论文摘要
以木质纤维素类物质作为乙醇发酵的原料,研究了水解工艺和发酵工艺,主要包括浓酸水解法、稀酸水解法、两步水解法、水解液的脱毒处理、发酵菌种培养和驯化、固定化混和菌种发酵等。通过浓酸水解法、稀酸水解法、两步水解法研究,获得了优化的水解工艺条件:硫酸浓度75%,液固比2:1(v/w),水解时间1h,稀释至硫酸浓度4%,常压水解1h。研究了水解液的脱毒方法,得出了优化的脱毒工艺条件:水解液煮沸10-20min,之后用氢氧化钙逐渐调pH值至8-11,过滤,用硫酸将pH回调至适当值,70-80℃下晶化沉淀30-50min,加入0.05%-0.4%的亚硫酸钠并在90℃下加热30-50min,过滤,浓缩至适当浓度,用0.3%-1%浓度的活性炭脱色。研究了发酵菌种的培养和驯化工艺,驯化后的菌种能够适应水解液的环境,发酵效果明显好于未驯化前的酵母。确定了驯化酿酒酵母发酵的最佳工艺条件:初始糖浓60-100g/L;初始pH值5.6-5.7;发酵时间48-60h;发酵温度28-33℃。为提高发酵效率,研究了固定化细胞的方法,获得的固定化酿酒酵母的发酵周期明显低于驯化酿酒酵母,其对玉米秸秆水解液发酵的优化工艺条件为:发酵周期12-22h,初始糖浓度80-120g/L,初始pH值6.0,发酵温度30-33℃。为了充分利用玉米秸秆水解液中的木糖发酵,研究了固定化混合菌种发酵工艺,表明混合菌种的发酵性能明显优于单一菌种,固定化混合菌种可以同时利用水解液中的葡萄糖和木糖进行发酵,其效果明显优于游离混和菌种发酵,也明显优于S.cerevisiae和P.stipitis两种细胞共固定发酵。在30-33℃、100r/min、初始pH6.0、C/N=20:1-25:1、混合菌种比例2:1-3:1的条件下,酒精浓度可达到21.34g/L,酒精得率可达到0.4g/g(酒精/消耗的糖)。
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