导读:本文包含了家蚕蛋白论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:家蚕,化学感受蛋白,蛋白表达,多克隆抗体
家蚕蛋白论文文献综述
魏博帆,王景娅,孙妍妍,王露,李晓哲[1]（2019）在《家蚕化学感受蛋白CSP9的抗体制备及表达分析》一文中研究指出为了制备家蚕CSP9的多克隆抗体,研究该蛋白在家蚕中的表达特征和功能。利用PCR扩增家蚕csp9基因,构建其原核表达载体,诱导CSP9蛋白表达并纯化。纯化后的CSP9蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,Western杂交检测CSP9在家蚕中的表达特征。最终成功构建csp9/pET-28a原核表达载体,并纯化获得与预测分子量一致的CSP9蛋白;成功制备了CSP9多克隆抗体。Western杂交结果表明,CSP9在家蚕不同时期和不同组织中都有特异表达。本研究成功表达纯化并制备了家蚕CSP9多克隆抗体,分析了CSP9在家蚕中的表达特征,为后续该蛋白在家蚕中的功能和调控研究奠定了基础。(本文来源于《中国农学通报》期刊2019年34期）
郭忠建,于宪印,董现云,于萌涵[2]（2019）在《家蚕核型多角体病毒泛素蛋白单克隆抗体的制备》一文中研究指出泛素(ubiquitin,UB)是一种小分子质量蛋白。从氨基酸序列上看,杆状病毒UB与真核生物UB的差异体现在2段序列上,即第15～31个和第53～57个氨基酸,其余的序列高度保守。这种高度保守性使得许多商业化的抗泛素抗体难以特异地将二者区分开来。将人工合成的家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)UB(v-UB)多肽~(17)TEPAETVADLKQ~(28)作为免疫原免疫BALB/c小鼠,成功制备了针对该多肽的特异性单克隆抗体,实现了对v-UB的特异性检测。利用该抗体,确定v-UB在细胞质中形成的斑点状结构为P62内涵体(inclusion body)。获得的单克隆抗体为今后v-UB的研究提供了实验基础。(本文来源于《蚕业科学》期刊2019年04期）
王平阳,刘艳伟,张雨丽,黄文功,闭立辉[3]（2019）在《家蚕食性相关蛋白的研究进展》一文中研究指出昆虫的食性是一种复杂的生活习性,受多种因素的影响,其中遗传因素起主导作用,越来越多的研究者对食性相关基因/蛋白进行了研究,试图在分子水平诠释昆虫食性调控机制。家蚕是重要的经济昆虫,主要以桑叶为食。随着经济社会的发展,人工成本占比越来越高,以人工饲料饲养家蚕的优势日益凸显,对家蚕食性的研究也逐渐受到蚕业工作者的重视。近年来对家蚕食性调控相关蛋白及其编码基因的研究富有成效,本文综述了影响家蚕食性的相关蛋白质的研究进展,以期为家蚕食性研究提供参考,并为人工饲料养蚕实用化提供理论支持。(本文来源于《蚕业科学》期刊2019年04期）
龙羽燕,郭望,蓝黄丽,屈达才,梁湘[4]（2019）在《家蚕核型多角体病毒囊膜糖蛋白GP64的研究进展》一文中研究指出为了探索GP64蛋白在家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)入侵和感染宿主细胞的作用机制,通过对BmNPV GP64蛋白的结构、功能、对病毒毒力的影响及其应用的研究进展进行综述,简述了GP64蛋白与病毒致病力及病毒宿主域的相关性,以及BmNPV GP64蛋白在基因工程领域的相关研究进展,旨在为BmNPV致病性的进一步研究,以及家蚕血液型脓病的防治研究提供参考,为杆状病毒研究以及新领域的开发应用提供研究依据。(本文来源于《广西蚕业》期刊2019年03期）
