板蓝根粉体的理化特性及其超微粉体指纹图谱与抗流感病毒FM1作用的研究

板蓝根粉体的理化特性及其超微粉体指纹图谱与抗流感病毒FM1作用的研究

论文摘要

目的:中草药有效成分通常分布于细胞内与细胞质间,且以细胞内为主。若细胞破壁则利于生药有效成分的溶出。超微粉体是超微粉碎的最终产品,其破壁率可达到90%以上,故具有一般颗粒所不具有的一些特殊的理化性质,如良好的溶解性、分散性等。超微粉体技术引进中药领域,产生了微米中药,但在中药制药工业中的应用尚处于探索阶段,其粉体的质量标准化体系尚待完善,应加强粉体制备工艺技术、质量标准及主要药效学的系统研究。本论文以板蓝根为研究对象,探索板蓝根超微粉体的制备工艺、多种成分的指纹图谱以及不同极性部位的抗病毒作用,为中药超微粉体行业质量标准的制订及完善提供试验数据。方法:(1)板蓝根超微粉体制备工艺的研究:以D50为考查指标,对超微粉碎的时间、温度、药材水分、介质填充率进行研究。(2)板蓝根超微粉体的表征与物理特性研究:从外观性状、显微结构、粉体松密度等方面对板蓝根粉体进行表征;通过休止角测定以及吸湿速率、吸湿百分率、相对临界湿度考查不同粒径粉体的流动性与吸湿性变化;通过红外光谱法比较板蓝根不同粒径化学成分信息的细微变化。(3)板蓝根超微粉体指纹图谱的研究:以腺苷、表告依春和15种氨基酸为指标,建立板蓝根超微粉体的多成分共有模式指纹图谱(4)板蓝根粉体抗病毒作用的研究:运用系统溶剂提取法得到板蓝根超微粉体六个有效部位,比较各有效部位的抗病毒作用。结果:(1)板蓝根粉体的超微粉碎工艺参数的优选:投料量为200g,粉碎时间16min,温度-10~10℃,水分6~8%,介质填充率60~70%;粉体D50≤13μm。(2)物理性状研究结果表明,板蓝根经超微粉碎后,外观颜色趋浅,质地趋于均匀,流动性减小,吸湿性增大;显微鉴别显示,细胞器多出现破碎,常见特征显微鉴别缺失;不同粒径粉体的红外光谱图基本一致。(3)建立了13批不同产地的板蓝根超微粉体水溶性成分HPLC旨纹图谱,确立了7个共有峰,13批样品相似度达到0.70以上;建立了13批板蓝根超微粉体氨基酸成分HPLC指纹图谱,确定了15个共有峰,13批样品相似度达到0.70以上。(4)体外抗病毒作用显示,氯仿部位抗病毒作用最强;板蓝根超微粉完全抑制病毒复制的浓度明显小于细粉,说明超微粉的生物利用度较大提高,从而可为节省药材提供试验依据。结论:板蓝根经超微粉碎后,外观性状、粒径分布、显微特征、吸湿性和流动性均发生了不同程度的改变,但主要化学成分未出现明显变化;由抗病毒试验可知,同剂量超微粉的抗病毒效果明显较细粉要好,因此超微粉碎对中药药效的发挥具有积极的意义,证明了中药超微粉体的优越性。

论文目录

  • 摘要
  • Abstract
  • 引言
  • 第一部分 板蓝根超微粉制备工艺的研究
  • 1.1 前期工作基础
  • 1.2 板蓝根超微粉碎工艺参数的优选
  • 1.2.1 仪器与材料
  • 1.2.2 方法与结果
  • 1.3 小结与讨论
  • 参考文献
  • 第二部分 板蓝根粉体表征与物理特性的评价
  • 2.1 实验仪器与试剂
  • 2.1.1 仪器
  • 2.1.2 试剂
  • 2.2 方法与结论
  • 2.2.1 不同粒径板蓝根粉体的制备
  • 2.2.2 粒径检测
  • 2.2.3 显微特征研究(显微图像法)
  • 2.2.4 不同粒径板蓝根粉体物理特性研究
  • 2.3 板蓝根粉体薄层色谱鉴别
  • 2.4 小结与讨论
  • 参考文献
  • 第三部分 板蓝根超微粉体二元指纹图谱研究及主要成分分析
  • 3.1 实验仪器与试药
  • 3.2 实验方法与结果
  • 3.2.1 板蓝根超微粉水溶性成分指纹图谱的研究
  • 3.2.2 板蓝根超微粉氨基酸柱前衍生化指纹图谱的研究
  • 3.3 分析与讨论
  • 3.3.1 提取方法及溶剂的选择
  • 3.3.2 内参照峰的选定
  • 3.3.3 聚类分析结果
  • 3.3.4 粉体粒径对化学成分的影响
  • 3.3.5 药理依据与研究意义
  • 3.3.6 小结
  • 参考文献
  • 第四部分 板蓝根粉体抗病毒作用的研究
  • 4.1 实验材料与仪器
  • 4.2 实验方法
  • 4.2.1 试验样品制备
  • 4.2.2 细胞培养
  • 50)的测定'>4.2.3 流感病毒对50%组织培养感染剂量(TCID50)的测定
  • 4.2.4 试验药物对细胞的半数中毒剂量的测定(MTT法)
  • 4.2.5 试验药物抑制流感病毒的作用
  • 4.3 实验结果
  • 50测定结果'>4.3.1 流感病毒TCID50测定结果
  • 4.3.2 流感病毒血凝结果
  • 4.3.3 试验药物对实验细胞毒作用
  • 4.3.4 试验药物抗病毒结果
  • 4.4 讨论
  • 参考文献
  • 第五部分 总结与展望
  • 5.1 总结
  • 5.2 取得的主要成果
  • 5.3 展望
  • 致谢
  • 附录1 综述板蓝根的研究进展
  • 参考文献
  • 附录2 攻读硕士学位期间参与科研项目及发表论文情况
  • 相关论文文献

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