有氧运动对EPCs诱导大鼠心肌微血管新生能力的影响

论文摘要

目的：研究有氧运动对EPCs诱导大鼠心肌微血管新生能力的影响。方法：健康两月龄雄性SD大鼠20只,按体重随机分为两组,即空白对照组和有氧运动组。采用递增负荷跑台训练建立有氧运动模型,每周训练6天,为期8周。方案结束后12h提取大鼠外周血和骨髓,运用密度梯度离心法分离得到单个核细胞,以EGM-2培养诱导其分化获取内皮祖细胞,通过双荧光染色法观察细胞对乙酰化低密度脂蛋白的摄取和与荆豆凝集素1的结合,并结合形态学特征鉴定内皮祖细胞,倒置显微镜下计数贴壁细胞数量以反映细胞增殖情况和黏附能力；制备心室肌标本,采用免疫组织化学方法检测CD34阳性细胞以定位心肌组织微血管,免疫组织化学方法检测微血管上AC133阳性蛋白表达,显微图像分析系统对CD34和AC133阳性表达定量分析,流式细胞术检测外周血单个核细胞CD34+、CD34+/Flk-1+细胞比例。结果：（1）CD34较好地标记了心肌组织微血管,对照组大鼠心肌组织微血管内皮上有微弱的AC133蛋白表达,有氧运动组大鼠心肌组织微血管内皮上有较多的CD34（P<0.05）和AC133蛋白表达（P<0.01）；（2）外周血单个核细胞中CD34+细胞比例有氧运动组高于对照组（P<0.01）,CD34+/F1k-1+细胞所占比例两组相比无差异,即无统计学意义（P>0.05）；（3）细胞双荧光染色呈双阳性,表明所培养的贴壁细胞为内皮祖细胞；（4）无论是第48小时还是第7天,有氧运动组外周血和骨髓来源的内皮祖细胞数量较对照组都更多（P<0.05）；（5）随着培养时间延长（7天内）,对照组的外周血和骨髓来源贴壁细胞数量都发生了增殖（P<0.01）,同样增殖的还有有氧运动组的外周血源贴壁细胞（P<0.05）和有氧运动组的骨髓来源贴壁细胞（P<0.01）；（6）第10天的黏附能力检测结果显示,有氧运动组较对照组贴壁细胞数量明显增加（P<0.01）。结论：（1）持续8周的递增负荷有氧运动能促进SD大鼠心肌微血管的新生,这种血管新生有内皮祖细胞的参与；（2）持续8周的递增负荷有氧运动使大鼠外周血中干细胞增多,同时促进了内皮祖细胞的增殖与黏附；（3）持续8周的递增负荷有氧运动使大鼠骨髓中内皮祖细胞的动员、增殖与黏附能力增强；（4）有氧运动促进大鼠心肌微血管新生的机制可能是有氧运动促进了大鼠骨髓中内皮祖细胞的动员和增殖,从而释放入血,使循环中内皮祖细胞数量增多、粘附能力增强,并归巢于大鼠心肌微血管壁后,参与诱导微血管的新生。

论文目录

• 中文摘要
• 英文摘要
• 1 前言
• 2 材料与方法
• 2.1 动物及分组
• 2.2 实验方案
• 2.3 仪器与试剂
• 2.4 实验取材
• 2.5 观察指标及其方法
• 2.6 统计分析
• 3 结果
• 3.1 心肌组织CD34、AC133免疫组织化学染色和显微图像分析
• +、CD34⁺/Flk-1⁺细胞百分率'>3.2 外周血MNCs中CD34⁺、CD34⁺/Flk-1⁺细胞百分率
• 3.3 细胞双荧光染色鉴定
• 3.4 细胞形态学观察
• 3.5 EPCs增殖能力检测
• 3.6 EPCs黏附能力检测
• 4 分析与讨论
• 4.1 EPCs与大鼠心肌微血管新生的关系
• 4.2 有氧运动对大鼠心肌微血管新生的影响
• 4.3 有氧运动对大鼠骨髓和外周血EPCs增殖与黏附的影响
• 5 结论
• 参考文献
• 综述
• 缩略词表
• 科研情况
• 致谢