朱峰,高建华,张永红,肖圣燕,邵榆岚[5]（2019）在《家蚕微孢子虫感染对家蚕海龟蛋白(Bmtutl)基因表达水平的影响》一文中研究指出【目的】本研究旨在阐明家蚕微孢子虫Nosema bombycis感染不同时间对家蚕Bombyx mori幼虫不同组织中家蚕海龟蛋白(Bombyx Turtle, Bmtutl)基因表达水平的影响,为揭示家蚕微孢子虫的侵染机制奠定基础。【方法】利用生物信息学方法对家蚕海龟蛋白3种亚型Bmtutl-464, Bmtutl-519和Bmtutl-810的序列结构特征进行了分析;利用qPCR检测家蚕微孢子虫感染后12, 24, 48, 72, 96和120 h,家蚕幼虫中肠、血淋巴与脂肪体组织中Bmtutl-464,Bmtutl-519和Bmtutl-810基因表达水平的变化情况。【结果】家蚕海龟蛋白3种亚型的二级结构均主要由无规则卷曲、α螺旋、β转角和延伸链组成,其中无规则卷曲所占比例最高。但是PredictProtein分析发现,Bmtutl-464, Bmtutl-519和Bmtutl-810之间的蛋白/多核苷酸结合位点存在较大差异。qPCR结果表明,感染家蚕微孢子虫后,家蚕幼虫中肠、血淋巴与脂肪体组织中Bmtutl-464,Bmtutl-519和Bmtutl-810基因的整体表达处于被抑制状态,尤其在脂肪体中最为明显:Bmtutl-519和Bmtutl-810基因的表达在家蚕微孢子虫感染家蚕后的72 h开始受到显着抑制,特别是Bmtutl-519基因,其相对表达水平均不到对照的5.0%。【结论】家蚕海龟蛋白这3种亚型的序列结构特征存在较大差异,家蚕微孢子虫感染在一定程度抑制了家蚕幼虫中肠、血淋巴与脂肪体组织中Bmtutl-464,Bmtutl-519和Bmtutl-810基因尤其是Bmtutl-519的表达。结果说明,与其他两种家蚕海龟蛋白亚型相比,Bmtutl-519蛋白可能在家蚕微孢子虫侵染宿主的过程中起主要作用。(本文来源于《昆虫学报》期刊2019年08期）
王蓓蕾,孙爱群,李司[6]（2019）在《家蚕生物反应器表达A组轮状病毒结构蛋白VP7》一文中研究指出A组轮状病毒(rotavirus,RV)是引起某些幼龄动物患急性胃肠炎的主要病原之一,给家畜养殖业造成严重的经济损失。VP7蛋白是RV最外层的糖蛋白,具有强抗原性和免疫原性。本研究构建了重组家蚕杆状病毒BmNPV-VP7,并分别感染家蚕细胞、家蚕5龄幼虫以及蚕蛹。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,在重组病毒感染的家蚕细胞、5龄幼虫以及蚕蛹中均检测到35 ku的特异性条带,说明成功表达了VP7蛋白。ELISA检测结果显示,VP7蛋白在家蚕细胞和蚕蛹中的表达分别在感染后第5天和第7天达到最高水平;而在家蚕5龄幼虫中,VP7蛋白表达量不高。家蚕具有食用和药用价值,我们构建的重组家蚕杆状病毒BmNPV-VP7在家蚕生物反应器中成功表达了VP7蛋白,为A组轮状病毒疫苗的研制提供了一条新途径。(本文来源于《浙江农业科学》期刊2019年08期）
WANG,Y,ZHAO,Q,WAN,Q,X,孙涛[7]（2019）在《家蚕和斜纹夜蛾中P因子抑制蛋白可以结合dsx前体mRNA的靶序列》一文中研究指出家蚕性别决定基因(Bmdsx)在家蚕性别决定的最后一步中起到双开关基因的作用。西南大学家蚕基因组生物学国家重点实验室的学者研究发现,家蚕P因子抑制(PSI)蛋白能够发挥外显子沉默作用,与Bmdsx前体mRNA顺式作用元件CE1相互作用,促进Bmdsx的雄性特异性剪接。然而,BmPSI蛋白与Bmdsx前体m RNA相互作用的机制尚不清楚。电泳迁移率转移实验(EMSA)结果表明,BmPSI中4个KH_1基序都是结合的关键,尤其是前两个KH_1基序。通过EMSA、圆二色性(CD)光谱学和等温滴定量热法(ITC)实验,发现KH_1基序中的3个活性位点(I116、L127和IGGI)是结合所必需的。作者纯化了斜纹夜蛾的PSI同源蛋白(SlPSI),并验证了SlPSI与顺式作用元件CE1的结合。与BmPSI相比,I116和IGGI突变的SlPSI蛋白失去了与顺式作用元件CE1结合的能力。综上所述,PSI和dsx前体mRNA的结合在家蚕和斜纹夜蛾中是保守的,这些发现为鳞翅目昆虫的性别鉴定提供了线索。(本文来源于《广西蚕业》期刊2019年02期）
