论文摘要
本文利用硫氢化钠作为水稻的外源硫化氢供体,研究硫化氢对水稻悬浮细胞活性的影响,并在处理时间和处理浓度这两个因素中摸索合理的处理条件,为进一步实验做铺垫。此外通过研究硫氢化钠对水稻悬浮细胞的抗氧化酶系统及抗氰呼吸影响情况,探索硫化氢作为一种潜在的诱导水稻细胞抗性机制。实验结果显示:1.硫氢化钠处理4个小时后,EVANS染色,TTC检测和荧光染色显微镜分析显示硫氢化钠对细胞活性的影响最为明显,细胞死亡率表现出明显的浓度依赖关系,在0.5mM到5mM的浓度梯度下死亡率不断上升。显示硫氢化钠可以作为植物外源硫化氢供体,并对水稻细胞产生影响。该实验选取4小时处理时间为参考水平。2.在0.5mM到1mM低浓度硫氢化钠处理下,水稻悬浮细胞各种抗氧化酶比活明显上升,当硫氢化钠浓度高于1mM时,酶比活开始下降,我们猜测低浓度硫氢化钠对抗氧化酶系统具有诱导作用,而高浓度硫氢化钠破坏抗氧化酶系统。与抗氧化酶系统不太相同的是,总谷胱甘肽的含量随硫氢化钠浓度有明显的依赖性,但是氧化型与还原型谷胱甘肽的比例严重失调。3.硫氢化钠对线粒体电子呼吸链的影响非常明显。由于硫化氢对细胞色素氧化酶C有抑制作用,因此加入硫氢化钠后细胞的细胞色素C途径迅速下降,并导致总呼吸也随之降低,但是交替氧化酶参与的抗氰呼吸途径却明显的上升,弥补细胞色素途径的损失。
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目录摘要Abstract缩略词表前言1 环境因子与植物抗氧化酶系统1.1 植物细胞的抗氧化系统分类1.1.1 抗氧化酶类1.1.1.1 超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)1.1.1.2 过氧化氢酶(Catalase,CAT)1.1.1.3 抗坏血酸过氧化物酶(Antiscorbutic acid peroxidase,APX)1.1.1.4 谷胱甘肽还原酶(Glutathion reductase,GR)1.1.2 抗氧化剂类1.1.2.1 抗坏血酸(Antiscorbutic acid/vitamin C,VC)1.1.2.2 谷胱甘肽(Glutathione,GSH)1.1.2.3 a-生育酚(a-tocopherol,VitE)1.2 环境因子对抗氧化系统的影响2 环境因子与抗氰呼吸2.1 交替氧化酶基因2.2 交替氧化酶的活性调控2.2.1 AOX蛋白构象及其氧化还原调控2.2.2 AOX基因水平的表达调控2.3 胁迫诱导与交替氧化酶2.3.1 非生物性胁迫2.3.2 生物性胁迫3 硫化氢气体对动植物功能的调节3.1 硫化氢的物理化学性质3.2 硫化氢的生理作用3.2.1 硫化氢在植物中的生理作用3.2.2 硫化氢在动物中的生理作用2S在心血管系统的作用'>3.2.2.1 H2S在心血管系统的作用2S在神经系统的作用'>3.2.2.2 H2S在神经系统的作用2S在泌尿生殖系统的作用'>3.2.2.3 H2S在泌尿生殖系统的作用2S对新陈代谢的调节作用'>3.2.2.4 H2S对新陈代谢的调节作用2S对血液系统的作用'>3.2.2.5 H2S对血液系统的作用2S对消化系统的调节'>3.2.2.6 H2S对消化系统的调节4 本文主旨立意第一部分 硫氢化钠处理对水稻悬浮细胞活性的影响1 材料培养与处理2 实验方法2.1 EVANS BLUE检测水稻悬浮细胞死亡率2.2 TTC检测硫氢化钠不同浓度处理下细胞活力2.3 EB/FDA染色及荧光显微镜分析细胞活性3 结果分析3.1 硫化氢对水稻悬浮细胞活性影响及硫氢化钠处理条件的摸索3.1.1 EVANS BLUE对细胞死亡率的检测3.1.2 TTC检测硫氢化钠不同浓度处理下细胞活力趋势3.2 EB/FDA染色及荧光显微镜分析细胞活性4 讨论第二部分 硫氢化钠处理对水稻愈伤组织抗氧化酶系统的影响1 材料培养与处理2 实验方法2.1 POD活性测定方法2.2 CAT活性测定方法2.3 APX活性测定方法2.4 过氧化氢含量测定3 结果分析3.1 硫氢化钠对水稻愈伤组织POD、CAT及APX比活的影响2O2的影响'>3.2 硫氢化钠对水稻愈伤组织H2O2的影响4 讨论第三部分 硫氢化钠处理对水稻悬浮细胞GSSH/GSH水平的影响1 材料培养与处理2 实验方法3 结果分析4 讨论第四部分 硫氢化钠处理对水稻悬浮细胞的抗氰呼吸的影响1 材料培养与处理2 实验方法3 结果分析3.1 硫氢化钠4小时处理水稻悬浮细胞对各呼吸容量的影响3.2 硫氢化钠8小时处理水稻悬浮细胞对各呼吸容量的影响4 讨论第五部分 结果与讨论参考文献致谢
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