论文题目: 酵母菌的分离、筛选以及对柑橘保鲜的机理研究
论文类型: 博士论文
论文专业: 果树学
作者: 龙超安
导师: 邓伯勋,邓秀新
关键词: 酵母菌,柑橘,青霉病,绿霉病,生物防治,抑菌机理
文献来源: 华中农业大学
发表年度: 2005
论文摘要: 柑橘果品安全(无毒)防腐保鲜是国内外关注的问题,它关系到人体的健康及果品贸易、柑橘产业和农业经济的发展。多年来,国内外科技工作者非常重视无毒防腐保鲜柑橘的研究。由于研究手段和方法等问题,至今没有理想的成果投产。本研究旨在利用柑橘果实表面及柑橘根际土壤中的有益酵母菌,研究生物防腐保鲜,以菌杀菌,以菌抑菌,以生物制剂代替化学防腐保鲜剂,克服化学药剂对人体的毒害作用,提高柑橘果品防腐保鲜效果,主要结果如下: 1.酵母菌的分离、筛选和鉴定 从果园及柑橘果实伤口处中共分离和筛选了381株酵母菌(yeast)。经过离体和活体实验,筛选出一株能够有效防治柑橘采后青、绿霉病的拮抗菌株——34-9。通过形态学观察和生理生化实验,在确定属之后,根据属的具体特征选择与本属的鉴定有关的实验,进一步鉴定表明该菌株属于真菌门半知菌纲丛梗孢目,隐球酵母科,克勒克酵母属(Kloeckera)的柠檬形克勒克酵母(Kloeckera apiculata)。 2.菌株(34-9)在活体上对柑橘青、绿霉病的抑制效果评价 在25℃下,2×10~8 CFU/ml的菌株(34-9)的悬浮液能够完全抑制病菌孢子浓度为2×10~4个/ml时柑橘果实青霉病(Penicillium italicum Wehmer.)的发生,对柑橘果实绿霉病(Penicillium digitatum Sacc.)也有极好的抑制效果;当菌株(34-9)的浓度降低为2×10~7CFU/ml时,对柑橘青、绿霉病的抑制效果相对较差,但可以延缓病害的发生。 3.菌株(34-9)在柑橘果实伤口处的生长情况 菌株(34-9)在有无柑橘青、绿霉病存在的情况下均能迅速在柑橘果实伤口定殖,接种48h后,数量可增加20倍以上;在有病菌存在的情况下,24h后菌株(34-9)的数量就增加66倍。菌株(34-9)和病菌孢子的接种时间与防治的效果有关,先接种菌株(34-9)的抑菌效果显著地好于同时或后于病菌接种的效果。 4.菌株(34-9)与常规的果实采后处理措施的研究 菌株(34-9)能够与常规的果实采后处理措施如化学杀菌剂、低温冷藏条件相结合。菌株(34-9)与低浓度的杀菌剂如多菌灵等混合使用,可以达到高浓度杀菌剂的
论文目录:
摘要
Abstract
缩略词
第一章 文献综述
1 生物保鲜研究的必要性
1.1 大力发展柑橘生产的需要
1.2 提高柑橘产品市场竞争力的需要
1.3 柑橘产业化生产的需要
1.4 减少用于柑橘防腐保鲜药剂毒性的需要
2 生物防治的概念及研究现状
2.1 生物防治的概念
2.2 生物防治的研究现状
3 采后病害生物防治的特点
4 目前采后病害生物防治的研究进展及防治状况
5 当前采后病害生物防治的研究热点
5.1 拮抗菌的分离与筛选
5.2 菌种的复壮与保藏
5.2.1 尽量减少传代
5.2.2 菌种经常纯化
5.2.3 采用有效的菌种保藏方法
5.3 拮抗菌的抑菌机理
5.3.1 依靠产生抗菌素抑制病菌的生长
5.3.2 与病菌竞争营养和空间
5.3.3 重寄生现象(真菌寄生现象)
5.3.4 影响寄主抗性
5.3.5 其它物质对拮抗效果的影响
6 采后病害生物防治商业开发的可能性以及发展前景
6.1 拮抗菌的商品化应用
6.2 发展前景
第二章 酵母菌的分离与筛选
1 引言
2 材料与方法
2.1 从果蔬表面或根际土壤自然生长的微生物中分离
2.1.1 从柑橘果实表面分离酵母菌
2.1.2 从柑橘根际土壤中分离酵母菌
2.2 从柑橘果实伤口分离酵母菌
2.3 “in vitro”筛选实验
2.4 从现有的酵母菌中筛选
2.5 所有数据均采用SAS软件进行方差分析
3 结果与分析
3.1 酵母菌分离结果
3.2 “in vitro”筛选实验
3.2.1 初选
3.2.2 复选
3.2.3 第二次复选
3.2.4 酵母与病菌的活菌数
3.3 酵母菌与青、绿霉菌的混合培养结果
3.4 酵母拮抗菌的筛选
4 讨论
第三章 酵母菌对柑橘采后病害的抑制效果
1 引言
2 材料与方法
2.1 材料
2.2 方法
2.2.1 “in vivo”实验
2.2.2 菌株(34-9)抑菌效果的分析
2.2.3 拮抗菌株抑菌浓度的筛选
2.2.4 菌株(34-9)发挥效益的分析
3 结果与分析
3.1 菌株(34-9)不同处理对柑橘青、绿霉病的抑制效果
