓（1）半定量RT-PCR法检测患者骨髓单个核细胞HO-1、STAT5、Raf-1 mRNA的表达。（2）无菌条件下培养MDS-RAEB患者骨髓单个核细胞,将HO-1诱导剂氯化高铁血红素（Hemin）,依照1μmol/L、5μmol/L、10μmol/L的浓度分别加入RPMI-1640培养体系,半定量RT-PCR法检测各组HO-1、STAT5、Raf-1 mRNA的表达,ELISA方法检测各组培养液上清VEGF、IL-1β、TNF-α表达水平。（3）计量数据以均数±标准差（（?）±S）的形式表示。各基因mRNA表达水平用目的基因和β-actin两电泳带光密度的比值描述。统计软件使用spss 11.5软件包中的单因素方差分析、Newman-Keuls检验、Spearman等级相关检验,检验水准α=0.05。[结果]（1）①IDA/MA患者骨髓单个核细胞HO-1 mRNA表达水平（0.86±0.11）明显高于对照组（0.57±0.15）（P＜0.05）;STAT5 mRNA表达水平（1.07±0.41）明显高于对照组（0.79±0.32）（P＜0.05）:Raf-1 mRNA表达水平（0.58±0.17）明显高于对照组（0.35±0.09）（P＜0.05）。②AA患者骨髓骨髓单个核细胞HO-1 mRNA表达水平（0.36±0.12）明显低于对照组（0.57±0.15）（P＜0.01）;STAT5 mRNA表达水平（0.53±0.30）明显低于对照组（0.79±0.32）（P＜0.05）:Raf-1 mRNA表达水平（0.19±0.16）明显低于对照组（0.35±0.09）（P＜0.05）。③MDS患者骨髓单个核细胞HO-1 mRNA表达（1.24±0.42）明显高于对照组（0.57±0.15）（P＜0.01）:STAT5 mRNA表达水平（1.46±0.18）明显高于对照组（0.79±0.32）（P＜0.05）;Raf-1 mRNA表达水平（0.77±0.08）明显高于对照组（0.35±0.09）（P＜0.05）。④ANLL患者骨髓骨髓单个核细胞HO-1mRNA表达水平（1.04±0.38）明显高于对照组（0.57±0.15）（P＜0.05）:STAT5mRNA表达水平（1.72±0.57）明显高于对照组（0.79±0.32）（P＜0.01）;Raf-1mRNA表达水平（1.13±0.23）明显高于对照组（0.35±0.09）（P＜0.01）。⑤HO-1mRNA的表达和Raf-1、STAT5 mRNA的表达呈正相关（Raf-1 rs=0.334,P＜0.01;STAT5 rs=0.287,P＜0.05）。（2）MDS-RAEB患者骨髓体外加入Hemin孵育后,单个核细胞HO-1表达水平均高于未给药组（P＜0.05）,HO-1 mRNA表达水平和Hemin浓度呈正相关（rs=0.763,P＜0.02）,Raf-1 mRNA的表达水平均低于未给药组,与HO-1的表达水平呈负相关（rs=0.371,P＜0.05）,STAT5 mRNA的表达水平加或不加Hemin,两组无显著差异（P＞0.05）,VEGF、IL-1β、TNF-α表达水平均低于未给药组,呈Hemin浓度依赖性下降,各因子表达水平分别与HO-1的表达水平呈负相关（VEGF rs=0.447,P＜0.02;IL-1βrs=0.382,P＜0.05:TNF-αrs=0.459,P＜0.02）。与未给药组相比,Hemin浓度10μmol/L组VEGF的表达水平下降56.8%,IL-1β的表达水平下降43.7%,TNF-α的表达水平下降48.4%。[结论]（1）缺铁性/巨幼红细胞性贫血、再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征和急性非淋巴细胞白血病发病过程中均存在HO表达异常,HO可能在造血调控过程中发挥作用;缺铁性/巨幼红细胞性贫血、再生障碍性贫血、骨髓增生异常综合征和急性非淋巴细胞白血病Raf-1、STAT5 mRNA的表达异常提示发病过程中存在Ras-ERK和JAK-STAT信号传导通路异常,并且与HO的表达存在关联。（2）在MDS-RAEB患者中,通过对HO-1的激活,观察到HO-CO途径与Ras-ERK信号传导途径分子的表达有交互影响,起到造血调控作用;并可调节骨髓细胞相关炎性因子VEGF、IL-1β、TNF-α的表达,从而可能影响到患者骨髓微环境。

论文目录

• 摘要
• 英文摘要
• 符号说明
• 前言
• 材料和方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 附表
• 附图
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表学术论文
• 学位论文评阅及答辩情况表