ACE2基因A9570G多态性与广东地区汉族2型糖尿病合并冠心病及冠脉病变程度的相关性研究

论文摘要

研究背景随着人们生活水平的提高,劳动方式及饮食结构的改变,平均寿命的延长,糖尿病（diabetes mellitus,DM）的发病率逐年增高,已成为继肿瘤、心脑血管病之后的第三位严重危害人们健康的非传染性疾病。然而,DM本身并不可怕,可怕的是它的并发症。DM可引起多种慢性并发症,导致多器官的损害,成为DM患者致死致残的重要原因。其中,DM的心血管病变是其最严重的并发症,是DM患者死亡的主要原因。DM患者具有显著的心血管病好发倾向,且DM患者合并CHD,冠脉病变常广泛且严重,治疗棘手、费用高。因此,寻找其病因并建立有效的心血管发病风险预测和发病前诊断技术,在临床上具有重要实用价值。事实上,冠状动脉粥样硬化是多种危险因素相互作用的结果,DM患者常同时伴有血脂代谢异常、高血压等多种危险因素,然而有研究发现,即使血糖控制水平和各种心血管危险因素相似,DM患者CHD发病率以及血管病变程度也存在差异;此外,不同种族DM人群冠心病（coronary heart disease,CHD）的发生率也不同,可见传统的心血管危险因素并不能完全解释DM并发CHD的发生率以及冠脉病变的不同表现,其可能与个体遗传背景相关。2型糖尿病（Type 2 Diabetes mellitus,T2DM）占所有DM患者的95%左右,是威胁人类健康最主要的类型。目前认为,T2DM是由遗传、环境、行为多种危险因素共同参与或相互作用引起的多因子病。遗传学病因研究表明,该病受多基因调控,其并发症也可能受病人遗传背景的影响。目前已发现多种基因与T2DM及其血管并发症发生发展有关,主要是与脂肪代谢、脂蛋白氧化和凝血过程相关的候选基因。近年来,随着对肾素-血管紧张素系统（Renin-angiotensinsystem,RAS）的深入研究,其在T2DM及其并发症发生发展中的作用被大量实验所证实,RAS各成员相关基因多态性也备受关注,但研究结果并不一致,有必要深入研究。血管紧张素转换酶2（angiotensin converting enzyme 2,ACE2）是2000年发现的RAS新成员,发挥与血管紧张素转换酶（angiotensin convertingenzyme,ACE）相拮抗的作用,在RAS中发挥重要作用。已有研究表明,该基因某些位点的多态性与疾病的发生和或表型相关。本研究采用聚合酶链反应—限制性片段多态性（polymerase chain reaction restriction fragment lengthpolymorphism,PCR-RFLP）分析法,检测ACE2基因A9570G多态性,通过分析ACE2基因A9570G多态性在不同人群中的分布情况,初步揭示其与T2DM并发CHD的关系,为进一步研究T2DM并发CHD的分子遗传机制打下基础,有助于寻找和建立有效的心血管发病风险预测和发病前诊断技术。通过亚组分析,比较不同基因型间冠脉病变情况,寻找可用于判断病情和评估预后的基因型,有助于指导临床治疗。目的意义1观察ACE2基因A9570G多态性与T2DM并发CHD的相关性,初步确定相关疾病的易感基因。2筛选T2DM并发CHD的敏感基因型,有助于易感人群的早期防治。3寻找和确定影响冠脉病变程度的基因型,根据基因型制定治疗方案,从而使治疗个体化、有效化。4从遗传学角度寻找T2DM并发CHD的危险因素,有助于揭示其遗传病因和发病机制。对象与方法1研究对象对照组100例,T2DM患者208例,其中单纯2型糖尿病组（T2DM组）112例,2型糖尿病合并冠心病组（T2DM+CHD组）96例,单纯冠心病组（CHD组）90例。所有研究对象均空腹抽取外周静脉血4ml,立即提取DNA或低温保存备用。