超声波及微波辅助萃取鬼箭羽中黄酮类物质

论文摘要

鬼箭羽作为一味传统中药已经有两干多年的历史了。鬼箭羽中主要含黄酮类活性成分包括芦丁、槲皮素等，其主要功效为抗氧化性和抗衰老作用。药理研究表明黄酮类物质具有降血糖、调血脂及提高心血管活性等作用。本论文采用微波辅助萃取法提取，分光光度法测定鬼箭羽中的总黄酮含量。通过单因素实验和正交实验，确定了微波法提取鬼箭羽中黄酮类化合物的最佳条件为：使用60％乙醇，在液固比40∶1条件下微波辐射时间5min，微波功率255 W。在此条件下进行了精密度和回收率实验，所得结果的相对标准偏差为1.711％(n=5)，回收率在97～101％之间。结果表明，该法操作简便，经济可靠，重现性好，适合于各类中草药中总黄酮的含量测定。用高效液相色谱法和毛细管电泳法对鬼箭羽中两种物质进行分离和测定，对比两种方法的优缺点。HPLC为传统经典的药物分析方法，适用于大多数药物，但其色谱柱易被污染不易再生，样品前处理过程易带来较大误差。CE高效、快速、用量少，毛细管在数秒至数分钟内冲洗再生，不易污染，可供下一次使用。鉴于本实验研究的芦丁和槲皮素可以在254nm波长下检测，所以在后续实验中将采用定量准确、重现性好的HPLC对鬼箭羽中芦丁和槲皮素进行定量测定。本文建立了超声波辅助萃取鬼箭羽中提取芦丁和槲皮素的方法，对影响提取效率的四个提取条件进行了讨论，得出最优条件为：70％的乙醇水溶液；液固比：每克样品40 mL溶剂；提取时间：3×30min。本方法重现性好，回收率高，提取效率优于传统的乙醇浸提法。应用密闭微波萃取装置对鬼箭羽中的有效成分芦丁和槲皮素进行了微波萃取研究，用单因素和正交实验设计优化了溶剂浓度、溶剂用量、微波功率和微波辐射时间等微波提取条件。与传统的索氏提取法和超声波提取法比较，微波辅助萃取法具有提取速度快、提取效率高及溶剂用量少等特点。以鬼箭羽为原料对微波辅助萃取植物中有效成分的萃取机理进行了探讨，借助扫描电镜观察萃取过程中微波辐射对植物物料微观结构的破坏。并与传统溶剂加热提取法和超声波辅助萃取法进行对比。结果表明，在各种处理方法的作用下，植物细胞的结构都会发生较为明显的变化，主要表现在质壁收缩现象，螺纹导管等物质被破坏，但微波辅助萃取破坏程度最高。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 第一章 引言
• 1.1 鬼箭羽概述
• 1.2 黄酮类化合物
• 1.2.1 黄酮类化合物定义
• 1.2.2 黄酮类化合物的生理活性
• 1.3 黄酮类化合物常用的提取方法
• 1.3.1 水蒸汽蒸馏法
• 1.3.2 有机溶剂萃取法
• 1.3.3 超临界流体萃取法
• 1.3.4 膜提取分离技术
• 1.3.5 酶法
• 1.3.6 半仿生提取法
• 1.3.7 破碎提取法
• 1.3.8 空气爆破法
• 1.3.9 液泛法
• 1.3.10 双水相萃取技术
• 1.4 超声波辅助萃取技术
• 1.4.1 超声波和空化作用
• 1.4.2 超声波在植物组织提取中的作用
• 1.5 微波萃取技术
• 1.5.1 微波萃取的基本原理
• 1.5.2 微波萃取的参数及其影响因素
• 1.5.3 微波辅助萃取的特点
• 1.5.4 微波萃取在中药成分提取方面的应用
• 1.5.5 微波萃取技术展望
• 1.6 黄酮类化合物常用的测定方法
• 1.6.1 薄层色谱法（TLC）
• 1.6.2 气相色谱法（GC）
• 1.6.3 分光光度法（UV-Vis）
• 1.6.4 高效液相色谱法（HPLC）
• 1.6.5 毛细管电泳法（CE）
• 1.7 微波辅助萃取植物中有效成分的机理探讨
• 1.8 本研究课题的提出
• 第二章 微波辅助萃取—分光光度法测定鬼箭羽茎中总黄酮
• 2.1 前言
• 2.2 实验部分
• 2.2.1 仪器与试剂
• 2.2.2 样品的处理
• 2.2.3 总黄酮含量的测定
• 2.3 结果与讨论
• 2.3.1 测定波长的选择
• 2.3.2 显色反应时间的影响
• 2.3.3 标准曲线的建立
• 2.3.4 微波辅助萃取法的单因素实验
• 2.3.5 正交实验确定微波辅助提取的最佳条件
• 2.3.6 最佳条件下的重现性和回收率实验
• 2.3.7 微波法与乙醇浸提法及超声波萃取法的比较
• 2.4 小结
• 第三章 高效液相色谱法和毛细管电泳法测定鬼箭羽叶中有效成分芦丁和槲皮素的研究
• 3.1 前言
• 3.2 实验部分
• 3.2.1 仪器与试剂
• 3.2.2 高效液相色谱条件
• 3.2.3 质谱条件
• 3.2.4 高效毛细管电泳条件
• 3.2.5 微波辅助萃取的实验体系
• 3.2.6 微波辅助萃取法
• 3.3 结果与讨论
• 3.3.1 色谱分离条件的优化
• 3.3.2 液质联用验证芦丁和槲皮素
• 3.3.3 毛细管电泳法分离条件的优化
• 3.3.4 两种分析方法的比较
• 3.3.5 标准曲线
• 3.3.6 精密度
• 3.3.7 含量测定
• 3.3.8 微波辅助萃取条件考察
• 3.3.9 回收率实验
• 3.4 微波萃取与超声波萃取及索氏提取法的比较
• 3.5 小结
• 第四章 超声波辅助萃取鬼箭羽茎中芦丁和槲皮素
• 4.1 前言
• 4.2 实验部分
• 4.2.1 仪器与试剂
• 4.2.2 色谱条件
• 4.2.3 超声波辅助萃取的实验体系
• 4.2.4 超声波辅助萃取法
• 4.2.5 乙醇浸提法
• 4.3 结果与讨论
• 4.3.1 色谱测定方法
• 4.3.2 超声波辅助萃耿条件考察
• 4.4 小结
• 第五章 微波辅助萃取鬼箭羽茎中芦丁和槲皮素
• 5.1 前言
• 5.2 实验部分
• 5.2.1 仪器与试剂
• 5.2.2 色谱条件
• 5.2.3 微波辅助萃取仪器及方法
• 5.2.4 索氏提取法
• 5.3 结果与讨论
• 5.3.1 色谱测定方法
• 5.3.2 微波辅助萃取条件考察
• 5.4 各种提取方法结果比较
• 第六章 鬼箭羽样品经微波辅助萃取后微观结构的变化
• 6.1 前言
• 6.2 实验部分
• 6.2.1 仪器与试剂
• 6.2.2 实验方法
• 6.3 结果与讨论
• 6.3.1 鬼箭羽不同部位样品经各种提取方法后的对比
• 6.4 小结
• 第七章 结论
• 参考文献
• 致谢
• 研究成果及发表的学术论文
• 作者和导师简介