兔骨髓间充质干细胞穴位移植对梗死区心肌细胞再生及其凋亡的影响

兔骨髓间充质干细胞穴位移植对梗死区心肌细胞再生及其凋亡的影响

论文摘要

目的:探讨兔骨髓间充质干细胞(MSCs)穴位移植对缺血心肌细胞的修复重建能力,并进一步研究MSCs穴位注射对梗死区心肌细胞凋亡的影响及凋亡调控蛋白Fas,FasL,Bcl-2表达的影响。方法:将已建立心肌梗死模型的日本大耳白兔随机分为3组,模型对照组、穴位注射干细胞组、穴位注射生理盐水组。用开胸结扎冠状动脉前降支的方法建立急性心肌梗死模型,1周后穴位注射干细胞组经穴位注射已经分离,培养,扩增、标记后的MSCs悬液,穴位注射生理盐水组经穴位注射等量的生理盐水。对梗死区进行Brdu免疫组化染色以观察穴位移植MSCs是否迁移至梗死区;对Brdu染色阳性的细胞复染心肌特异性肌钙蛋白T染色以观察迁移的细胞是否分化及分化的性质;采用脱氧核苷酸末端转移酶介导原位缺口标记(TUNEL法)确定细胞凋亡数,免疫组化SABC方法观察心肌细胞中Fas、FasL、Bcl-2的表达。结果:(1)穴位注射MSCs组梗死区组织免疫组化brdu染色阳性;梗死区组织cTnT染色阳性;(2)凋亡细胞的表达,模型对照组和穴位注射生理盐水组均高于正常对照组P<0.001,穴位注射干细胞组低于模型对照组和穴位注射生理盐水组P<0.05。Fas蛋白的表达,模型对照组高于正常对照组P<0.05,穴位注射干细胞组和穴位注射生理盐水组均低于模型对照组P分别<0.001和0.05,穴位注射生理盐水组明显高于穴位注射干细胞组P<0.001。FasL蛋白的表达,模型对照组和穴位注射生理盐水组均高于正常对照组P<0.001,穴位注射干细胞组明显低于模型对照组P<0.001,穴位注射生理盐水组明显高于穴位注射干细胞组P<0.001。Bcl-2蛋白表达,模型对照组和穴位注射生理盐水组均低于正常对照组P<0.001,穴位注射干细胞组明显高于模型对照组和穴位注射生理盐水组P<0.001。结论:骨髓间充质干细胞穴位移植,可迁移至梗死区,并可以在梗死区分化为心肌样细胞;穴位移植骨髓间充质干细胞可使梗死区心肌细胞凋亡数减少,其机制可能是通过Fas、FasL蛋白的减少、Bcl-2蛋白的增多来调节的。

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