3.2 菌株(34-9)的不同浓度对柑橘采后青、绿霉病的防治
3.3 菌株(34-9)的接种时间对柑橘青、绿霉病防治效果的影响
4 讨论
第四章 菌株(34-9)的鉴定及部分生理指标的测定
1 引言
2 材料与方法
2.1 无丝状营养细胞的培养形态
2.2 丝状酵母菌的镜检
2.3 掷孢子(Ballistoconidia)的镜检
2.4 子囊孢子的镜检
2.5 碳源同化实验-生长谱法
2.6 氮源同化实验
2.7 糖类发酵鉴定
2.8 维生素需要量鉴定
2.9 类淀粉化合物形成测定
2.10 对高浓度D-葡萄糖生长的鉴定
2.11 不同的培养基配方
2.12 部分生理指标的测定
2.12.1 耐乙醇能力测试
2.12.2 致死温度测试
2.12.3 生长曲线测试
2.12.4 比生长速率的计算
3 结果与分析
3.1 形态学特征
3.2 生理生化特征
3.3 部分生理指标的测定
3.3.1 耐乙醇能力
3.3.2 致死温度
3.3.3 生长曲线
3.3.4 比生长速率
4 讨论
第五章 K.apiculata在柑橘果实上的生长动态
1 引言
2 材料与方法
2.1 材料
2.2 方法
2.2.1 K.apiculata在柑橘果实伤口的繁殖速度
2.2.2 不同处理的K.apiculata在果实伤口的生长速度
3 结果与分析
3.1 K.apiculata在柑橘果实伤口的繁殖速度
3.2 不同处理的K.apiculata在果实伤口的生长速度
4 讨论
第六章 K.apiculata抑菌机理的初步研究
1 引言
2 材料与方法
2.1 K.apiculata产生抗菌素的研究
2.2 K.apiculata与病菌竞争营养的检测
2.2.1 K.apiculata在PDA上抑菌实验
2.2.2 K.apiculata在PDB上的抑菌实验
2.3 K.apiculata对病菌的直接作用
3 结果与分析
3.1 拮抗菌产生抗生素的情况
3.2 K.apiculata与病菌竞争营养的情况
3.2.1 在PDA上对病菌的作用
3.2.2 在PDB上对病菌的作用
3.3 K.apiculata对柑橘青、绿霉病菌的直接作用
4 讨论
第七章 K.apiculata在柑橘贮藏中的应用
1 引言
2 材料与方法
2.1 实验材料
2.2 实验方法
2.2.1 2002年—2003年实验
2.2.2 2003年—2004年实验
3 结果与分析
3.1 2002年—2003年实验结果
3.2 2003年-2004年实验结果
4 讨论
第八章 总讨论
1.拮抗酵母菌对采后病害生物防治的应用
1.1 应用于采后病害生物防治研究的酵母菌特点及种类
1.1.1 拮抗酵母菌的特点
1.1.2 拮抗酵母菌的种类
1.2 拮抗酵母菌的作用机制
1.2.1 竞争作用(营养、空间等的竞争)
1.2.2 寄生作用
1.2.3 诱导寄主抗性
1.2.4 抗生作用
1.3 拮抗酵母菌的商品化应用及发展前景
1.3.1 拮抗酵母菌的商品化应用
1.3.2 发展前景
2.生物保鲜的安全性
3.应用的方法
4.预期的风险分析和效益分析
4.1 风险分析
4.2 效益分析
4.2.1 经济效益分析
4.2.2 社会、环境效益分析
创新点与下一步研究打算
参考文献
照片及说明
附录Ⅰ 酵母各属检索表
附录Ⅱ 酵母菌(34-9)急性检测报告
附录Ⅲ 论文及成果
致谢
发布时间: 2005-12-05
相关论文
- [1].橙汁中酵母菌的分离鉴定及其快速分子检测技术研究[D]. 郭冬琴.西南大学2012
- [2].苹果园土壤微生物多样性及酵母菌新种研究[D]. 陈汝.山东农业大学2012
- [3].柑橘果实采后酸腐病侵染规律及防治技术的研究[D]. 刘霞.浙江大学2009
- [4].防治哈密瓜细菌性果斑病拮抗酵母菌的筛选及其生防机理研究[D]. 王晓东.华中农业大学2009
- [5].果实采后病害生物防治及其机理研究[D]. 范青.中国科学院植物研究所2001
- [6].罗伦隐球酵母对水果采后病害的生物防治及其防治机理研究[D]. 张红印.浙江大学2004
- [7].酵母拮抗菌的抑病机理及生防效力改良的研究[D]. 万亚坤.中国科学院研究生院（植物研究所）2004
- [8].酵母拮抗菌的抑病效力、规模化培养及相关机理研究[D]. 王友升.中国科学院研究生院（植物研究所）2005
- [9].提高罗伦隐球酵母拮抗效力的途径及其机理的研究[D]. 余挺.浙江大学2007
- [10].生防制剂在葡萄保鲜中的应用与抑菌机理研究[D]. 秦丹.湖南农业大学2007