ZHV,F,TANG,X,XIAO,S,陈思洁[8]（2019）在《家蚕Bmtutl-519蛋白在家蚕微孢子虫感染BmEN细胞中的作用》一文中研究指出家蚕Bmtutl-519蛋白是家蚕Turtle蛋白的一个亚型,属于免疫球蛋白超家族。在家蚕微孢子虫感染BmN细胞后,Bmtutl-519的相对表达水平明显上调。在BmN细胞中,通过间接免疫荧光分析(indirect immunoinfluscent assay,IFA)、共定位实验、蛋白印迹法以及增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合载体转染Bmtutl-519表达质粒来研究Bmtutl-519的亚细胞定位。结果表明,Bmtutl-519在BmN细胞的细胞质和细胞膜中均有分布。Bmtutl-519可能作为细胞表面受体或调控因子参与了家蚕微孢子虫的感染过程。Bmtutl-519与家蚕微孢子虫壁蛋白NbSWP26(参与宿主细胞粘附和感染过程)的相互作用分析表明,NbSWP26的C端肝素结合基序(heparin-binding motif,HBM)介导了这两种蛋白之间的相互作用。在将NbSWP26的赖氨酸突变为甘氨酸(K208G、K209G、K210G和K213G)的突变型中,NbSWP26蛋白中HBM的突变导致其结合Bmtutl-519蛋白的能力丧失。微孢子虫粘附和感染试验表明,Bmtutl-519增强了家蚕微孢子虫与宿主细胞表面的结合能力,但并没有增强家蚕微孢子虫对宿主细胞的感染能力。相反,在BmN细胞中,Bmtutl-519的持续高表达抑制了家蚕微孢子虫的增殖。(本文来源于《广西蚕业》期刊2019年02期）
杨帆,高珍,马亚飞,蒋彩英,吕正兵[9]（2019）在《家蚕AGO1蛋白结合RNA的分离与鉴定》一文中研究指出RNA诱导的基因沉默复合体(RNA-induced silencing complex,RISC)核心蛋白为Argonaute(AGO)家族蛋白,作为miRNA及RNAi功能途径中的关键蛋白,能够结合miRNA和siRNA,降解靶标基因mRNA或抑制其翻译。因此,利用AGO蛋白抗体通过免疫沉淀分离其结合RNA是目前规模化分离鉴定miRNA及相关小RNA靶基因的重要方法。首先对家蚕AGO1基因进行克隆表达和抗体制备,用自制的兔多克隆抗体免疫沉淀家蚕组织内源BmAGO1蛋白,成功分离BmAGO1蛋白结合的RNA;同时在BmN细胞中采用6×His标签融合表达BmAGO1蛋白,用His单抗免疫沉淀His-BmAGO1蛋白,同样成功分离获得其结合RNA。qRT-PCR检测发现,BmAGO1蛋白结合的RNA中含有家蚕miRNA靶基因BmEm4的mRNA。研究结果为批量鉴定家蚕miRNA靶基因奠定了基础,同时也为深入研究BmAGO1蛋白在家蚕中的功能提供了依据。(本文来源于《蚕业科学》期刊2019年03期）
郭望[10]（2019）在《利用BmNPV Bac-to-Bac系统在家蚕体内表达狂犬病毒M蛋白及抗体制备》一文中研究指出杆状病毒表达载体系统(Baculovirus Expression Vector System,BEVS)是将外源目的基因导入杆状病毒基因组,获得重组病毒,然后以此作为载体感染昆虫幼虫或其培养细胞。Bac-to-Bac表达系统通过位点特异性转座,在大肠杆菌内完成杆状病毒基因组的重组。BmNPV Bac-to-Bac杆状病毒表达系统由于能够以家蚕为载体大量表达外源蛋白,且省时省力,是制备生物活性蛋白的优良选择。狂犬病毒(Rabies Virus,RV)M基因ORF为609个核苷酸,编码202个氨基酸残基的基质蛋白,分子量约25 KD,其在子代病毒的装配、出芽和形态形成中起重要作用。