λDNA导入中国春后代变异体的遗传分析

论文摘要

以中国春及入DNA导入中国春后产生的变异体为研究对象,对其形态性状、染色体、茎秆组织解剖、蛋白质和DNA上的差异进行了分析,获得如下结果:1.λDNA导入中国春后D1代未出现明显形态性状变异,D2代在株高、 茎秆硬度、穗长、穗粒数、抗倒性等方面出现了变异,变异率为31.67%。2.对导入λDNA的中国春D1、D2代进行细胞学观察,观察到了单价体、 染色体落后、染色体桥、微核和细胞多极分裂等异常现象。变异率为 D1代为25.54%,D2代为24.05%。3.对变异体D234、D237和受体的茎秆组织结构解剖结比较,变异体在机 械组织细胞层数、机械组织的细胞壁厚度、微管束大小以及单茎微管 束数量等方面均较受体产生较大差异,统计分析表明差异达到极显著 水平。4.分析1O个变异体均较受体过氧化物酶带数量减少,表达活性存在差异。 其中D234、D237、D245较受体新增Rf为0.294的带,表达活性较强; 在D217、D204中Rf为0.069的带,活性减弱,而在其他变异体Rf为 0.069的带,活性增强;其他酶带其活性均较受体减弱。5.对受体和17个变异体进行了高分子量谷蛋白亚基分析,结果显示变异 体中出现了1,2’,7+9,13,13+16,8,12等新亚基类型。其中在 Glu-1A位点与受体相同变异体11个,不同的6个,出现了1、2’亚基; 在Glu-1B位点与受体相同的变异体10个,不同的7个,出现了7+9、 13+16、13、8亚基;在Glu-1D位点与受体相同的变异体15个,不同 的2个,出现了缺少2亚基。6.用47对SSR引物对1 8个株行内35个变异体分析,结果是3D染色体 Xgwm645在受体与变异体间存在多态性。其中有22个变异体与受体 间有差异,占62.86%,其表现为同一株行的不同个体间有的多态性一 致,有的多态性不一致,表明变异体有的趋向稳定,有的在分离。

论文目录

• 摘要
• 英文摘要
• 英文缩写
• 1 引言
• 1.1 外源 DNA导入理论的提出
• 1.2 外源 DNA导入植物的方法
• 1.3 外源 DNA导入的技术特点
• 1.4 外源 DNA导入技术在植物改良上取得的成果
• 1.5 外源 DNA导入后代变异机理探索
• 1.5.1 外源 DNA导入后代变异特点
• 1.5.2 导入后代染色体行为的研究
• 1.5.3 导入后代的生化和分子验证
• 1.5.4 外源 DNA导入后代变异机理的几种观点
• 1.6 本研究的目的和意义
• 2 材料与方法
• 2.1 材料
• 2.2 试验方法
• 2.2.1 入DNA导入的方法
• 2.2.2 细胞学观察
• 2.2.3 茎杆横切面解剖观察
• 2.2.4 过氧化物酶同工酶的分析
• 2.2.5 高分子量麦谷蛋白亚基的分析
• 2.2.6 DNA的提取
• 2.2.7 SSR分析
• 3 结果与分析
• 3.1 λDNA导入中国春后代形态性状变异
• 3.2 变异体的茎秆组织结构解剖分析
• 3.2.1 机械组织的细胞层数
• 3.2.2 机械组织发育的进度
• 3.2.3 机械组织的厚度
• 3.2.4 维管束
• 3.3 导入λDNA中国春的后代减数分裂期染色体行为变异
• 3.4 过氧化物同工酶谱分析
• 3.5 变异体高分子量谷蛋白亚基分析
• 3.6 SSR分析
• 4 讨论
• 1代不出现性状明显变异的可能原因'>4.1 D₁代不出现性状明显变异的可能原因
• 4.2 外源 DNA导入受体后引起变异的机理
• 4.3 外源 DNA导入技术在小麦育种中的应用价值
• 4.4 进一步研究的设想
• 5 结论
• 参考文献
• 致谢
• 攻读学位期间发表论文情况