维持性血液透析患者血清诱导人脐静脉血管内皮细胞功能紊乱的研究

论文摘要

目的：慢性肾功能衰竭维持性血液透析患者缺血性心脏病的患病率远远高于正常人，但其主要的致病机制尚不清楚。细胞间黏附因子-1（ICAM-1）的高表达和一氧化氮合成酶（eNOs）的低表达是血管内皮细胞功能紊乱的标志，并且与缺血性心脏病存在一定的联系。本实验观察维持性血液透析患者血清诱导体外培养人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）ICAM-1和eNOs的异常表达，进一步探讨维持性血液透析患者血清导致内皮细胞功能紊乱的机制。方法：采用体外培养，MTT法检测维持性血液透析患者血清对细胞相对活力的影响。HUVEC随机分为三组：胎牛血清（FCS）组（A组）：FCS培养1小时，3小时，6小时和12小时；正常人血清组（B组）：加入含有10％正常人血清1640培养液分别培养1小时，3小时，6小时和12小时；维持性血液透析患者血清组（C组）：加入含有10％维持性血液透析患者血清1640培养液分别培养1小时，3小时，6小时和12小时。用免疫细胞化学方法检测ICAM-1和eNOs的表达情况。结果：1．A组、B组和C组血清对HUVEC的细胞相对活力（MTT的OD值）的影响不同。维持性血液透析患者血清刺激HUVEC 18小时，24小时后，细胞生长出现抑制（与A组比较P＜0.05），抑制率分别为24.92％，43.68％。A组、B组和C组血清与HUVEC共孵育12小时，对细胞生长与增殖均无影响（与对照组比较P＞0.05）。2．C组与A组和B组比较ICAM-1表达在患者血清刺激1小时后增加（P＜0.05），在刺激3小时，6小时和12小时后ICAM-1表达进一步增加（P＜0.01）。而B组与A组在相同的刺激时间内ICAM-1的表达无统计学差异（P＞0.05）。C组在不同的刺激时间ICAM-1的表达存在差异（P＜0.05），而B组与A组在不同的刺激时间ICAM-1的表达无统计学差异（P＞0.05）。3．C组与A组和B组比较eNOs表达在患者血清刺激3小时后明显减少（P＜0.05），在刺激6小时和12小时后eNOs表达进一步减少（P＜0.01）。而B组与A组在相同的刺激时间eNOs表达的差异无统计学意义（P＞0.05）。C组在不同时间eNOs表达存在差异（P＜0.05），而B组与A组在不同的刺激时间eNOs表达的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：1．慢性肾功能衰竭维持性血液透析患者血清可促进体外培养HUVCEICAM-1表达，从而导致内皮功能失调，随患者血清刺激时间延长ICAM-1表达的量有明显增加的趋势。2．维持性血液透析患者血清可抑制体外培养HUVCE eNOS表达，随患者血清刺激时间延长eNOS表达的量有明显减少的趋势。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 缩略语表
• 前言
• 第一部分---人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）的培养与鉴定材料与方法
• 材料与方法
• 结果
• 第二部分---检测维持性血液透析患者血清对细胞相对活力的影响
• 实验材料
• 结果
• 第三部分---维持性血液透析患者血清诱导人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）细胞间黏附因子-1（ICAM-1）表达的研究
• 实验材料
• 结果
• 第四部分---维持性血液透析患者血清抑制人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）—氧化氮合成酶（eNOs）表达的研究
• 实验材料
• 结果
• 讨论
• 一、立题依据与模型的建立
• 二、尿毒症血透患者血清中可能导致内皮细胞功能紊乱的物质
• 三、ICAM-1 与 eNOS 表达异常导致动脉粥样硬化的机制
• 四、总结与展望
• 结论
• 参考文献
• 发表论文和参加科研情况说明
• 致谢