本研究利用BmNPV Bac-to-Bac表达系统表达了重组的RVM(rRV-M)蛋白,将纯化的rRV-M蛋白作为抗原免疫小鼠,对制备出的血清抗体进行间接ELISA效价测定。本研究结果可以为RVM蛋白的功能探索提供抗原和抗体来源,也能为家蚕生物反应器的开发利用提供参考。研究的具体内容及结果如下:1、通过将RV M基因的ORF定向克隆到供体质粒pFastBacHTA上,构建重组供体质粒pFastBacHTA-M;然后转化至含有BmNPV Bacmid的大肠杆菌DH10BmBac,在辅助载体表达的转座酶作用下,RVM基因转座并插入到Bacmid DNA中,由多角体蛋白基因启动子控制其转录与表达。最后将重组杆粒rBacmid-M与脂质体混合注射五龄起蚕,得到重组杆状病毒rBmNPV-M。2、采集rBmNPV-M病毒感染的家蚕血淋巴细胞进行间接免疫荧光试验,结果显示,rBmNPV-M感染的血淋巴细胞发出特异性的亮绿色荧光,荧光集中分布在细胞质膜周围。对家蚕的血淋巴和脂肪体进行Western-blot试验,鉴定rRV-M蛋白在蚕体内的表达情况,结果显示,rRV-M蛋白在家蚕体内获得大量表达,重组蛋白的相对分子量约为25 KD。3、通过镍离子亲和层析从蚕体中纯化表达的rRV-M蛋白,纯化的蛋白条带单一,纯度良好。纯化的rRV-M蛋白与弗氏佐剂混合,以此为抗原免疫小鼠并分离血清得到多克隆抗体,对血清抗体进行间接ELISA效价测定,效价为1:2560。(本文来源于《广西大学》期刊2019-06-01）
家蚕蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
泛素(ubiquitin,UB)是一种小分子质量蛋白。从氨基酸序列上看,杆状病毒UB与真核生物UB的差异体现在2段序列上,即第15～31个和第53～57个氨基酸,其余的序列高度保守。这种高度保守性使得许多商业化的抗泛素抗体难以特异地将二者区分开来。将人工合成的家蚕核型多角体病毒(Bombyx mori nucleopolyhedrovirus,BmNPV)UB(v-UB)多肽~(17)TEPAETVADLKQ~(28)作为免疫原免疫BALB/c小鼠,成功制备了针对该多肽的特异性单克隆抗体,实现了对v-UB的特异性检测。利用该抗体,确定v-UB在细胞质中形成的斑点状结构为P62内涵体(inclusion body)。获得的单克隆抗体为今后v-UB的研究提供了实验基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
家蚕蛋白论文参考文献
[1].魏博帆,王景娅,孙妍妍,王露,李晓哲.家蚕化学感受蛋白CSP9的抗体制备及表达分析[J].中国农学通报.2019
[2].郭忠建,于宪印,董现云,于萌涵.家蚕核型多角体病毒泛素蛋白单克隆抗体的制备[J].蚕业科学.2019
[3].王平阳,刘艳伟,张雨丽,黄文功,闭立辉.家蚕食性相关蛋白的研究进展[J].蚕业科学.2019
[4].龙羽燕,郭望,蓝黄丽,屈达才,梁湘.家蚕核型多角体病毒囊膜糖蛋白GP64的研究进展[J].广西蚕业.2019
[5].朱峰,高建华,张永红,肖圣燕,邵榆岚.家蚕微孢子虫感染对家蚕海龟蛋白(Bmtutl)基因表达水平的影响[J].昆虫学报.2019
[6].王蓓蕾,孙爱群,李司.家蚕生物反应器表达A组轮状病毒结构蛋白VP7[J].浙江农业科学.2019
[7].WANG,Y,ZHAO,Q,WAN,Q,X,孙涛.家蚕和斜纹夜蛾中P因子抑制蛋白可以结合dsx前体mRNA的靶序列[J].广西蚕业.2019
[8].ZHV,F,TANG,X,XIAO,S,陈思洁.家蚕Bmtutl-519蛋白在家蚕微孢子虫感染BmEN细胞中的作用[J].广西蚕业.2019
[9].杨帆,高珍,马亚飞,蒋彩英,吕正兵.家蚕AGO1蛋白结合RNA的分离与鉴定[J].蚕业科学.2019
[10].郭望.利用BmNPVBac-to-Bac系统在家蚕体内表达狂犬病毒M蛋白及抗体制备[D].广西大学.2019