2实验方法2.1用PCR-RFLP分析法检测各组ACE2基因A9570G多态性分布情况,同时记录一般临床资料及生化指标,综合分析ACE2基因A9570G多态性与T2DM并发CHD的相关性。2.2以所有T2DM患者是否患有CHD为因变量Y,年龄、T2DM病程、体重指数、收缩压、舒张压、糖化血红蛋白、总胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白和等位基因为自变量X,进行二分类的Logistic回归分析,寻找T2DM患者并发CHD的独立危险因素。2.3 CHD组和T2DM+CHD组分别按基因型进行亚组分析,以冠脉病变支数和Genisini积分评价冠脉病变情况,分析不同基因型与冠脉病变程度的关系。结果1广东地区汉族人群中存在ACE2基因A9570G多态性。在健康对照组,男性A/G等位基因频率为0.56/0.44;女性A/G等位基因频率为0.52/0.48,AA/AG/GG基因型分别为0.24/0.56/0.2,经X2检验符合Hardy—Weinberg平衡,提示样本具有群体代表性。与香港健康人比较,差异无统计学意义;与高加索人比较,差异有统计学意义。2在女性,四组间等位基因频率和基因型分布差异无统计学意义（X2=0.032,P=0.999和X2=0.752,P=0.993）;在男性,四组间等位基因频率/基因型分布差异有统计学意义（X2=11.972,P=0.007）,组间多重比较显示:T2DM+CHD组与对照组、T2DM组、CHD组比较,差异均有统计学意义,G等位基因频率明显高于其它三组;对照组、T2DM组、CHD组三组间两两比较差异均无统计学意义。3 Logistic回归分析结果显示G等位基因是男性T2DM患者并发CHD的独立危险因素（Exp（B）=2.301,95%CI 1.041-5.084）,不依赖于年龄、体重指数、T2DM病程、糖化血红蛋白、总胆固醇、甘油三脂、低密度脂蛋白以及高密度脂蛋白;在女性,G等位基因未进入方程,不是女性T2DM患者并发CHD的独立危险因素（Exp（B）=0.561,95%CI为0.88-3.587）。4 T2DM+CHD组不同基因型间冠脉病变程度的比较:在男性,不同基因型间冠脉病变支数和Genisini积分差异有统计学意义（X2=6.297,P=0.012和Z=-2.823,P=0.005）,G基因型者冠脉病变支数和Genisini积分高于A基因型者;在女性,不同基因型间冠脉病变支数和Genisini积分差异无统计学意义（X2=0.020,P=0.990和X2=0.791,P=0.673）,G基因型者冠脉病变支数和Genisini积分与A基因型者相同。CHD组不同基因型间冠脉病变程度的比较:男性和女性各组间冠脉病变支数和Genisini积分差异均无统计学意义（在男性,X2=2.035,P=0.154和Z=-0.778,P=0.436;在女性,X2=0.021,P=0.989和X2=1.854,P=0.396）,G基因型者冠脉病变支数和Genisini积分与A基因型者相同。结论1 ACE2基因A9570G多态性分布具有种族差异。2 ACE2基因A9570G多态性与男性T2DM患者并发CHD相关,G等位基因可能是男性T2DM并发CHD的易感基因和独立危险因素。3 ACE2基因A9570G多态性可能与T2DM的发病不相关。4 ACE2基因A9570G多态性可能与非T2DM患者发生CHD不相关。5 G基因型与男性T2DM合并CHD者冠脉病变程度有关。6 ACE2基因A9570G多态性在男性T2DM的基础上才与CHD相关,提示T2DM并发CHD是多种因素相互作用的结果,遗传因素在其中发挥一定作用。

论文目录

• 摘要
• ABSTRACT
• 前言
• 对象与方法
• 结果
• 讨论
• 结论
• 参考文献
• 全文总结
• 附录 中英文缩略词对照表
• 攻读学位期间的成果
• 致谢
• 研究生毕业论文统计学审稿证明